公开(公告)号：CN105671084A

公开(公告)日：2016-06-15

申请号：CN201610162019.5

申请日：2016-03-21

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 陈松林 ,  崔忠凯 ,  郑汉其 ,  刘云 ,  王娜 ,  林帆 ,  王文文 ,  张宁 ,  董忠典 ,  李仰真

IPC分类号： C12N15/87 ,  A01K61/00 ,  A01K67/027

CPC分类号： Y02A40/81 ,  Y02A40/812 ,  C12N15/87 ,  A01K61/00 ,  A01K67/0275 ,  A01K2227/40 ,  A01K2267/02 ,  C07K14/461

摘要： 本发明提供一种基于基因组编辑的海水鲆鲽鱼类新种质构建方法。以半滑舌鳎Dmrt1基因为例，通过构建Dmrt1基因的基因组编辑TALEN质粒，在体外转录为mRNA后转移到半滑舌鳎1-4细胞期的受精卵动物极，将受精卵培育为成鱼，采用PCR方法从中筛选出基因突变的F0代鱼，从而构建出基因定点突变的成鱼。本发明还提供一种培育基因发生定点突变的海水鱼类新种质的方法，是将上述F0代鱼与野生型鱼杂交，得到杂交子代鱼，然后检测出可遗传突变类型的F0代鱼作为父、母本，进行人工繁殖,筛选出基因双位点突变的F1代鱼，进一步杂交后即可获得纯合突变体系F2代鱼。本发明可使鲆鲽鱼类目的基因发生定点突变，为鲆鲽鱼类基因功能研究和新种质创制提供了一种新的方法。

公开(公告)号：CN105671084B

公开(公告)日：2017-07-14

申请号：CN201610162019.5

申请日：2016-03-21

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 陈松林 ,  崔忠凯 ,  郑汉其 ,  刘云 ,  王娜 ,  林帆 ,  王文文 ,  张宁 ,  董忠典 ,  李仰真

IPC分类号： C12N15/90 ,  A01K61/10 ,  A01K67/027

CPC分类号： Y02A40/81 ,  Y02A40/812

摘要： 本发明提供一种基于基因组编辑的海水鲆鲽鱼类新种质构建方法。以半滑舌鳎Dmrt1基因为例，通过构建Dmrt1基因的基因组编辑TALEN质粒，在体外转录为mRNA后转移到半滑舌鳎1‑4细胞期的受精卵动物极，将受精卵培育为成鱼，采用PCR方法从中筛选出基因突变的F0代鱼，从而构建出基因定点突变的成鱼。本发明还提供一种培育基因发生定点突变的海水鱼类新种质的方法，是将上述F0代鱼与野生型鱼杂交，得到杂交子代鱼，然后检测出可遗传突变类型的F0代鱼作为父、母本，进行人工繁殖,筛选出基因双位点突变的F1代鱼，进一步杂交后即可获得纯合突变体系F2代鱼。本发明可使鲆鲽鱼类目的基因发生定点突变，为鲆鲽鱼类基因功能研究和新种质创制提供了一种新的方法。