一种用于沙门氏菌定量检测的生物传感器及方法

    公开(公告)号:CN110283919A

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201910387932.9

    申请日:2019-05-10

    摘要: 本发明涉及分子生物学技术领域,特别涉及一种用于沙门氏菌定量检测的生物传感器及方法。该生物传感器包括RPA反应试剂、SDA反应试剂和显色试剂。本发明基于重组链替代反应对沙门氏菌的双链核酸进行扩增,得到带有富G序列和切刻酶识别位点的dsDNA。Nt.Bst NBI切刻酶特异性识别酶切位点并进行切割,在Bst DNA聚合酶的作用下,形成切口的DNA链将会延伸,将DNA链上的G-四联体替换下来。释放出的G-四联体与Hemin结合,形成G4 DNAzyme,可催化H2O2将无色的TMB氧化为肉眼可见的蓝色oxTMB,进而通过颜色变化和吸光值的改变对沙门氏菌进行检测。

    一种用于沙门氏菌定量检测的生物传感器及方法

    公开(公告)号:CN110283919B

    公开(公告)日:2021-01-01

    申请号:CN201910387932.9

    申请日:2019-05-10

    摘要: 本发明涉及分子生物学技术领域,特别涉及一种用于沙门氏菌定量检测的生物传感器及方法。该生物传感器包括RPA反应试剂、SDA反应试剂和显色试剂。本发明基于重组链替代反应对沙门氏菌的双链核酸进行扩增,得到带有富G序列和切刻酶识别位点的dsDNA。Nt.Bst NBI切刻酶特异性识别酶切位点并进行切割,在Bst DNA聚合酶的作用下,形成切口的DNA链将会延伸,将DNA链上的G‑四联体替换下来。释放出的G‑四联体与Hemin结合,形成G4 DNAzyme,可催化H2O2将无色的TMB氧化为肉眼可见的蓝色oxTMB,进而通过颜色变化和吸光值的改变对沙门氏菌进行检测。

    一种用于检测沙门氏菌的生物传感器及方法

    公开(公告)号:CN110205394A

    公开(公告)日:2019-09-06

    申请号:CN201910389304.4

    申请日:2019-05-10

    IPC分类号: C12Q1/689 C12Q1/6844 C12R1/42

    摘要: 本发明涉及分子生物学技术领域,特别涉及一种用于检测沙门氏菌的生物传感器及方法。该生物传感器包括RPA反应试剂、Lambda核酸外切酶切割反应试剂、HCR反应试剂和显色试剂。本发明通过多酶系统对沙门氏菌的双链核酸进行扩增,得到在5’端磷酸化的dsDNA。Lambda外切酶消化dsDNA中的5’-磷酸化链,RPA产物变成单链。通用接头被暴露出来,启动HCR反应,释放出的G-四联体与Hemin结合,形成G4 DNAzyme,可催化H2O2将无色的TMB氧化为肉眼可见的蓝色oxTMB,进而通过颜色变化和吸光值的改变对沙门氏菌进行检测。本发明具有可视化、通用性、快速和高敏感性等特点。

    一种基于双劈裂功能核酸变构的孔雀石绿生物传感器

    公开(公告)号:CN114152599B

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202111455209.3

    申请日:2021-12-01

    IPC分类号: G01N21/64 G01N33/53

    摘要: 本发明公开了一种基于双劈裂功能核酸变构的孔雀石绿生物传感器,包括:(1)双劈裂传感器序列;(2)双劈裂功能核酸传感器离子优化;(3)孔雀石绿的检测。设计原理是双劈裂传感器序列通过核酸构象变化,实现孔雀石绿的检测。根据硫黄素T(ThT)与G四链体作用,产生荧光,而加入孔雀石绿后实现核酸高级结构的变化,进而减弱荧光,实现孔雀石绿简便、快速、低成本、超灵敏的检测。

    一种靶向协同降脂的纳米双药制备及应用

    公开(公告)号:CN114767660B

    公开(公告)日:2022-09-02

    申请号:CN202210708094.2

    申请日:2022-06-22

    摘要: 本发明公开了一种装载天然产物靶向协同降脂的功能核酸纳米双药的制备方法及应用。利用oxyethyleneglycol bridge修饰核酸适体药物通过PCR扩增获得双侧5’端带有核酸适体粘性末端的扩增子,将纯化扩增子、焦磷酸根、镁离子、天然产物在70℃下进行一锅法自组装,得到功能核酸纳米双药。该纳米双药具有脂肪靶向性、粒径可压缩性、高效装载与刺激响应释放性等特性,在细胞水平与活体水平,能够实现细胞水平与活体水平的协同肥胖治疗。本发明制备核酸纳米药物的方法简单、成本低廉,非常适用于天然产物的递送与生物医学应用。

    一种基于级联放大快速定量检测阪崎肠杆菌的方法

    公开(公告)号:CN114015748B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN202210010868.4

    申请日:2022-01-06

    IPC分类号: C12Q1/6804 C12Q1/10

    摘要: 本发明构建了一种基于级联放大快速定量检测阪崎肠杆菌的生物传感器。该传感器通过磁富集、抗体‑核酸适体识别、EXPAR和DNAzyme信号积累实现阪崎肠杆菌的四重级联放大。首先,制备免疫磁珠用于磁富集;其次,磁分离从复杂基质中直接捕获靶标,随后添加核酸适体形成了抗体‑靶标‑融合核酸适体的免疫三明治夹心结构,保证传感器的高特异性;再次,通过EXPAR实现信号的指数放大;最后,通过产物中的富G序列形成类酶活性的四链体,催化显色信号输出。本方法具有高灵敏度、高特异性,快速简便,在2 h内即可实现对阪崎肠杆菌的定量检测,整个过程免提取,结果可视化,有效解决了传感器制备复杂、测定时间长的难题。

    一种基于光纤倏逝波荧光生物传感器的外泌体检测方法

    公开(公告)号:CN113933281B

    公开(公告)日:2022-03-18

    申请号:CN202111521834.3

    申请日:2021-12-14

    摘要: 本发明提供一种基于光纤倏逝波荧光生物传感器的外泌体检测方法,包括:(1)外泌体‑信号探针结合体系,(2)S‑EWFB检测分析体系。本发明对信号探针进行双标记,一端修饰信号分子,一端修饰疏水分子,通过疏水相互作用将双标记的信号探针嵌入外泌体膜上,使得一个外泌体表面连接多个信号分子,进一步利用光纤表面修饰了特异性适配体的倏逝波传感平台对反应样品进行荧光信号的实时监测与分析。本发明以光纤倏逝波荧光检测仪为终端检测平台,实现了对外泌体的简单、快速、实时、高灵敏的连续定量检测。不仅如此,本发明提供的光纤检测平台具有良好的表面再生能力。