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公开(公告)号：CN108411019B
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN201810512105.3
申请日：2018-05-25
申请人： 云南农业大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12Q1/6893 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
摘要： 本发明属于分子检测领域，提供了环介导等温扩增技术检测猫胞裂虫的方法及其应用，设计合成专用引物，包括2条内引物FIP和BIP，2条外引物F3和B3，以待测的猫基因组DNA为模板，在专用引物的引导下进行LAMP扩增；取LAMP产物小心垂直加到加样孔中，对照Marker是DL2000DNA，用100V电泳电压，约30min，停止电泳，取出凝胶，于紫外凝胶成像系统中观察凝胶，观察有目的条带为阳性，没有目的条带为阴性；还可以将SYBR Green I加入到扩增产物中，在紫外光照射下，发出淡黄绿色荧光的为阳性，红橙色为阴性。本发明可以快速、准确的检测猫胞裂虫，CR高，并且耗时短、成本低、操作简单，便于临床上应用。
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公开(公告)号：CN108663514A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201810476893.5
申请日：2018-05-18
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 云南农业大学
IPC分类号： G01N33/558 , G01N33/68 , G01N33/569
CPC分类号： G01N33/558 , G01N33/56905 , G01N33/6893 , G01N2333/45 , G01N2333/47
摘要： 本发明公开了一种弓形虫纳米胶体碳诊断试纸条及制备方法，该弓形虫纳米胶体碳诊断试纸条包括：吸水垫、硝酸纤维素膜、纳米胶体碳释放垫、样品垫、PVC胶板；该弓形虫纳米胶体碳诊断试纸条的制备方法包括：弓形虫抗原ESA的制备、兔抗ESA血清的制备、纯化兔抗ESA抗体、确定纳米胶体碳ESA溶液的最佳PH值及ESA的用量、纳米胶体碳母液的制备、纳米胶体碳溶液最佳稀释倍数的确定、试纸条的组装，本研究建立的弓形虫病胶体碳诊断试纸条灵敏度和特异性较好，具有操作简单、快速，检测条带清晰，相对于传统的胶体金诊断试纸条制作成本极大降低的优点，适用于临床弓形虫病的快速诊断。
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公开(公告)号：CN108411019A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810512105.3
申请日：2018-05-25
申请人： 云南农业大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12Q1/6893 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
摘要： 本发明属于分子检测领域，提供了环介导等温扩增技术检测猫胞裂虫的方法及其应用，设计合成专用引物，包括2条内引物FIP和BIP，2条外引物F3和B3，以待测的猫基因组DNA为模板，在专用引物的引导下进行LAMP扩增；取LAMP产物小心垂直加到加样孔中，对照Marker是DL2000DNA，用100V电泳电压，约30min，停止电泳，取出凝胶，于紫外凝胶成像系统中观察凝胶，观察有目的条带为阳性，没有目的条带为阴性；还可以将SYBR Green I加入到扩增产物中，在紫外光照射下，发出淡黄绿色荧光的为阳性，红橙色为阴性。本发明可以快速、准确的检测猫胞裂虫，CR高，并且耗时短、成本低、操作简单，便于临床上应用。
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公开(公告)号：CN104726455B
公开(公告)日：2018-05-01
申请号：CN201510071461.2
申请日：2015-02-11
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12N15/113 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P33/10
摘要： 本发明提供一种针对蛔虫三期幼虫特异表达的miRNA—asu‑miR‑36f的抑制剂，该抑制剂可以特异性的抑制猪蛔虫三期幼虫特异表达的asu‑miR‑36f。所述抑制剂的核苷酸序列为：UGACAAGGAUUGCAGCCCGGUGA。本发明的抑制剂通过与asu‑miR‑36f结合，显著降低了asu‑miR‑36f的丰度，并且显著影响了猪蛔虫三期幼虫的发育及降低了感染率。本发明所提供的蛔虫三期幼虫特异表达的miRNA—asu‑miR‑36f抑制剂可应用于影响猪蛔虫和人蛔虫三期幼虫生长发育或与其感染性相关的功能。
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公开(公告)号：CN107308444A
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201710522981.X
申请日：2017-06-30
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： A61K39/002 , A61P33/02
CPC分类号： A61K39/002
