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公开(公告)号：CN119320436A
公开(公告)日：2025-01-17
申请号：CN202411474710.8
申请日：2024-10-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K19/00 , C12N15/40 , C12N15/62 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒NS2截短蛋白及在BVDV抗体检测中的应用。本发明首先提供了一种BVDV NS2蛋白的截短蛋白，所述截短蛋白分别与谷胱甘肽S移换酶(GST)和辣根过氧化物酶(HRP)融合后可溶性表达，且与BVDV抗体阳性血清具有较好的反应原性，与BVDV抗体阴性血清不发生反应，可用于BVDV抗体检测；其次，本发明以GST与所述截短蛋白的融合蛋白为包被抗原，以HRP与所述截短蛋白的融合蛋白为检测抗原，构建了BVDV抗体检测的双抗原夹心ELISA方法，所述方法具有敏感性高、特异性好、操作简便、易于推广、成本低等技术优点，可适用用于牛群中BVDV抗体的筛查。
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公开(公告)号：CN118147026A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410171537.8
申请日：2024-02-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于原核表达系统的自诱导培养基及其应用。所述的自诱导培养基中含有胰蛋白胨5g～20g，酵母粉5g～20g，甘油3g～9g，葡萄糖0.3g～0.9g，乳糖1～4g，KH2PO43.4g/L，Na2HPO4‑7H2O 3.35g/L，NH4Cl 2.68g/L，Na2SO40.71g/L，MgSO40.493g/L以及微量元素，所述的微量元素含有50mM FeCl3，20mM CaCl2，10mM MnCl2，10mM ZnSO4，2mM CoCl2，2mM CuCl2，2mM NiCl2，2mM Na2MoO4，2mM Na2SeO3以及2mM H3BO3。研究结果显示，所述的自诱导培养基，通过阶梯温度调控策略，能够显著提高抗原的可溶性量，同等条件下抗原产量是普通LB培养基的6倍多，生产每毫克抗原所需成本仅为普通LB培养基的20％左右，大大实现了降本增效的目的。
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公开(公告)号：CN117534734A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202311779320.7
申请日：2023-12-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , C12N15/34 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒p30蛋白优势抗原表位区及其应用。本发明以大肠杆菌表达的非洲猪瘟病毒p30蛋白为免疫原，免疫小鼠，利用传统的杂交瘤技术制备了20株针对p30蛋白的单克隆抗体；通过使用一系列重叠肽和丙氨酸突变的重组蛋白鉴定出这20株单抗识别的表位，获得了一种非洲猪瘟病毒p30蛋白抗原表位区；相较于目前已经报道的p30蛋白表位肽，本申请所述的非洲猪瘟病毒p30蛋白抗原表位区与非洲猪瘟阳性血清具有较强的反应性，为p30蛋白优势抗原表位区，为非洲猪瘟检测试剂盒、非洲猪瘟新型疫苗的研发提供物质基础和技术支撑。
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公开(公告)号：CN117281894A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202311271332.9
申请日：2023-09-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒活载体疫苗及其制备方法和应用。所述的非洲猪瘟病毒活载体疫苗中包含表达非洲猪瘟病毒p72基因的重组水泡性口炎病毒或表达p30与p54融合基因的重组水泡性口炎病毒中的至少一种或二者的组合。本发明构建的非洲猪瘟病毒活载体疫苗不仅能在BHK‑21细胞中稳定遗传、具有与病毒载体同样的生长特异性，能在BHK‑21细胞内表达靶标蛋白。更为重要的是，免疫后特异性抗体持续升高，几乎无“免疫窗口期”关键问题，而且免疫血清能够诱导产生中和抗体，疫苗也能够诱导强烈的细胞免疫应答反应，两种疫苗免疫效果更为显著。因此，本发明构建的非洲猪瘟病毒活载体疫苗是一种非常具有应用前景的疫苗。
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公开(公告)号：CN114644714B
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202210024622.2
申请日：2022-01-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C07K14/01 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K47/65 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟病毒重组融合蛋白CPE、制备及其应用，属于生物技术制药领域，所述重组融合蛋白CPE由编码非洲猪瘟病毒CD2v的N段氨基酸序列的基因和pEP153R的C段氨基酸序列的基因融合并构建重组表达质粒，经大肠杆菌表达、纯化获得。本发明还提供了上述重组蛋白的制备方法和应用。实验结果证明，该重组蛋白表达量高，能被非洲猪瘟病毒阳性血清识别。利用本发明重组蛋白制备的疫苗，免疫动物可诱导产生显著抑制非洲猪瘟病毒感染的体液免疫和特异性细胞免疫，可用于非洲猪瘟亚单位疫苗的制备。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116286682A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202211730900.2
