公开(公告)号：CN119841936A

公开(公告)日：2025-04-18

申请号：CN202411970245.7

申请日：2024-12-30

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心) ,  清华大学

Inventor： 郑海学 ,  向烨 ,  曹丽艳 ,  王琦 ,  邵鲁媛 ,  孙茂文

IPC: C07K16/08 ,  C12N15/13 ,  C12N15/63 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  A61K39/42 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒（ASFV）P72蛋白中和性单克隆抗体5D2及其应用。本发明的单克隆抗体或抗原结合片段的重链可变区包括氨基酸序列为GYTFLTYW的CDR1、氨基酸序列为IFPASGST的CDR2、氨基酸序列为ARSRDPSGPLT的CDR3；所述单克隆抗体或抗原结合片段的轻链可变区包括氨基酸序列为QTLVHSNGNTY的CDR1、氨基酸序列为KVS的轻链可变区、氨基酸序列为SQSTHVPPT的CDR3，该单克隆抗体或抗原结合片段在体外具有阻止ASFV感染敏感细胞的中和功能，对抗原亲和力强，可应用于抗病毒药物的研究。

公开(公告)号：CN116236568A

公开(公告)日：2023-06-09

申请号：CN202310138735.X

申请日：2023-01-30

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  马旭升 ,  尚小粉 ,  辇晓峰 ,  李茜 ,  朱紫祥 ,  茹毅 ,  罗志宽 ,  杨帆 ,  张克山 ,  田宏 ,  代军飞 ,  冯涛 ,  王琦 ,  曹伟军 ,  党文 ,  唐静

IPC: A61K39/39 ,  C12N15/867 ,  A01K67/027 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  A61P29/00

Abstract: 本发明属于病毒免疫学领域，尤其是涉及非洲猪瘟病毒C717R蛋白作为免疫诱导剂或者佐剂的应用。具体如：ASFV C717R蛋白可作为免疫应答诱导剂或佐剂进行应用；ASFV C717R蛋白还可以作为炎症应答的激活剂进行应用。本发明将ASFV C717R重组慢病毒感染小鼠后，发现小鼠血清和动物组织的炎性细胞因子产生且分泌上调。本发明为为ASFV的防控以及C717R蛋白可以作为佐剂激活炎症反应提供了新的支持。

公开(公告)号：CN116064425A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202211611788.0

申请日：2022-12-14

Applicant: 中国农业科学院都市农业研究所 ,  中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 王琦 ,  张宇 ,  郑海学 ,  曹丽艳 ,  孔祥雨 ,  段月月 ,  袁聪

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/869 ,  C12N15/38 ,  A61K39/245 ,  A61P31/22 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于病毒基因工程技术领域，公开了TK基因缺失的重组猪伪狂犬病毒（PRV）的感染性克隆系统，所述感染性克隆系统包括5个Fosmid，分别为Fos‑Bartha‑1、Fos‑Bartha‑2‑dTK、Fos‑Bartha‑3‑dTK、Fos‑Bartha‑4和Fos‑Bartha‑5，其中Fos‑Bartha‑2‑dTK和Fos‑Bartha‑3‑dTK是通过将Fos‑Bartha‑2和Fos‑Bartha‑3中的TK基因缺失得来。利用本发明的TK基因缺失多片段感染性克隆系统构建重组PRV效率高、对小鼠无致病性，为今后的PRV Bartha‑K61疫苗载体及基因工程载体研究奠定了重要基础。

公开(公告)号：CN114316034B

公开(公告)日：2022-08-26

申请号：CN202111550215.7

申请日：2021-12-17

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  曹丽艳 ,  田宏 ,  王琦 ,  孔祥雨 ,  石正旺 ,  周改静

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  A61K39/42 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种全猪源非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体、该单克隆抗体的表位及其应用。所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2，SEQ ID NO:3，SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5所示。该抗体能够特异性的识别并结合P30蛋白的区域为61～100 aa。该抗体保留了轻链、重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、全猪源、抗体亲和力好、特异性强等优势，也为探究P30蛋白的功能提供了可靠的研究工具。本发明为开发非洲猪瘟病毒诊断试剂盒提供了新型原材料，也为研制全猪源单克隆抗体的预防与治疗性药物提供了新的技术支持。

公开(公告)号：CN114236128B

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202111449947.7

申请日：2021-11-30

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 ,  中国农业科学院都市农业研究所

Inventor： 王琦 ,  曹丽艳 ,  郑海学 ,  田宏 ,  孔祥雨 ,  袁聪 ,  段月月 ,  索学鹏

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/535 ,  C07K14/165 ,  C07K16/10 ,  C12N15/70 ,  C12N15/50

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白抗体的阻断ELISA试剂盒。该试剂盒包括：包被有猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白的酶标板、HRP标记的鼠抗猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白单克隆抗体、阳性血清对照、阴性血清对照。该试剂盒最低能检出1:512稀释的阳性血清，并且与PEDV、TGEV和PDCoV等阳性血清无交叉反应，批内和批间重复变异系数小于10%。与间接免疫荧光试验的对比结果显示，本发明阻断ELISA试剂盒检测的符合率为99.6%，Kappa值为0.91，本发明建立的阻断ELISA方法与IFA高度一致。该方法操作简便、快速，可用于检测猪急性腹泻综合征冠状病毒抗体临床样本。

