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公开(公告)号：CN114437236B
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202210024635.X
申请日：2022-01-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K19/00 , C07K14/01 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K47/65 , A61P31/20 , C12R1/19
摘要： 本发明涉及一种重组非洲猪瘟病毒多表位融合蛋白、制备及其应用，属于生物技术制药领域，该重组蛋白是将编码非洲猪瘟病毒p72的4个抗原表位和pE248R的N段氨基酸序列的重组表达质粒转入大肠杆菌，经诱导表达和纯化后获得。所述重组非洲猪瘟病毒多抗原表位融合蛋白具有通式：p72抗原表位1‑(Linker)n‑p72抗原表位2‑(Linker)n‑p72抗原表位3‑(Linker)n‑p72抗原表位4‑(Linker)n‑pE248R的N段氨基酸序列。该重组蛋白表达量高且能够被非洲猪瘟病毒阳性血清识别。利用该重组蛋白制备的疫苗免疫动物可激发机体产生高水平的特异性抗体以及细胞免疫应答，可用于非洲猪瘟亚单位疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN113150171B
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202110446849.1
申请日：2021-04-25
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61P31/20 , G01N33/68 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及含分子内佐剂的非洲猪瘟病毒重组蛋白、表达载体及应用，属于生物技术制药领域，所述重组蛋白由非洲猪瘟病毒p30和mp54(修饰的p54)与铜绿假单胞菌的外膜蛋白I融合而成。所述的重组蛋白具有通式：OprI‑(Linker)n‑p30‑(Linker)n‑mp54。其中，所述连接肽Linker序列选自GGGGS或GGSGG，优选为GGGGS；n为1、2、3或4，优选为3。实验证明，该重组蛋白能够显著促进树突状细胞的成熟与分化及细胞因子的分泌。利用本发明重组蛋白制备的疫苗免疫动物可激发机体产生产生高水平的中和抗体以及细胞免疫应答，可用于非洲猪瘟病毒诊断试剂、预防或治疗性药物的制备。
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公开(公告)号：CN114344456A
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202111442006.0
申请日：2021-11-30
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明涉及非洲猪瘟病毒多基因串联DNA疫苗及应用，属于生物疫苗领域。本发明将非洲猪瘟病毒已经验证的免疫保护相关抗原基因p30、p54以及未被验证的A224L进行合理串联后，插入到pVAX‑1载体上，构建得到一种非洲猪瘟病毒p30、p54和A224L串联DNA疫苗。实验证明，该重组DNA疫苗具有良好的免疫原性，在免疫的猪中诱导产生高水平的体液免疫应答以及细胞免疫应答，且抗体对ASFV具有很好的中和效果。且同时证明了拟核蛋白A224L具有诱导保护性免疫应答的能力，能够提高该重组DNA疫苗的免疫效果。
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公开(公告)号：CN114306589A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210024618.6
申请日：2022-01-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明涉及重组非洲猪瘟病毒抗原“鸡尾酒”疫苗及其应用，属于生物技术制药领域，所述的“鸡尾酒”疫苗是由重组蛋白p30‑modified p54、p72 epitope‑pE248R的N段氨基酸序列和CD2v的N段氨基酸序列‑pEP153R的C段氨基酸序列3种成分与佐剂配伍制成。本发明提供了上述3种重组蛋白的表达和纯化方法，以及用于配制上述“鸡尾酒”疫苗各重组蛋白的比例和佐剂。本发明研制的“鸡尾酒”疫苗免疫猪可激发机体产生中和抗体和细胞免疫，是一种非常有应用前景的非洲猪瘟亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN114377121A
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202210024634.5
申请日：2022-01-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明涉及含分子内佐剂的重组非洲猪瘟抗原“鸡尾酒”疫苗及其应用，属于生物技术制药领域，所述的“鸡尾酒”疫苗含有OprI‑p30‑modified p54‑TT、OprI‑p72 epitope‑pE248R的N段氨基酸序列‑TT和OprI‑CD2v的N段氨基酸序列‑pEP153R的C段氨基酸序列‑TT 3种重组非洲猪瘟病毒抗原融合蛋白。本发明提供了上述3种重组非洲猪瘟病毒抗原融合蛋白的表达和纯化方法，以及用于配制上述“鸡尾酒”疫苗的组分比例和佐剂配伍。利用本发明制备的“鸡尾酒”疫苗可激发机体产生中和抗体和特异性细胞免疫应答，可作为一种预防非洲猪瘟的亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN113150171A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110446849.1