申请日：2022-12-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N7/04 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61K39/39 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒多表位仿生纳米自组装病毒样颗粒及其制备方法和应用。所述的O型口蹄疫病毒多表位仿生纳米自组装病毒样颗粒是由重组蛋白SPC‑B4T和2STAP205通过体外自组装后得到；其中，所述的重组蛋白SPC‑B4T是将SpyCatcher、O型4个拓扑型的代表毒株的抗原表位和3A的T细胞表位依次顺序串联得到的；所述的重组蛋白2STAP205是将SpyTag的基因分别通过柔性间隔子连接在噬菌体AP205基因的两端得到的。此外，本发明还将所述的病毒样颗粒制备成了疫苗，结果发现，试制的疫苗具有良好的免疫功效，是一种具有广阔前景的新型疫苗，将对我国O型口蹄疫防控提供物质储备和技术支撑，将产生巨大的经济效益和重要的社会效益。
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公开(公告)号：CN114940705A
公开(公告)日：2022-08-26
申请号：CN202210482695.6
申请日：2022-05-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/01 , C12N15/70 , C12N15/34 , C12N15/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒p30抗原表位蛋白及其制备方法和用途。所述的p30抗原表位蛋白选自p30a、p30b、p30c、p30d、p30e、p30f、p30g、p30I抗原表位蛋白中的任意一种或是由p30a、p30b、p30c、p30d、p30e、p30f、p30g、p30I抗原表位蛋白中任意两种以上串联后得到的重组多表位蛋白。本发明以我国分离的ASFVpig/HLJ/2018毒株的主要结构蛋白p30为对象，利用生物信息学技术结合免疫学方法，预测、筛选ASFV的抗原表位，绘制这些蛋白的抗原表位图谱，最终确定了8个抗原表位(肽)为非洲猪瘟病毒p30蛋白的抗原表位。这些候选抗原表位的获得，极大了节省了传统抗原表位筛选的成本和时间，提高了免疫学方法验证具有良好免疫保护功能的抗原表位的效率，对研发ASF新型疫苗和检测技术具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN114644714A
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202210024622.2
申请日：2022-01-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C07K14/01 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K47/65 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟病毒重组融合蛋白CPE、制备及其应用，属于生物技术制药领域，所述重组融合蛋白CPE由编码非洲猪瘟病毒CD2v的N段氨基酸序列的基因和pEP153R的C段氨基酸序列的基因融合并构建重组表达质粒，经大肠杆菌表达、纯化获得。本发明还提供了上述重组蛋白的制备方法和应用。实验结果证明，该重组蛋白表达量高，能被非洲猪瘟病毒阳性血清识别。利用本发明重组蛋白制备的疫苗，免疫动物可诱导产生显著抑制非洲猪瘟病毒感染的体液免疫和特异性细胞免疫，可用于非洲猪瘟亚单位疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN114437236A
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202210024635.X
申请日：2022-01-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C07K14/01 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K47/65 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种重组非洲猪瘟病毒多表位融合蛋白、制备及其应用，属于生物技术制药领域，该重组蛋白是将编码非洲猪瘟病毒p72的4个抗原表位和pE248R的N段氨基酸序列的重组表达质粒转入大肠杆菌，经诱导表达和纯化后获得。所述重组非洲猪瘟病毒多抗原表位融合蛋白具有通式：p72抗原表位1‑(Linker)n‑p72抗原表位2‑(Linker)n‑p72抗原表位3‑(Linker)n‑p72抗原表位4‑(Linker)n‑pE248R的N段氨基酸序列。该重组蛋白表达量高且能够被非洲猪瘟病毒阳性血清识别。利用该重组蛋白制备的疫苗免疫动物可激发机体产生高水平的特异性抗体以及细胞免疫应答，可用于非洲猪瘟亚单位疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN114409743A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202111610755.X
申请日：2021-12-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及非洲猪瘟病毒p54蛋白抗原表位及其应用，属于基因工程领域，以非洲猪瘟病毒p54(E183L)膜蛋白的一级结构氨基酸序列为材料，通过抗原表位数据库，预测其抗原表位并根据氨基酸序列合成相应的肽分子、构建GST/表位重组蛋白、噬菌体（病毒样颗粒，VLP）展示多表位等多种表位抗原。通过非洲猪瘟病毒阳性血清免疫学检测试验，确定5个抗原表位（肽）为非洲猪瘟病毒p54蛋白的抗原表位。这些抗原表位的获得，为以抗原表位为材料研发非洲猪瘟检测试剂及其试剂盒、单抗制备和安全、可鉴别诊断表位疫苗等急需战略防控产品奠定了基础。不仅将产生巨大的经济效益，而且具有重要的社会效益。
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