一种基于遗传密码子扩展技术的改造Vero细胞系

    公开(公告)号:CN115074330B

    公开(公告)日:2023-12-29

    申请号:CN202210412748.7

    申请日:2022-04-19

    发明人: 孙浩 张小超 张瑶

    IPC分类号: C12N5/10 C12N15/85 C12N15/52

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种基于遗传密码子扩展技术的改造Vero细胞系,所述改造Vero细胞系的构建方法是基于基因密码子扩展技术,使用PylRS/tRNAPyl系统,定点插入一套能翻译终止密码子的序列,所述能翻译终止密码子序列如SEQ ID NO.1所示,该改造细胞系,在加入到特殊培养基后,限制性病毒仅能在改造细胞中增殖,但不在天然细胞中增殖,由此建立一个隔离在天然翻译系统之外的安全的病毒扩增和研究体系。本研究将通过:调整启动子,密码子偏好性,培养方案等工作,来建立以改造Vero细胞株为核心的正交系统。这个有效且安全的正交系统,不仅使我们在不接触野生病原的情况下在普通实验室研究病毒与细胞的相互关系,并且有可能大量培育这种限制性病毒来作为新型疫苗。

    一种基于遗传密码子扩展技术的改造Vero细胞系

    公开(公告)号:CN115074330A

    公开(公告)日:2022-09-20

    申请号:CN202210412748.7

    申请日:2022-04-19

    发明人: 孙浩 张小超 张瑶

    IPC分类号: C12N5/10 C12N15/85 C12N15/52

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种基于遗传密码子扩展技术的改造Vero细胞系,所述改造Vero细胞系的构建方法是基于基因密码子扩展技术,使用PylRS/tRNAPyl系统,定点插入一套能翻译终止密码子的序列,所述能翻译终止密码子序列如SEQ ID NO.1所示,该改造细胞系,在加入到特殊培养基后,限制性病毒仅能在改造细胞中增殖,但不在天然细胞中增殖,由此建立一个隔离在天然翻译系统之外的安全的病毒扩增和研究体系。本研究将通过:调整启动子,密码子偏好性,培养方案等工作,来建立以改造Vero细胞株为核心的正交系统。这个有效且安全的正交系统,不仅使我们在不接触野生病原的情况下在普通实验室研究病毒与细胞的相互关系,并且有可能大量培育这种限制性病毒来作为新型疫苗。