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公开(公告)号:CN116549165A
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202310588042.0
申请日:2023-05-24
申请人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要: 本发明公开一种动物活疫苗皮内连续接种免疫器,包括移液枪外套,移液枪外套内顶部设有体积调节机构,体积调节机构的底部设有疫苗储液管,疫苗储液管位于移液枪外套内,疫苗储液管外连通有疫苗储存机构,疫苗储存机构位于移液枪外套的外侧,移液枪外套的底部连通有注射机构,注射机构包括与移液枪外套连通的注射针板,注射针板内连通有若干注射针。本发明可以连续移取疫苗,同时可以做到连续免疫,同时疫苗储存机构和注射机构可与移液枪外套拆分,可更换新的疫苗储存机构和注射机构,灵活方便;在给动物做免疫时不仅能够保证将满足剂量的疫苗无损耗、精确的接入皮内,而且还能避免交叉感染、提高接种效率,减少劳动强度。
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公开(公告)号:CN106345220B
公开(公告)日:2023-04-28
申请号:CN201510410459.3
申请日:2015-07-13
申请人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要: 本发明涉及一种吸附装置在吸附挥发的溴化乙锭中的应用,其目的在于提供一种能够吸附核酸凝胶电泳过程中的溴化乙锭的装置,减少或杜绝EB污染实验室空气的同时,且能提高琼脂糖凝胶的利用率,保证试验的均一性,有利于推动生物学和医学,药物设计等领域的发展,为实验人员安全操作提供保障;本发明所述吸附装置包括冷凝盒和吸附盒,所述冷凝盒上下开口,所述吸附盒底部开口,顶部设有顶盖,所述吸附盒底部与所述冷凝盒顶部接通,所述冷凝盒包括冷凝层,所述冷凝层一侧设有进水孔,另一侧设有出水孔,所述冷凝层上设有贯穿上下面的通气孔;所述吸附盒包括吸附层,所述吸附层内放置有透气膜包裹的活性炭,所述吸附层设有与所述冷凝层通气孔相通的透孔。
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公开(公告)号:CN109735499B
公开(公告)日:2021-10-15
申请号:CN201910037462.3
申请日:2019-01-15
申请人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要: 本发明公开了一种新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系及其建立方法和应用。所述的新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系,命名为新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系hTERT‑NBSC,其保藏编号CCTCC NO:C2018201。试验发现,hTERT‑NBSC可以连续传代65代以上,且生长增殖特性保持不变。该细胞系对接种ORFV较为敏感,可以高效增殖ORFV病毒,且可以保证病毒的均一、稳定。用该细胞系所增殖的ORFV病毒滴度与新生牛睾丸支持细胞相当,且细胞分种率高于NBSC,分种率可达1:3。同时利用该传代细胞系来制备疫苗,简化了生产工艺、缩短了生产周期,降低了生产成本,同时还保证了制备得到的羊传染性脓疱病疫苗的质量稳定。因此,本发明的提出对羊传染性脓疱病疫苗的规模化生产提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN112852874A
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN202110155142.5
申请日:2021-02-04
申请人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号: C12N15/85 , C12N15/55 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12Q1/70 , C12Q1/6851 , G01N33/569 , C12R1/91
摘要: 本发明公开了HDAC5基因敲除的BHK‑21细胞系的构建方法,利用CRISPR/Cas9技术对口蹄疫疫苗生产用细胞系BHK‑21中的HDAC5进行基因敲除,将用于敲除HDAC5的CRISPR质粒转染BHK‑21细胞后,利用抗生素筛选结合梯度稀释,用克隆环法分离到了多个细胞克隆。提取基因组DNA后进行PCR扩增、测序,成功鉴定到了1个HDAC5基因发生纯合移码突变的细胞克隆,其中HDAC5‑KO‑A2在Cas9预定切割位置处有13个碱基的缺失。HDAC5敲除的BHK‑21细胞系中口蹄病毒复制速率明显加快,最终病毒滴度有显著提高,且HDAC5敲除后对细胞生长速率无显著影响,说明其有用于口蹄疫疫苗生产的前景。为进一步在悬浮培养型BHK‑21细胞中敲除HDAC5,直接用于口蹄疫疫苗生产奠定了基础。
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公开(公告)号:CN106591373B
公开(公告)日:2020-03-24
申请号:CN201611208509.0
申请日:2016-12-23
申请人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号: C12N15/867 , C12N5/10
摘要: 一种用于增强PPRV复制的敏感细胞亚克隆Vero/Slam的制备方法,包含山羊淋巴细胞信号活化因子Slam引物序列,Slam慢病毒表达载体构建,Slam复制缺陷型慢病毒的获得,Slam慢病毒感染靶标细胞Vero,敏感细胞亚克隆Vero/Slam的筛选、验证,增强小反刍兽疫病毒PPRV易感性的验证等。本发明包括具有提高PPRV复制能力的阳性细胞亚克隆,该细胞亚克隆具有良好的生物学特性以及遗传稳定性,其稳定表达的Slam具有明显增强PPRV复制的功效。
