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公开(公告)号：CN110283919A
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201910387932.9
申请日：2019-05-10
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/10 , C12R1/42
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，特别涉及一种用于沙门氏菌定量检测的生物传感器及方法。该生物传感器包括RPA反应试剂、SDA反应试剂和显色试剂。本发明基于重组链替代反应对沙门氏菌的双链核酸进行扩增，得到带有富G序列和切刻酶识别位点的dsDNA。Nt.Bst NBI切刻酶特异性识别酶切位点并进行切割，在Bst DNA聚合酶的作用下，形成切口的DNA链将会延伸，将DNA链上的G-四联体替换下来。释放出的G-四联体与Hemin结合，形成G4 DNAzyme，可催化H2O2将无色的TMB氧化为肉眼可见的蓝色oxTMB，进而通过颜色变化和吸光值的改变对沙门氏菌进行检测。
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公开(公告)号：CN110205394A
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201910389304.4
申请日：2019-05-10
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12R1/42
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，特别涉及一种用于检测沙门氏菌的生物传感器及方法。该生物传感器包括RPA反应试剂、Lambda核酸外切酶切割反应试剂、HCR反应试剂和显色试剂。本发明通过多酶系统对沙门氏菌的双链核酸进行扩增，得到在5’端磷酸化的dsDNA。Lambda外切酶消化dsDNA中的5’-磷酸化链，RPA产物变成单链。通用接头被暴露出来，启动HCR反应，释放出的G-四联体与Hemin结合，形成G4 DNAzyme，可催化H2O2将无色的TMB氧化为肉眼可见的蓝色oxTMB，进而通过颜色变化和吸光值的改变对沙门氏菌进行检测。本发明具有可视化、通用性、快速和高敏感性等特点。
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公开(公告)号：CN110283919B
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN201910387932.9
申请日：2019-05-10
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/10 , C12R1/42
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，特别涉及一种用于沙门氏菌定量检测的生物传感器及方法。该生物传感器包括RPA反应试剂、SDA反应试剂和显色试剂。本发明基于重组链替代反应对沙门氏菌的双链核酸进行扩增，得到带有富G序列和切刻酶识别位点的dsDNA。Nt.Bst NBI切刻酶特异性识别酶切位点并进行切割，在Bst DNA聚合酶的作用下，形成切口的DNA链将会延伸，将DNA链上的G‑四联体替换下来。释放出的G‑四联体与Hemin结合，形成G4 DNAzyme，可催化H2O2将无色的TMB氧化为肉眼可见的蓝色oxTMB，进而通过颜色变化和吸光值的改变对沙门氏菌进行检测。
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公开(公告)号：CN114192202B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202111503442.4
申请日：2021-12-09
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： B01L3/00 , B01F31/00 , B01F33/30 , B01F33/3031 , B01F33/3032 , B01D53/26 , B01D53/22
摘要： 本发明公开了属于微流控芯片技术领域的一种应用于微流控芯片的便携式磁珠自动化混合模块。在微流控芯片中利用RD改性的光敏水凝胶制造可控微阀，在混合腔体内利用双螺旋形状的微线圈驱动磁珠向混合腔体的中心移动，振动马达带动柔性基底振动，将聚集的磁珠驱动扩散到混合腔体四周，二者如此反复。磁珠主动移动，增大了磁珠与待测物的接触概率，缩短了捕获时间，提高了捕获效率。激光发射器、双螺旋微磁线圈、振动马达都由以ATmega芯片为核心的控制模块控制，整体装置进行了集成化设计，可实现便携式、自动化混合，为微流控芯片中磁珠与待测物混合提供了新的装置模块。
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公开(公告)号：CN109609607B
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN201811594801.X
申请日：2018-12-25
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/6851