申请日：2021-04-25
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61P31/20 , G01N33/68 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及含分子内佐剂的非洲猪瘟病毒重组蛋白、表达载体及应用，属于生物技术制药领域，所述重组蛋白由非洲猪瘟病毒p30和mp54(修饰的p54)与铜绿假单胞菌的外膜蛋白I融合而成。所述的重组蛋白具有通式：OprI‑(Linker)n‑p30‑(Linker)n‑mp54。其中，所述连接肽Linker序列选自GGGGS或GGSGG，优选为GGGGS；n为1、2、3或4，优选为3。实验证明，该重组蛋白能够显著促进树突状细胞的成熟与分化及细胞因子的分泌。利用本发明重组蛋白制备的疫苗免疫动物可激发机体产生产生高水平的中和抗体以及细胞免疫应答，可用于非洲猪瘟病毒诊断试剂、预防或治疗性药物的制备。
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公开(公告)号：CN114306589B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202210024618.6
申请日：2022-01-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明涉及重组非洲猪瘟病毒抗原“鸡尾酒”疫苗及其应用，属于生物技术制药领域，所述的“鸡尾酒”疫苗是由重组蛋白p30‑modified p54、p72 epitope‑pE248R的N段氨基酸序列和CD2v的N段氨基酸序列‑pEP153R的C段氨基酸序列3种成分与佐剂配伍制成。本发明提供了上述3种重组蛋白的表达和纯化方法，以及用于配制上述“鸡尾酒”疫苗各重组蛋白的比例和佐剂。本发明研制的“鸡尾酒”疫苗免疫猪可激发机体产生中和抗体和细胞免疫，是一种非常有应用前景的非洲猪瘟亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN114344456B
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202111442006.0
申请日：2021-11-30
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明涉及非洲猪瘟病毒多基因串联DNA疫苗及应用，属于生物疫苗领域。本发明将非洲猪瘟病毒已经验证的免疫保护相关抗原基因p30、p54以及未被验证的A224L进行合理串联后，插入到pVAX‑1载体上，构建得到一种非洲猪瘟病毒p30、p54和A224L串联DNA疫苗。实验证明，该重组DNA疫苗具有良好的免疫原性，在免疫的猪中诱导产生高水平的体液免疫应答以及细胞免疫应答，且抗体对ASFV具有很好的中和效果。且同时证明了拟核蛋白A224L具有诱导保护性免疫应答的能力，能够提高该重组DNA疫苗的免疫效果。
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公开(公告)号：CN114377121B
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202210024634.5
申请日：2022-01-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明涉及含分子内佐剂的重组非洲猪瘟抗原“鸡尾酒”疫苗及其应用，属于生物技术制药领域，所述的“鸡尾酒”疫苗含有OprI‑p30‑modified p54‑TT、OprI‑p72 epitope‑pE248R的N段氨基酸序列‑TT和OprI‑CD2v的N段氨基酸序列‑pEP153R的C段氨基酸序列‑TT 3种重组非洲猪瘟病毒抗原融合蛋白。本发明提供了上述3种重组非洲猪瘟病毒抗原融合蛋白的表达和纯化方法，以及用于配制上述“鸡尾酒”疫苗的组分比例和佐剂配伍。利用本发明制备的“鸡尾酒”疫苗可激发机体产生中和抗体和特异性细胞免疫应答，可作为一种预防非洲猪瘟的亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN114644714B
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202210024622.2
申请日：2022-01-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K19/00 , C07K14/01 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K47/65 , A61P31/20 , C12R1/19
摘要： 本发明提供了一种非洲猪瘟病毒重组融合蛋白CPE、制备及其应用，属于生物技术制药领域，所述重组融合蛋白CPE由编码非洲猪瘟病毒CD2v的N段氨基酸序列的基因和pEP153R的C段氨基酸序列的基因融合并构建重组表达质粒，经大肠杆菌表达、纯化获得。本发明还提供了上述重组蛋白的制备方法和应用。实验结果证明，该重组蛋白表达量高，能被非洲猪瘟病毒阳性血清识别。利用本发明重组蛋白制备的疫苗，免疫动物可诱导产生显著抑制非洲猪瘟病毒感染的体液免疫和特异性细胞免疫，可用于非洲猪瘟亚单位疫苗的制备。
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