公开(公告)号：CN112587660B

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202011641840.8

申请日：2020-12-31

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  马旭升 ,  莫希丁·乔杜里 ,  曾宗波 ,  曹伟军 ,  罗志宽 ,  朱紫祥 ,  杨帆 ,  张克山 ,  田宏 ,  党文 ,  冯涛 ,  王琦 ,  刘会胜

IPC: A61K39/39 ,  A61K39/125 ,  A61P29/00 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于病毒免疫学领域，尤其是涉及SVA的3D蛋白的新功能，如：3D蛋白可作为NLRP3介导的炎症信号转导激活剂进行应用，3D蛋白激活了IL‑1β的产生和分泌。同时发现了3D蛋白通过其N端1～154aa与NLRP3的NATCH结构域相互作用，并以调控钙离子和钾离子的细胞内的浓度变化方式激活细胞内NLRP3炎症小体介导的IL‑1β的产生和分泌。本发明为为SVA的防控以及3D蛋白可以作为佐剂激活炎症反应提供了新的靶点和理论支持。

公开(公告)号：CN114316034A

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN202111550215.7

申请日：2021-12-17

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  曹丽艳 ,  田宏 ,  王琦 ,  孔祥雨 ,  石正旺 ,  周改静

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  A61K39/42 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种全猪源非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体、该单克隆抗体的表位及其应用。所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2，SEQ ID NO:3，SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5所示。该抗体能够特异性的识别并结合P30蛋白的区域为61～100 aa。该抗体保留了轻链、重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、全猪源、抗体亲和力好、特异性强等优势，也为探究P30蛋白的功能提供了可靠的研究工具。本发明为开发非洲猪瘟病毒诊断试剂盒提供了新型原材料，也为研制全猪源单克隆抗体的预防与治疗性药物提供了新的技术支持。

公开(公告)号：CN114287389A

公开(公告)日：2022-04-08

申请号：CN202111534568.8

申请日：2021-12-15

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 ,  中国农业科学院都市农业研究所

Inventor： 王琦 ,  陈佳宁 ,  郑海学 ,  索学鹏 ,  段月月 ,  袁聪 ,  曹丽艳 ,  孔祥雨 ,  李想通

IPC: A01K67/027 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种猪急性腹泻综合征病毒感染小鼠模型构建方法及其应用。该方法采用颅内注射方式将猪急性腹泻综合征病毒感染7日龄以内小鼠，得到猪急性腹泻综合征病毒感染小鼠模型。采用本发明方法建立的SADS‑CoV感染小鼠模型，攻毒后实验小鼠临床症状清晰、典型、可重复性高，与新生猪感染的临床症状一致，可用于SADS‑CoV相关疾病的致病机制和免疫机理研究，以及抗病毒药物和疫苗的研发，有助于防控SADS‑CoV引起的疾病。

公开(公告)号：CN114088941A

公开(公告)日：2022-02-25

申请号：CN202111183767.9

申请日：2021-10-11

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 ,  中国农业科学院都市农业研究所

Inventor： 王琦 ,  曹丽艳 ,  郑海学 ,  田宏 ,  孔祥雨 ,  袁聪 ,  段月月

IPC: G01N33/569

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒。本发明的检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的双抗夹心ELISA试剂盒，包括：包被有兔抗SADS‑CoV N蛋白多克隆抗体的酶标板、HRP标记的鼠抗SADS‑CoV N蛋白单克隆抗体。还包括酶标二抗、封闭液、稀释液、洗涤液、显色液以及终止液。本发明所建立的双抗体夹心ELISA试剂盒具有较好的特异性、敏感性、批内和批间重复性。该试剂盒最低病毒的检出量为10‑4.42TCID50/0.1mL，并且不与PEDV、TGEV和PDCoV反生反应，批内和批间重复变异系数小于10%。与RT‑PCR方法比较，本发明双抗夹心ELISA试剂盒检测的符合率为93.93％。本发明所建立的SADS‑CoV抗原双抗体夹心ELISA检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，能用于SADS‑CoV的临床检测。

公开(公告)号：CN114015660A

公开(公告)日：2022-02-08

申请号：CN202111334156.X

申请日：2021-11-11

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  冯涛 ,  马昭 ,  刘华南 ,  李攀 ,  石正旺 ,  申超超 ,  吴盼雪 ,  齐晓兰 ,  张克山 ,  李丹 ,  党文 ,  杨波 ,  王琦 ,  曹丽艳 ,  朱紫祥 ,  田宏 ,  郭建宏 ,  刘湘涛

IPC: C12N7/00 ,  C12N7/04 ,  C12N15/34 ,  C12N15/85 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及缺失十个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失了I177L、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因，降低了亲本毒株的毒性，获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株；所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康，且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。