摘要： 本发明提供一种用于锌离子定量检测的方法，本发明检测主要包含两个反应步骤：依赖性切割反应和RT‑qPCR，在第一步中，将5μL Zn2+浓度的溶液、10μL Zn2+依赖性切割核酶溶液(17ES)和85μL切割缓冲液(300mM NaCl，40mM HEPES，pH 7.5)混合；在37℃下反应60min，之后，精准快速稀释105倍后进行RT‑qPCR实验，被切割的底物链无法作为模板进行扩增反应，而未被切割的底物链则可以通过扩增反应实现信号放大，最终结果以切割前后的Cq值变化(ΔCq)来表示切割效果，实现Zn2+的定量检测。本发明采用的Zn2+依赖性切割脱氧核酶17E是已知Zn2+依赖性切割脱氧核酶中切割速率最快的核酶。该酶能够催化切割底物链，并且对Zn2+具有高度亲和力和特异性。
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公开(公告)号：CN112608983B
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110178310.2
申请日：2021-02-08
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/6851
摘要： 本发明提供一种外泌体的纸基检测方法，包括：（1）识别与分子转换体系，（2）扩增反应体系，（3）LFB检测分析体系。本发明将外泌体转换为单链DNA靶标，通过核酸扩增技术对单链DNA进行扩增，进一步利用以PtAu‑NiO2纳米酶为信号探针的侧流层析试纸对扩增出的单链DNA进行检测。本发明以核酸侧流层析试纸为终端检测平台，解决了外泌体无法同时定性定量检测的难题，实现了对外泌体的简便、低成本检测。
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公开(公告)号：CN112500850B
公开(公告)日：2021-04-27
申请号：CN202110169824.1
申请日：2021-02-08
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/68 , G01N21/64 , B82Y20/00 , G01N33/569 , G01N33/58
摘要： 本发明提供一种三功能的磁性适配体三核酸纳米探针，包括：（1）磁珠，（2）适配体三核酸骨架链，（3）单链DNA靶标。本发明以适配体序列为识别元件、三核酸为分子转换元件，磁珠为分离纯化元件，构建了具有三重功能的磁性适配体三核酸DNA纳米探针，实现了配体与单链DNA的等量转换。将不易检测的配体转换为容易测定的单链DNA靶标，解决了目前配体不易直接定性定量同时测定的难题。
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公开(公告)号：CN109777860A
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201910087970.2
申请日：2019-01-29
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/6825 , C12Q1/6844
摘要： 本发明涉及一种锌离子(Zn2+)检测方法，将Zn2+依赖性切割反应与杂交链式反应(HCR)和链置换扩增(SDA)反应相结合，构建了一种基于恒温三步功能核酸级联扩增的超灵敏可视化生物传感器检测Zn2+，为检测Zn2+提供了简单、快速、超灵敏的工具。
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公开(公告)号：CN114192202A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111503442.4
申请日：2021-12-09
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： B01L3/00 , B01F31/00 , B01F33/30 , B01F33/3031 , B01F33/3032 , B01D53/26 , B01D53/22
摘要： 本发明公开了属于微流控芯片技术领域的一种应用于微流控芯片的便携式磁珠自动化混合模块。在微流控芯片中利用RD改性的光敏水凝胶制造可控微阀，在混合腔体内利用双螺旋形状的微线圈驱动磁珠向混合腔体的中心移动，振动马达带动柔性基底振动，将聚集的磁珠驱动扩散到混合腔体四周，二者如此反复。磁珠主动移动，增大了磁珠与待测物的接触概率，缩短了捕获时间，提高了捕获效率。激光发射器、双螺旋微磁线圈、振动马达都由以ATmega芯片为核心的控制模块控制，整体装置进行了集成化设计，可实现便携式、自动化混合，为微流控芯片中磁珠与待测物混合提供了新的装置模块。
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公开(公告)号：CN113933281B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111521834.3
申请日：2021-12-14
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： G01N21/64 , G01N33/569 , G01N33/574
摘要： 本发明提供一种基于光纤倏逝波荧光生物传感器的外泌体检测方法，包括：（1）外泌体‑信号探针结合体系，（2）S‑EWFB检测分析体系。本发明对信号探针进行双标记，一端修饰信号分子，一端修饰疏水分子，通过疏水相互作用将双标记的信号探针嵌入外泌体膜上，使得一个外泌体表面连接多个信号分子，进一步利用光纤表面修饰了特异性适配体的倏逝波传感平台对反应样品进行荧光信号的实时监测与分析。本发明以光纤倏逝波荧光检测仪为终端检测平台，实现了对外泌体的简单、快速、实时、高灵敏的连续定量检测。不仅如此，本发明提供的光纤检测平台具有良好的表面再生能力。
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