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公开(公告)号：CN119345195A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411668686.1
申请日：2024-11-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K31/4245 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种TMP269或其药学上可接受的盐在制备抗牛结节性皮肤病病毒感染和治疗药物中的应用，本发明利用不同剂量TMP269孵育处理LSDV感染的不同阶段的MDBK细胞，通过蛋白免疫印迹(Westernblot)、实时荧光定量PCR实验(Quantitative Real‑time PCR)、组织细胞半数感染剂量(TCID50)和间接免疫荧光实验(Indirect immunofluorescence)检测了TMP269对LSDV感染MDBK细胞的影响，发现TMP269处理后能够显著抑制LSDV的复制和增殖。证明该组蛋白去乙酰化酶Ⅱa类抑制剂有望应用于研制预防或治疗LSDV的药物，为LSDV的有效防控提供新方法。本发明利用TMP269孵育处理LSDV感染的MDBK细胞后能够显著抑制LSDV的复制和增殖，有望应用于研制预防或治疗LSDV的药物，为LSD的有效防控提供新方法和全新视角。
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公开(公告)号：CN117683083A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311505058.7
申请日：2023-11-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K7/06 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K38/08 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及生物医学领域，为一种识别牛结节性皮肤病病毒ORF29蛋白B细胞的连续性线性及构象型抗原表位、抗原表位关键性氨基酸位点及其应用，识别牛结节性皮肤病病毒ORF29蛋白的B细胞连续性线性表位，该线性表位序列为INNPIGGVF；识别牛结节性皮肤病病毒ORF29蛋白的B细胞连续性线性表位关键性氨基酸位点，该关键性氨基酸位点为199I、200G、201G、202V和203V；识别牛结节性皮肤病病毒ORF29蛋白的B细胞连续性构象型表位，该构象型表位序列为INNPIGGVF；识别牛结节性皮肤病病毒ORF29蛋白的B细胞连续性构象型表位关键性氨基酸位点，该关键性氨基酸位点为199I、200G、201G和203V；识别牛结节性皮肤病病毒ORF29蛋白的B细胞线性及构象型表位在临床诊断及制备抑制牛结节性皮肤病病毒试剂或药物中的应用。
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公开(公告)号：CN112921005A
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN202110399802.4
申请日：2021-04-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/20 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一株杂交瘤细胞株及其产生的犬细小病毒VP2蛋白单克隆抗体和应用，属于单克隆抗体制备技术领域，本发明提供的杂交瘤细胞株5A92B12能够稳定传代，可以持续、稳定地分泌抗犬细小病毒VP2蛋白的单克隆抗体；培养到10代后，所述杂交瘤细胞株5A92B12仍然能够生长良好、稳定传代，培养液上清效价仍然可以达到1×106以上；所述交瘤细胞株产生的单克隆抗体与犬细小病毒VP2蛋白能特异性识别，具有高特异性、高敏感性的优点，同时具有抑制犬细小病毒复制的特性，能够应用于犬细小病毒病的检测和治疗，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114807195B
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202210405602.X
申请日：2022-04-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种提高狂犬病病毒耐热稳定性和免疫效果的融合基因、重组狂犬病病毒及其应用，属于病毒技术领域。以狂犬病病毒SAD B19株为骨架，在基因组N与P基因之间插入矿化基因W6和G基因形成的融合基因，构建得到重组全长质粒pBNSP‑RV‑GW6和pBNSP‑RV‑W6G，并利用狂犬病的反向遗传操作系统拯救出含矿化基因和双G基因的重组狂犬病病毒。所述重组狂犬病病毒在细胞上稳定增殖，具有耐热稳定特性，免疫小鼠可以诱导产生较高的狂犬病病毒特异性抗体，能抵抗致死剂量狂犬病毒的攻击，同时具有耐热稳定和高效免疫效果，可以直接作为疫苗应用，具有较高的应用前景。
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公开(公告)号：CN117431269A
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202311219097.0
申请日：2023-09-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供牛结节性皮肤病病毒基因缺失毒株的构建方法，包括以下步骤：根据牛结节性皮肤病病毒LSDV基因序列设计左右同源臂的上下游引物；构建转移载体pUC57‑LSDVΔORF005‑008‑EGFP质粒；利用同源重组方法，构建牛结节性皮肤病病毒LSDV ORF005‑008基因缺失毒株。本发明通过IFN‑β双荧光素酶报告基因系统初步筛选出LSDV ORF006和LSDV ORF008蛋白具有抑制宿主天然免疫的功能，通过同源重组方法构建了rLSDVΔORF005‑008四基因缺失的重组病毒，该重组病毒能稳定传代，具有进一步试制新型疫苗的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114807195A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210405602.X
