一种基于人源肝细胞系HepG2的维生素B3缺乏模型制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118773137A

    公开(公告)日:2024-10-15

    申请号:CN202410844129.4

    申请日:2024-06-27

    Abstract: 本发明属于生物工程技术,公开了一种基于人源肝细胞系HepG2的维生素B3缺乏模型制备方法和应用;所述方法包含以下步骤:(1)复苏HepG2细胞,并用DMEM培养基(含血清)培养;(2)细胞密度长到80%左右进行传代,使用DMEM培养基(含血清)连续三次传代;(3)换维生素B3缺乏培养基(含血清)连续进行三次传代,制作缺乏维生素B3的HepG2模型。本发明对DMEM细胞培养基(无血清)的成分进行了调整,通过该定制培养基对HepG2细胞进行传代培养使其达到维生素B3缺乏状态,细胞增殖速率在细胞培养第3天时显著提高,模型构建成功率可达95%以上。本发明采用优化细胞培养基和细胞培养方案的手段,可使HepG2细胞充分表现出因维生素B3摄入不足而导致其缺乏的生理状态,并可采用维生素B3缺乏培养基传代培养细胞使其继续维持维生素B3缺乏生理状态,可作为永生化细胞的基础生理模型满足不同的实验需求,具有广泛的应用前景。

    一种基于肝原代细胞的维生素B3缺乏模型制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118562722A

    公开(公告)日:2024-08-30

    申请号:CN202410844107.8

    申请日:2024-06-27

    Abstract: 本发明属于生物工程技术,公开了一种基于肝原代细胞的维生素B3缺乏模型制备方法和应用;所述方法包含以下步骤:(1)提取肝原代细胞,并将肝原代细胞用DMEM培养基(含血清)种植到培养皿上,种植密度为5×105/mL,种植后5‑6小时左右,换DMEM培养基(含血清);(2)次日换培养基,肝细胞缺乏模型构建组换有维生素B3缺乏培养基(无血清);(3)第三日,肝细胞缺乏模型构建组换维生素B3缺乏培养基(无血清);(4)第四日,肝细胞缺乏模型构建组换维生素B3缺乏培养基(无血清),持续培养。本发明模型构建成功率可达95%以上。本发明采用优化细胞培养基和细胞培养方案的手段,可使肝原代细胞充分表现出因维生素B3摄入不足而导致其缺乏的生理状态,可作为原代细胞的基础生理模型满足不同的实验需求,具有广泛的应用前景。

    一种添加鼠尾草酸的猪卵母细胞体外成熟培养液及其应用

    公开(公告)号:CN107574144B

    公开(公告)日:2020-10-02

    申请号:CN201710985604.X

    申请日:2017-10-20

    Abstract: 本发明涉及细胞培养技术领域,具体涉及一种添加鼠尾草酸的卵母细胞体外成熟培养液及其应用。所述体外成熟培养液,其特征在于,组分包括鼠尾草酸;所述鼠尾草酸浓度范围为1‑20μM。本发明通过在猪卵母细胞成熟培养液中添加鼠尾草酸,配合其他组分的协同作用,提高了猪卵母细胞成熟质量,对猪胚胎早期发育有良好的促进效果。结果表明,浓度适宜的鼠尾草酸可有效提高卵母细胞成熟质量,从而提升猪卵母细胞体外发育潜力。且该体外成熟培养液制备简单,操作方便,具有较大应用前景。

    一种以曲拉为原料梯度pH值分级生产干酪素的方法和系统

    公开(公告)号:CN108567045A

    公开(公告)日:2018-09-25

    申请号:CN201710155093.9

    申请日:2017-03-14

    Abstract: 本发明提出了一种制备干酪素的方法及系统。所述方法包括:(1)将曲拉溶液的pH值调节至第一预定pH值;(2)将步骤(1)中所得到的混合物进行第一固相分离处理,以便获得第一上清液和第一沉淀;(3)将所述第一上清液的pH值调节至4.4~4.6;以及(4)将步骤(3)中所得到的混合物进行第二固相分离处理,以便获得第二沉淀,所述第二沉淀构成第一目标干酪素。利用本发明的制备干酪素的方法和系统能够分别得到不同级别(溶解pH值)且纯度较高的干酪素。此外,本发明的方法和系统操作简便,适于规模化生产。

    一种通过辅助发酵剂菌株增强水果风味的干酪及其制备方法

    公开(公告)号:CN108294114A

    公开(公告)日:2018-07-20

    申请号:CN201710024195.7

    申请日:2017-01-13

    Abstract: 本发明提出了微生物、其在制备干酪中的用途、制备干酪的方法及干酪。所述微生物为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus),于2012年06月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.6287。利用本发明的微生物制成的干酪具有极佳的水果风味、较丰富的营养成分、较好的质构以及较强的稳定性。

    一种pH响应型载氨肽酶微球及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN111849957B

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202010769232.9

    申请日:2020-07-31

    Abstract: 本发明公开了一种pH响应型载氨肽酶微球及其制备方法和应用,所述pH响应型载氨肽酶微球以壳聚糖微球为壁材装载氨肽酶形成,装载氨肽酶的pH值为6.0‑7.5,且氨肽酶与壳聚糖微球质量之比为1‑50:1;其制备方法包括:壳聚糖微球的制备、氨肽酶储备液的配置和载氨肽酶微球的制备。本发明利用氨肽酶和壳聚糖的静电相互作用,制备出具有pH响应的载酶微球,在pH为5.5‑7.0时不发生酶的释放,在pH≤5.5时可发生酶的释放;在干酪制备中,随pH值的降低发生了酶释放,释放发生于干酪成熟开始时,减少了酶随乳清排出的损失,降低了干酪的生产成本,利于工业生产的应用。

    一种添加迷迭香酸的卵母细胞体外成熟培养液及其应用

    公开(公告)号:CN107603944B

    公开(公告)日:2020-10-02

    申请号:CN201710986873.8

    申请日:2017-10-20

    Abstract: 本发明涉及细胞培养技术领域,具体涉及一种添加迷迭香酸的卵母细胞体外成熟培养液及其应用。所述体外成熟培养液,其特征在于,组分包括迷迭香酸;所述迷迭香酸浓度范围为2‑200μM。本发明通过在猪卵母细胞成熟培养液中添加迷迭香酸,配合其他组分的协同作用,提高了猪卵母细胞成熟质量,对猪胚胎发育有良好的促进效果。结果表明,本发明提供的体外成熟培养液可提高卵母细胞抗氧化能力,浓度适宜的迷迭香酸可有效提高卵母细胞成熟质量,从而提升猪卵母细胞体外发育潜力。且该体外成熟培养液制备简单,操作方便,具有较大应用前景。

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