摘要： 本发明公开了一种用于预防弓形虫感染的减毒活疫苗及其应用，该减毒活疫苗为以PBS作为溶剂制成的弓形虫弱毒虫株RHΔGRA17速殖子混悬液。本发明确立了该减毒活疫苗免疫剂型，探明了该疫苗的免疫接种程序及接种量，通过动物实验，发现其对于弓形虫急性感染、慢性感染及先天性感染均具有较强的免疫保护作用，不仅能够预防弓形虫的正常感染，同时能够有效阻断弓形虫通过母婴途径进行的垂直传播，是具有巨大应用价值的疫苗，可用于预防弓形虫的慢性感染、急性感染以及先天性感染。
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公开(公告)号：CN105067731B
公开(公告)日：2017-06-16
申请号：CN201510307355.X
申请日：2015-06-05
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： G01N30/86
摘要： 本发明公开了一种弓形虫感染后血清中生物标记物的筛选方法，是采用液相色谱‑四极杆质谱连用的方法，再通过多变量分析和热图聚类分析，筛选出弓形虫感染后血清中生物标记物，并提供了筛选得到的生物标记物在制备弓形虫病靶向药物中的应用。本发明的有益效果为：本发明提供的一种弓形虫感染后血清中生物标记物的筛选方法及筛选出的生物标记物的应用，能够大规模、显著的区分感染状态和未感染状态，可作为一种准确可靠的方法应用于弓形虫感染鉴别诊断，为弓形虫病的诊断及预防起到了做出了贡献。
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公开(公告)号：CN105734150A
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201610225012.3
申请日：2016-04-12
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC分类号： Y02A50/451 , C12Q1/6844 , C12N15/1003 , C12Q1/6893 , C12Q2521/507 , C12Q2537/1376 , C12Q2522/101 , C12Q2565/625 , C12Q2527/125
摘要： 本发明提供一种奶牛隐孢子虫的快速检测试剂盒，所述试剂盒包括以下成分：月桂酰肌氨酸钠水溶液，吐温?20水溶液，引物探针混合液，PBST溶液，测流层析试纸条，RPA冻干酶和RPA反应预混液。本发明还提供奶牛隐孢子虫的快速检测方法。本发明的试剂盒具有敏感性高、特异性强、反应迅速、操作简单等特点。且无须利用DNA提取试剂盒提取样品DNA，同时利用RPA?测流层析的优点，可以完全脱离实验室环境，从而实现奶牛养殖场实地快速检测奶牛是否感染隐孢子虫，进而采取相应措施减少损失，遏制传播。
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公开(公告)号：CN105169387A
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201510542151.4
申请日：2015-08-31
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明提供一种免疫原性组合物，所述组合物由弓形虫erk7重组蛋白和佐剂。本发明还提供用于弓形虫感染预防的免疫疫苗，所述疫苗的有效成分为权利要求1-4任一所述的免疫原性组合物。本发明的免疫疫苗能够有效地延长弓形虫GT1急性感染BALB/c鼠的存活时间，本发明的免疫疫苗对PRU急性感染并无明显效果，但能大幅度降低弓形虫PRU慢性感染中脑包囊数目，取得了良好的免疫效果。
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公开(公告)号：CN103330947B
公开(公告)日：2015-09-16
申请号：CN201310240849.1
申请日：2013-06-18
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明提供一种用于弓形虫感染预防的疫苗，包括选自以下的核苷酸序列：1）SEQ ID No.1中所示的第736-第2385位核苷酸序列；和/或SEQ ID No.3中所示的第759-第2411位核苷酸序列；2）与1）中所示的核苷酸序列互补的核苷酸序列；3）对上述1）或2）所示核苷酸序列进行一个或多个碱基的取代、缺失、添加修饰的核苷酸序列。本发明的疫苗可有效地预防和控制弓形虫动物模型（昆明鼠）的感染，重组质粒的联合使用可更有效地提升单基因疫苗的免疫效果。因此，质粒pVAX-ROP5和pVAX-GRA15可作为DNA疫苗候选抗原抗弓形虫感染，而基于此双基因的重组质粒的联合免疫可以作为鸡尾酒复合疫苗用于抗弓形虫的感染。
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公开(公告)号：CN104830850A
公开(公告)日：2015-08-12
申请号：CN201510232556.8
申请日：2015-05-08
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明提供用于弓形虫感染预防的核苷酸序列，其含有选自以下任一组核苷酸序列：1）profilin的核苷酸序列；2）profilin、rop16、rop18、MIC6和CDPK3的核苷酸序列；3）profilin和IL15的核苷酸序列；4）rop16、rop18、MIC6和CDPK3的核苷酸序列；5）上述序列的互补序列；6）上述核苷酸序列取代、缺失、添加修饰的核苷酸序列。本发明的pVAX-profilin疫苗以及联合疫苗均能有效抑制弓形虫脑包囊的产生，取得了较好的免疫效果。
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