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公开(公告)号：CN106345220B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN201510410459.3
申请日：2015-07-13
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明涉及一种吸附装置在吸附挥发的溴化乙锭中的应用，其目的在于提供一种能够吸附核酸凝胶电泳过程中的溴化乙锭的装置，减少或杜绝EB污染实验室空气的同时，且能提高琼脂糖凝胶的利用率，保证试验的均一性，有利于推动生物学和医学，药物设计等领域的发展，为实验人员安全操作提供保障；本发明所述吸附装置包括冷凝盒和吸附盒，所述冷凝盒上下开口，所述吸附盒底部开口，顶部设有顶盖，所述吸附盒底部与所述冷凝盒顶部接通，所述冷凝盒包括冷凝层，所述冷凝层一侧设有进水孔，另一侧设有出水孔，所述冷凝层上设有贯穿上下面的通气孔；所述吸附盒包括吸附层，所述吸附层内放置有透气膜包裹的活性炭，所述吸附层设有与所述冷凝层通气孔相通的透孔。
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公开(公告)号：CN106591373B
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201611208509.0
申请日：2016-12-23
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12N15/867 , C12N5/10
摘要： 一种用于增强PPRV复制的敏感细胞亚克隆Vero/Slam的制备方法，包含山羊淋巴细胞信号活化因子Slam引物序列，Slam慢病毒表达载体构建，Slam复制缺陷型慢病毒的获得，Slam慢病毒感染靶标细胞Vero，敏感细胞亚克隆Vero/Slam的筛选、验证，增强小反刍兽疫病毒PPRV易感性的验证等。本发明包括具有提高PPRV复制能力的阳性细胞亚克隆，该细胞亚克隆具有良好的生物学特性以及遗传稳定性，其稳定表达的Slam具有明显增强PPRV复制的功效。
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公开(公告)号：CN106086240B
公开(公告)日：2019-12-13
申请号：CN201610536967.0
申请日：2016-07-08
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6804
摘要： 本发明公开了一种用于检测小反刍兽疫病毒抗原的免疫磁珠试剂盒及其用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV F蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN106244525B
公开(公告)日：2019-06-18
申请号：CN201610674346.9
申请日：2016-08-16
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种心肌细胞与睾丸支持细胞的联合培养方法。所述的联合培养方法包括以下步骤：(1)睾丸支持细胞的培养；(2)心肌组织收集、处理及消化，以获得心肌细胞；(3)采用双层培养法，用睾丸支持细胞联合培养心肌细胞，其中上层为睾丸支持细胞层，下层为心肌细胞；(4)分离、纯化培养的心肌细胞。本发明通过试验发现，用睾丸支持细胞联合培养心肌细胞，相比常规培养组，联合培养组细胞生长速度加快，细胞生长更加旺盛。联合培养组细胞铺满单层需要3‑4d，而常规培养组需要4‑5d。由此证明，睾丸支持细胞可有效促进心肌细胞生长。这种简单且低成本的心肌细胞培养方法，对心脏的生长、发育、生理、代谢、病理研究有重要的现实意义。
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公开(公告)号：CN109266614A
公开(公告)日：2019-01-25
申请号：CN201810942657.8
申请日：2018-08-17
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12N5/10 , C12N15/867
摘要： 本发明提供一种基于小反刍兽疫病毒受体的细胞BHK/slam，其保藏号为：CCTCC NO:C201895，该细胞表达的小反刍兽疫病毒受体-山羊淋巴细胞信号活化因子完整ORF具有明显增强小反刍兽疫病毒复制的功能，该细胞通过过量表达小反刍兽疫病毒特定细胞受体缩短了致细胞病变后的收毒时间（从4-7d缩短到3-4d），提高了小反刍兽疫病毒毒价（ct值从20.66提高到16.91），同体积病毒拷贝数也得到了大幅度增加（拷贝数从4.1X107提高到5.3X108），同时节约了成本。为小反刍兽疫病毒分离及疫苗毒生产提供了良好工具，也为小反刍兽疫病毒致病机制研究提供细胞模型。本发明还提供了该细胞的制备及应用。
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公开(公告)号：CN104800842B
公开(公告)日：2017-06-23
申请号：CN201510172159.6
申请日：2015-04-13
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： A61K39/275 , A61K47/42 , A61P31/20
摘要： 本发明提供一种山羊痘、绵羊痘二价细胞弱毒疫苗，有效成分包括山羊痘病毒细胞传代致弱毒以及绵羊痘病毒细胞传代致弱毒；其中，山羊痘病毒细胞传代致弱毒为山羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株Goatpox Virus HN‑XY2010F43株CCTCC V201503，绵羊痘病毒细胞传代致弱毒为绵羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株Sheeppox Virus GS‑WW 2010 F44株CCTCC V201504。本发明的山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗安全，且能够产生有效的免疫保护力。本发明对于研制安全高效的弱毒疫苗以及用本发明公开的弱毒株规模化生产山羊痘、绵羊痘病毒二价细胞弱毒疫苗来防控山羊痘和绵羊痘具有重要的现实意义。
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公开(公告)号：CN106755110A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611208506.7
申请日：2016-12-23
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12N15/867 , C12N5/10
摘要： 一种用于增强PPRV复制的敏感细胞亚克隆Vero/Slam/V的制备方法，包含山羊淋巴细胞信号活化因子Slam/V引物序列，slam/V慢病毒表达载体构建，slam/V复制缺陷型慢病毒的获得，slam/V慢病毒感染靶标细胞Vero，敏感细胞亚克隆Vero/Slam/V的筛选、验证，增强小反刍兽疫病毒易感性的验证等。本发明包括具有提高PPRV复制能力的阳性细胞亚克隆，该阳性细胞亚克隆具有良好的生物学特性以及遗传稳定性，其稳定表达的Slam/V具有明显增强PPRV复制的功效。
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公开(公告)号：CN106591373A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611208509.0
申请日：2016-12-23
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12N15/867 , C12N5/10
摘要： 一种用于增强PPRV复制的敏感细胞亚克隆Vero/Slam的制备方法，包含山羊淋巴细胞信号活化因子Slam引物序列，Slam慢病毒表达载体构建，Slam复制缺陷型慢病毒的获得，Slam慢病毒感染靶标细胞Vero，敏感细胞亚克隆Vero/Slam的筛选、验证，增强小反刍兽疫病毒PPRV易感性的验证等。本发明包括具有提高PPRV复制能力的阳性细胞亚克隆，该细胞亚克隆具有良好的生物学特性以及遗传稳定性，其稳定表达的Slam具有明显增强PPRV复制的功效。
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公开(公告)号：CN103952377B
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201410161991.1
申请日：2014-04-21
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12N7/00 , C12N5/071 , A61K39/275 , A61P31/20 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了一种用于羊传染性脓疱病毒分离培养和增殖的细胞系及其制备方法和应用。本发明的一种细胞系是通过对新生牛睾丸原代细胞进行分离和纯化后得到的一种新生牛睾丸支持细胞系。研究结果发现，该细胞系对于接种羊传染性脓疱病毒较为敏感，用该细胞系所增殖的病毒滴度较新生牛睾丸原代细胞高约1个病毒滴度，比MDBK细胞系高1.9个病毒滴度。利用该细胞系分离ORFV病毒可以保证病毒的均一、稳定，同时可以防止因多次利用原代细胞而使所分离的病毒带有其他病原的风险。此外，利用该传代细胞系制备疫苗简化了疫苗的生产工艺、缩短了生产周期，降低了生产成本，同时还保证了制备得到的疫苗质量稳定，因此，对疫苗规模化生产具有一定的现实意义。
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