申请日：2022-04-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种提高狂犬病病毒耐热稳定性和免疫效果的融合基因、重组狂犬病病毒及其应用，属于病毒技术领域。以狂犬病病毒SAD B19株为骨架，在基因组N与P基因之间插入矿化基因W6和G基因形成的融合基因，构建得到重组全长质粒pBNSP‑RV‑GW6和pBNSP‑RV‑W6G，并利用狂犬病的反向遗传操作系统拯救出含矿化基因和双G基因的重组狂犬病病毒。所述重组狂犬病病毒在细胞上稳定增殖，具有耐热稳定特性，免疫小鼠可以诱导产生较高的狂犬病病毒特异性抗体，能抵抗致死剂量狂犬病毒的攻击，同时具有耐热稳定和高效免疫效果，可以直接作为疫苗应用，具有较高的应用前景。
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公开(公告)号：CN112877275A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110154125.X
申请日：2021-02-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了HDAC2基因敲除的BHK‑21细胞系的构建方法，利用CRISPR/Cas9技术对口蹄疫疫苗生产用细胞系BHK‑21中的HDAC2进行基因敲除；发明人将用于敲除HDAC2的CRISPR质粒转染BHK‑21细胞后，利用抗生素筛选结合梯度稀释，用克隆环法分离到了多个细胞克隆；提取基因组DNA后进行PCR扩增、测序，成功鉴定到了1个HDAC2基因发生纯合移码突变的细胞克隆；其中HDAC2‑KO‑B3在Cas9预定切割位置处有1个碱基的缺失。HDAC2敲除的BHK‑21细胞系中口蹄病毒复制速率明显加快，最终病毒滴度有显著提高，且HDAC2敲除后对细胞生长速率无显著影响，说明其有用于口蹄疫疫苗生产的前景。为进一步在悬浮培养型BHK‑21细胞中敲除HDAC2，直接用于口蹄疫疫苗生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112852874A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110155142.5
申请日：2021-02-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/55 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12Q1/70 , C12Q1/6851 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了HDAC5基因敲除的BHK‑21细胞系的构建方法，利用CRISPR/Cas9技术对口蹄疫疫苗生产用细胞系BHK‑21中的HDAC5进行基因敲除，将用于敲除HDAC5的CRISPR质粒转染BHK‑21细胞后，利用抗生素筛选结合梯度稀释，用克隆环法分离到了多个细胞克隆。提取基因组DNA后进行PCR扩增、测序，成功鉴定到了1个HDAC5基因发生纯合移码突变的细胞克隆，其中HDAC5‑KO‑A2在Cas9预定切割位置处有13个碱基的缺失。HDAC5敲除的BHK‑21细胞系中口蹄病毒复制速率明显加快，最终病毒滴度有显著提高，且HDAC5敲除后对细胞生长速率无显著影响，说明其有用于口蹄疫疫苗生产的前景。为进一步在悬浮培养型BHK‑21细胞中敲除HDAC5，直接用于口蹄疫疫苗生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN119564698A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411688593.5
申请日：2024-11-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K31/5377 , A61P17/00 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了KU55933或其药学上可接受的盐在制备抗牛结节性皮肤病病毒感染和治疗药物中的应用，本发明利用KU55933孵育处理LSDV感染的MDBK、Vero和hTERT‑CSF细胞，通过蛋白免疫印迹(Western blot)和组织细胞半数感染剂量(TCID50)检测了KU55933对LSDV感染易感细胞的影响，发现ATM激酶特异性抑制剂KU55933处理后能够显著抑制LSDV的易感细胞内和细胞外LSDV增殖；本体动物感染实验也证明该特异性ATM激酶抑制剂KU55933能够有效的缓解LSDV感染牛的临床症状和皮肤组织病毒载量。从细胞和动物水平上均证明该靶向ATM激酶的特异性抑制剂有望应用于研制预防或治疗LSDV的药物，为牛结节性皮肤病疫情防控提供新方法。
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公开(公告)号：CN118047859A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202311505061.9
申请日：2023-11-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及生物医学技术领域，具体为三株LSDV ORF29单克隆抗体的重链和轻链可变区基因序列、两种表达免疫球蛋白全基因序列及其应用，本发明利用杂交瘤测序，提取杂交瘤细胞(1C1‑4D11、3C4‑2E9和1E1‑2C11)总RNA，后以总RNA中mRNA为模板，进行反转录得到对应抗体基因的cDNA，再用特异性PCR获得对应抗体的重链可变区(Variable region ofheavy chain,VH)和轻链可变区(Variable region oflight chain,VL)，并进行克隆和测序分析。最终，获得靶向LSDV ORF29蛋白三株单克隆抗体(1C1‑4D11、3C4‑2E9和1E1‑2C11)重链和轻链基因核苷酸序列，实现本发明。对上述三株单克隆抗体的重链(VH)和轻链抗体(VL)的序列分析表明：1C1‑4D11、3C4‑2E9和1E1‑2C11的基因亚型都是IgG型，轻链都为κ型。
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