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公开(公告)号：CN117554612A
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311391908.5
申请日：2023-10-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/531 , G01N33/577 , G01N33/535 , G01N33/58 , C12N15/85 , C12N15/34 , G01N21/76
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒全自动化管式磁微粒化学发光免疫分析检测试剂盒及其应用，属于体外诊断产品技术领域。所述的试剂盒包括含有磁微粒偶联非洲猪瘟病毒p72蛋白的混悬液、非洲猪瘟病毒p72酶标单抗、酶标抗体稀释液、血清稀释液、浓缩洗涤液以及化学发光底物。本发明还提供该试剂盒的使用方法及应用。本发明所述方法操作简单、自动化、灵敏度高、重复性好，为我国防控、净化非洲猪瘟提供了物质保障和技术支撑，具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN117362401A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202311255079.8
申请日：2023-09-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒N蛋白及其作为自我切割蛋白在制备基因工程蛋白中的应用。本发明首先意外发现了一种具有自我切割蛋白活性的牛病毒性腹泻病毒N蛋白，所述牛病毒性腹泻病毒N蛋白在大肠杆菌中可高效自我切割，其编码基因可作为原核表达载体元件，在常用启动子载体中可高效表达，与目的蛋白融合可实现可溶性表达，且在表达过程中同时实现切割，产生具有真实N端氨基酸的活性目的蛋白；同时可利用凝胶过滤色谱或目的蛋下游的标签纯化上游标签去杂的策略，最终获得具有真实N端氨基酸的活性目的蛋白。
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公开(公告)号：CN114409743B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202111610755.X
申请日：2021-12-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及非洲猪瘟病毒p54蛋白抗原表位及其应用，属于基因工程领域，以非洲猪瘟病毒p54(E183L)膜蛋白的一级结构氨基酸序列为材料，通过抗原表位数据库，预测其抗原表位并根据氨基酸序列合成相应的肽分子、构建GST/表位重组蛋白、噬菌体（病毒样颗粒，VLP）展示多表位等多种表位抗原。通过非洲猪瘟病毒阳性血清免疫学检测试验，确定5个抗原表位（肽）为非洲猪瘟病毒p54蛋白的抗原表位。这些抗原表位的获得，为以抗原表位为材料研发非洲猪瘟检测试剂及其试剂盒、单抗制备和安全、可鉴别诊断表位疫苗等急需战略防控产品奠定了基础。不仅将产生巨大的经济效益，而且具有重要的社会效益。
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公开(公告)号：CN114409742B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202111610740.3
申请日：2021-12-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及非洲猪瘟病毒p49蛋白抗原表位及其应用，属于基因工程领域，以非洲猪瘟病毒p49(pB438L)蛋白衣壳蛋白的氨基酸序列为材料，通过抗原表位数据库，预测其抗原表位并根据其氨基酸序列合成相应短肽。利用非洲猪瘟病毒感染猪阳性血清筛选能与病毒阳性血清发生特异性反应的合成肽，通过将抗原表位与GST融合表达重组蛋白、噬菌体展示多表位抗原(病毒样颗粒展示表位，VLP)，确定优势抗原表位。通过预测、免疫学筛选和鉴定，首次确定非洲猪瘟病毒p49蛋白有13个抗原表位。这些抗原表位的获得为以抗原表位为材料研发非洲猪瘟检测试剂及其试剂盒、单抗制备和安全、可鉴别诊断表位疫苗等急需战略防控产品奠定了基础。不仅将产生巨大的经济效益，而且具有重要的社会效益。
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公开(公告)号：CN114377121A
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202210024634.5
申请日：2022-01-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及含分子内佐剂的重组非洲猪瘟抗原“鸡尾酒”疫苗及其应用，属于生物技术制药领域，所述的“鸡尾酒”疫苗含有OprI‑p30‑modified p54‑TT、OprI‑p72 epitope‑pE248R的N段氨基酸序列‑TT和OprI‑CD2v的N段氨基酸序列‑pEP153R的C段氨基酸序列‑TT 3种重组非洲猪瘟病毒抗原融合蛋白。本发明提供了上述3种重组非洲猪瘟病毒抗原融合蛋白的表达和纯化方法，以及用于配制上述“鸡尾酒”疫苗的组分比例和佐剂配伍。利用本发明制备的“鸡尾酒”疫苗可激发机体产生中和抗体和特异性细胞免疫应答，可作为一种预防非洲猪瘟的亚单位疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110760541B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN201911052154.4
申请日：2019-10-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及用中国仓鼠卵巢细胞表达外源蛋白时信号肽的选择方法及应用，属于生物技术领域。本发明采用信息分析技术，对29种在CHO细胞中常用的高分泌表达信号肽和外源蛋白串联序列进行分析，最终选择分析结果合适的10种信号肽，通过PCR方法将10种不同的分泌型信号肽与串联表位基因的5’端相连，分别构建了真核表达载体并转染哺乳动物细胞CHO,采用Western blot检测CHO培养基中重组表位蛋白的累积差异,结果证明蛋白累计差异与本方法选择结果相符合，从而证明了所述方法的可行性。
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公开(公告)号：CN113150171A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110446849.1
申请日：2021-04-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及含分子内佐剂的非洲猪瘟病毒重组蛋白、表达载体及应用，属于生物技术制药领域，所述重组蛋白由非洲猪瘟病毒p30和mp54(修饰的p54)与铜绿假单胞菌的外膜蛋白I融合而成。所述的重组蛋白具有通式：OprI‑(Linker)n‑p30‑(Linker)n‑mp54。其中，所述连接肽Linker序列选自GGGGS或GGSGG，优选为GGGGS；n为1、2、3或4，优选为3。实验证明，该重组蛋白能够显著促进树突状细胞的成熟与分化及细胞因子的分泌。利用本发明重组蛋白制备的疫苗免疫动物可激发机体产生产生高水平的中和抗体以及细胞免疫应答，可用于非洲猪瘟病毒诊断试剂、预防或治疗性药物的制备。
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公开(公告)号：CN111393510B
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202010255206.4
申请日：2020-04-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/01 , C12N15/34 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒重组抗原及其应用，属于基因工程技术领域，所述m35重组抗原是通过对非洲猪瘟病毒蛋白p30、p54抗原蛋白预测筛选出的表位串联而成，氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。所述重组抗原m35与阳性猪血清有免疫反应，可作为免疫识别抗原，可用于猪的非洲猪瘟病毒病的诊断，且诊断敏感性好、特异性高、可信度高。
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公开(公告)号：CN109758447B
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN201910180665.8
申请日：2019-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/277 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及特立氟胺在制备预防口蹄疫病毒感染的药物中的应用，属于兽用药物技术领域。本发明所述应用能够为进一步控制口蹄疫的传播提供一类高效、安全且质量可控的抗口蹄疫病毒药物。
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公开(公告)号：CN109793741B
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN201910202391.8
申请日：2019-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/517 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及常山酮在制备预防口蹄疫病毒感染的药物中的应用，属于兽用药物技术领域。本发明所述应用能够为进一步控制口蹄疫的传播，提供一类高效、安全且质量可控的抗口蹄疫病毒药物。
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