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公开(公告)号：CN113215084B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202110656119.4
申请日：2021-06-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种羊胎儿皮肤成纤维细胞、其分离方法与应用，其中，所述成纤维细胞的保藏号为CCTCC No：C2019202。本发明在羊胎儿皮肤成纤维细胞SFSFS的分离过程中分别采用含0.05%胰蛋白酶和0.02%EDTA的消化液以及Ⅳ型胶原酶处理羊胎儿皮肤组织，然后用含0.01‑0.05%胰蛋白酶‑EDTA消化液处理细胞；并采用3%胎牛血清+10‑40ng/ml的h‑EGF替代10%的胎牛血清培养羊胎儿皮肤成纤维细胞，使胎牛血清使用量大大减少，降低了SFSFS培养成本和羊口疮病毒生产成本，节约了资源。本发明的细胞株能够明显提高羊口疮病毒的分离率、缩短分离时间，且分离的羊口疮病毒毒价和病毒拷贝数也更高，可以为羊口疮病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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公开(公告)号：CN113215084A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110656119.4
申请日：2021-06-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种羊胎儿皮肤成纤维细胞、其分离方法与应用，其中，所述成纤维细胞的保藏号为CCTCC No：C2019202。本发明在羊胎儿皮肤成纤维细胞SFSFS的分离过程中分别采用含0.05%胰蛋白酶和0.02%EDTA的消化液以及Ⅳ型胶原酶处理羊胎儿皮肤组织，然后用含0.01‑0.05%胰蛋白酶‑EDTA消化液处理细胞；并采用3%胎牛血清+10‑40ng/ml的h‑EGF替代10%的胎牛血清培养羊胎儿皮肤成纤维细胞，使胎牛血清使用量大大减少，降低了SFSFS培养成本和羊口疮病毒生产成本，节约了资源。本发明的细胞株能够明显提高羊口疮病毒的分离率、缩短分离时间，且分离的羊口疮病毒毒价和病毒拷贝数也更高，可以为羊口疮病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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公开(公告)号：CN113355275B
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202110656125.X
申请日：2021-06-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种羔绵羊睾丸支持细胞、睾丸支持细胞亚克隆及其分离方法和应用，其中，所述支持细胞SCST的保藏编号为CCTCC No.C2019203，将其转染SV40大T抗原基因使其永生化，然后进行压力粗筛、压力分种以及持续传代，得到细胞亚克隆SCST‑T F13，其保藏编号为CCTCC No.C202130，可用于牛结节性皮肤病、羊痘及羊口疮等病毒的分离及规模化繁殖。所述细胞亚克隆可以用含国产血清的培养基培养，降低了生产成本，适合规模化生产应用。本发明的细胞亚克隆与常规原代细胞相比，而且能够明显提高牛结节性皮肤病毒的分离率，且牛结节性皮肤病毒的致病变时间明显缩短、分离病毒的拷贝数比传统细胞提高100倍以上，可以为牛结节性皮肤病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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公开(公告)号：CN113136361A
公开(公告)日：2021-07-20
申请号：CN202110656116.0
申请日：2021-06-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种羔绵羊睾丸支持细胞及其分离方法和应用，其中，所述羔绵羊睾丸支持细胞SCST的保藏编号为CCTCC No.C2019203。本发明的SCST细胞可直接用于羊口疮病毒的规模化繁殖；也可转染端粒酶基因使其永生化，然后进行压力粗筛、压力分种以及持续传代，得到亚克隆细胞系，将该亚克隆细胞系用于羊口疮病毒的规模化繁殖。所述亚克隆细胞系可以用含国产血清的培养基培养，降低了生产成本，适合规模化生产应用。本发明提供的亚克隆细胞系与常规原代细胞相比，能够明显提高羊口疮病毒的分离率，且羊口疮病毒的致病变时间明显缩短、分离病毒的拷贝数比原代细胞提高100倍以上，可以为羊口疮病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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公开(公告)号：CN113355275A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110656125.X
申请日：2021-06-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种羔绵羊睾丸支持细胞、睾丸支持细胞亚克隆及其分离方法和应用，其中，所述支持细胞SCST的保藏编号为CCTCC No.C2019203，将其转染SV40大T抗原基因使其永生化，然后进行压力粗筛、压力分种以及持续传代，得到细胞亚克隆SCST‑T F13，其保藏编号为CCTCC No.C202130，可用于牛结节性皮肤病、羊痘及羊口疮等病毒的分离及规模化繁殖。所述细胞亚克隆可以用含国产血清的培养基培养，降低了生产成本，适合规模化生产应用。本发明的细胞亚克隆与常规原代细胞相比，而且能够明显提高牛结节性皮肤病毒的分离率，且牛结节性皮肤病毒的致病变时间明显缩短、分离病毒的拷贝数比传统细胞提高100倍以上，可以为牛结节性皮肤病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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