一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN106086102B

    公开(公告)日:2020-10-27

    申请号:CN201610248615.5

    申请日:2016-04-20

    IPC分类号: C12N1/21 C12R1/19

    摘要: 本发明公开了一种生产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的工程菌及其构建方法与应用。本发明所提供的工程菌的构建方法,包括A1)和A2):A1)向受体细胞中导入L‑脯氨酸‑4‑羟化酶基因、谷氨酸‑5‑激酶基因和谷氨酸‑5‑半醛脱氢酶基因;A2)为将受体细胞的α-酮戊二酸脱氢酶基因、异柠檬酸裂解酶基因或脯氨酸脱氢酶基因敲除、或用乙酰辅酶A合成酶基因替换受体细胞的丙酮酸氧化酶基因;利用重组细胞与底物进行反应得到反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸。实验证明,可以利用本发明的反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的生产方法生产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸。

    海藻糖的生产方法
    2.
    发明授权

    公开(公告)号:CN106086107B

    公开(公告)日:2019-07-26

    申请号:CN201610249035.8

    申请日:2016-04-20

    摘要: 本发明公开了海藻糖的生产方法。本发明所提供的海藻糖的生产方法,包括将底物与海藻糖生产成套试剂进行反应得到海藻糖;海藻糖生产成套试剂包括麦芽寡糖基海藻糖合成酶、麦芽寡糖基海藻糖水解酶和M;M为糖基转移酶和切支酶这两种的两种或任一种;底物为淀粉或淀粉水解物;麦芽寡糖基海藻糖合成酶为SEQ ID No.1的第42‑816位所示的蛋白质;麦芽寡糖基海藻糖水解酶为SEQ ID No.3的第42‑639位所示的蛋白质;糖基转移酶为SEQ ID No.5的第42‑697位所示的蛋白质。

    一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN106086102A

    公开(公告)日:2016-11-09

    申请号:CN201610248615.5

    申请日:2016-04-20

    摘要: 本发明公开了一种生产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的工程菌及其构建方法与应用。本发明所提供的工程菌的构建方法,包括A1)和A2):A1)向受体细胞中导入L‑脯氨酸‑4‑羟化酶基因、谷氨酸‑5‑激酶基因和谷氨酸‑5‑半醛脱氢酶基因;A2)为将受体细胞的α-酮戊二酸脱氢酶基因、异柠檬酸裂解酶基因或脯氨酸脱氢酶基因敲除、或用乙酰辅酶A合成酶基因替换受体细胞的丙酮酸氧化酶基因;利用重组细胞与底物进行反应得到反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸。实验证明,可以利用本发明的反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的生产方法生产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸。

    一种双功能酶的制备方法及其在海藻糖生产中的应用

    公开(公告)号:CN108118047A

    公开(公告)日:2018-06-05

    申请号:CN201611062071.X

    申请日:2016-11-28

    摘要: 本发明公开了一种双功能酶的制备方法及其在海藻糖生产中的应用。本发明通过用不同长度及不同刚柔性的连接肽融合表达麦芽寡糖基海藻糖合成酶及麦芽寡糖基海藻糖水解酶,率先将MTSase与MTHase进行融合表达,得到一系列同时具有麦芽寡糖基海藻糖合成酶与麦芽寡糖基海藻糖水解酶活性的双功能酶,并将其用于海藻糖的生产,进一步提高了海藻糖的转化率,并减少了培养菌株的数量,节约了生产工艺与成本,为海藻糖的经济高效生产奠定了基础。