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公开(公告)号:CN106086240B
公开(公告)日:2019-12-13
申请号:CN201610536967.0
申请日:2016-07-08
申请人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6804
摘要: 本发明公开了一种用于检测小反刍兽疫病毒抗原的免疫磁珠试剂盒及其用途,属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV F蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对,RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解,且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求,而出现假阴性结果的问题,为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN106244525B
公开(公告)日:2019-06-18
申请号:CN201610674346.9
申请日:2016-08-16
申请人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要: 本发明公开了一种心肌细胞与睾丸支持细胞的联合培养方法。所述的联合培养方法包括以下步骤:(1)睾丸支持细胞的培养;(2)心肌组织收集、处理及消化,以获得心肌细胞;(3)采用双层培养法,用睾丸支持细胞联合培养心肌细胞,其中上层为睾丸支持细胞层,下层为心肌细胞;(4)分离、纯化培养的心肌细胞。本发明通过试验发现,用睾丸支持细胞联合培养心肌细胞,相比常规培养组,联合培养组细胞生长速度加快,细胞生长更加旺盛。联合培养组细胞铺满单层需要3‑4d,而常规培养组需要4‑5d。由此证明,睾丸支持细胞可有效促进心肌细胞生长。这种简单且低成本的心肌细胞培养方法,对心脏的生长、发育、生理、代谢、病理研究有重要的现实意义。
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公开(公告)号:CN104800842B
公开(公告)日:2017-06-23
申请号:CN201510172159.6
申请日:2015-04-13
申请人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号: A61K39/275 , A61K47/42 , A61P31/20
摘要: 本发明提供一种山羊痘、绵羊痘二价细胞弱毒疫苗,有效成分包括山羊痘病毒细胞传代致弱毒以及绵羊痘病毒细胞传代致弱毒;其中,山羊痘病毒细胞传代致弱毒为山羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株Goatpox Virus HN‑XY2010F43株CCTCC V201503,绵羊痘病毒细胞传代致弱毒为绵羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株Sheeppox Virus GS‑WW 2010 F44株CCTCC V201504。本发明的山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗安全,且能够产生有效的免疫保护力。本发明对于研制安全高效的弱毒疫苗以及用本发明公开的弱毒株规模化生产山羊痘、绵羊痘病毒二价细胞弱毒疫苗来防控山羊痘和绵羊痘具有重要的现实意义。
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公开(公告)号:CN106755110A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611208506.7
申请日:2016-12-23
申请人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号: C12N15/867 , C12N5/10
摘要: 一种用于增强PPRV复制的敏感细胞亚克隆Vero/Slam/V的制备方法,包含山羊淋巴细胞信号活化因子Slam/V引物序列,slam/V慢病毒表达载体构建,slam/V复制缺陷型慢病毒的获得,slam/V慢病毒感染靶标细胞Vero,敏感细胞亚克隆Vero/Slam/V的筛选、验证,增强小反刍兽疫病毒易感性的验证等。本发明包括具有提高PPRV复制能力的阳性细胞亚克隆,该阳性细胞亚克隆具有良好的生物学特性以及遗传稳定性,其稳定表达的Slam/V具有明显增强PPRV复制的功效。
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公开(公告)号:CN106591373A
公开(公告)日:2017-04-26
申请号:CN201611208509.0
申请日:2016-12-23
申请人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号: C12N15/867 , C12N5/10
摘要: 一种用于增强PPRV复制的敏感细胞亚克隆Vero/Slam的制备方法,包含山羊淋巴细胞信号活化因子Slam引物序列,Slam慢病毒表达载体构建,Slam复制缺陷型慢病毒的获得,Slam慢病毒感染靶标细胞Vero,敏感细胞亚克隆Vero/Slam的筛选、验证,增强小反刍兽疫病毒PPRV易感性的验证等。本发明包括具有提高PPRV复制能力的阳性细胞亚克隆,该细胞亚克隆具有良好的生物学特性以及遗传稳定性,其稳定表达的Slam具有明显增强PPRV复制的功效。
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