公开(公告)号：CN105603082A

公开(公告)日：2016-05-25

申请号：CN201610063949.5

申请日：2016-01-29

申请人： 中国科学院遗传与发育生物学研究所 ,  江汉大学

发明人： 翟文学 ,  李甜甜 ,  彭海 ,  周俊飞 ,  陈利红 ,  李论 ,  胡长峰 ,  高利芬 ,  章伟雄 ,  张静 ,  卢龙 ,  陈斌 ,  李丽丽

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/06 ,  C12Q1/04 ,  C12Q1/70

摘要： 本发明公开了一种水稻微生物定性与定量的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：确定待测样品中的目标微生物类群、目标微生物和非目标生物、以及不存在于所述待测样品中的参考微生物；设计目标微生物类群与目标微生物的特征区域；设计特征区域的多重扩增引物；在待测样品中加入参考微生物与外源核酸后，提取待测样品中的微生物的核酸；利用设计的多重引物扩增微生物核酸，扩增获得特征测序片段；利用特征测序片段定性、定量分析待测样品中微生物。本发明不需要对微生物进行预培养与增殖，可以一次性地对待测样品中的多种已知微生物进行高通量、高准确度、高分辨率的检测，检测过程简单、快速且流程规范。

公开(公告)号：CN105567834A

公开(公告)日：2016-05-11

申请号：CN201610064116.0

申请日：2016-01-29

申请人： 中国科学院遗传与发育生物学研究所 ,  江汉大学

发明人： 翟文学 ,  方治伟 ,  彭海 ,  周俊飞 ,  李论 ,  胡长峰 ,  李甜甜 ,  高利芬 ,  章伟雄 ,  张静 ,  卢龙 ,  陈斌 ,  李丽丽 ,  陈利红

IPC分类号： C12Q1/68

CPC分类号： C12Q1/6869 ,  C12Q2535/122 ,  C12Q2545/101 ,  C12Q2545/113

摘要： 本发明公开了一种大米转基因成分的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括：确定转基因成分、内源标准基因和外源标准基因；制备多重扩增引物；进行抽样并混合，得到混合样品；提取混合样品的基因组并加入外源标准基因，得到混合核酸；构建高通量测序文库；对高通量测序文库进行高通量测序，得到测序片段组；获得待测样品中转基因成分的测序片段的数量、内源标准基因的测序片段的数量和外源标准基因的测序片段的数量；根据外源标准基因的测序片段的数量，判断实验是否成功并计算待测样品种中转基因成分的含量；根据转基因成分的含量判断待测样品中是否含有转基因成分。该方法能够同时定量检测待测样品中的多种转基因成分。

公开(公告)号：CN105603082B

公开(公告)日：2019-08-23

申请号：CN201610063949.5

申请日：2016-01-29

申请人： 中国科学院遗传与发育生物学研究所 ,  江汉大学

发明人： 翟文学 ,  李甜甜 ,  彭海 ,  周俊飞 ,  陈利红 ,  李论 ,  胡长峰 ,  高利芬 ,  章伟雄 ,  张静 ,  卢龙 ,  陈斌 ,  李丽丽

IPC分类号： C12Q1/6869 ,  C12Q1/06 ,  C12Q1/04 ,  C12Q1/70

摘要： 本发明公开了一种水稻微生物定性与定量的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：确定待测样品中的目标微生物类群、目标微生物和非目标生物、以及不存在于所述待测样品中的参考微生物；设计目标微生物类群与目标微生物的特征区域；设计特征区域的多重扩增引物；在待测样品中加入参考微生物与外源核酸后，提取待测样品中的微生物的核酸；利用设计的多重引物扩增微生物核酸，扩增获得特征测序片段；利用特征测序片段定性、定量分析待测样品中微生物。本发明不需要对微生物进行预培养与增殖，可以一次性地对待测样品中的多种已知微生物进行高通量、高准确度、高分辨率的检测，检测过程简单、快速且流程规范。

公开(公告)号：CN108396026B

公开(公告)日：2020-04-21

申请号：CN201810399771.0

申请日：2018-04-28

申请人： 中国科学院遗传与发育生物学研究所

发明人： 郑琪 ,  刘利勤 ,  张静 ,  罗巧玲 ,  李宏伟 ,  李滨 ,  李振声

IPC分类号： C12N15/11 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/6841

摘要： 本发明公开了十倍体长穂偃麦草蓝粒性状专化分子标记和荧光原位杂交探针的开发及应用。本发明利用特异性位点扩增片段测序技术对普通小麦、蓝粒小麦(蓝58)和长穗偃麦草进行测序，通过序列数据比对分析获得长穗偃麦草4Ag染色体特异DNA序列，以长穗偃麦草4Ag染色体特异序列为基础，开发出来源于长穂偃麦草4Ag染色体的蓝粒性状的专化分子标记和专化荧光探针。本发明提供的分子标记和探针可用于长穗偃麦草向小麦转移染色体片段过程中蓝粒表型的鉴定，不仅为蓝粒基因的定位及克隆奠定基础，也为蓝粒性状的分子标记辅助选择提供依据。

公开(公告)号：CN108396026A

公开(公告)日：2018-08-14

申请号：CN201810399771.0

申请日：2018-04-28

申请人： 中国科学院遗传与发育生物学研究所

发明人： 郑琪 ,  刘利勤 ,  张静 ,  罗巧玲 ,  李宏伟 ,  李滨 ,  李振声

IPC分类号： C12N15/11 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/6841

摘要： 本发明公开了十倍体长穂偃麦草蓝粒性状专化分子标记和荧光原位杂交探针的开发及应用。本发明利用特异性位点扩增片段测序技术对普通小麦、蓝粒小麦(蓝58)和长穗偃麦草进行测序，通过序列数据比对分析获得长穗偃麦草4Ag染色体特异DNA序列，以长穗偃麦草4Ag染色体特异序列为基础，开发出来源于长穂偃麦草4Ag染色体的蓝粒性状的专化分子标记和专化荧光探针。本发明提供的分子标记和探针可用于长穗偃麦草向小麦转移染色体片段过程中蓝粒表型的鉴定，不仅为蓝粒基因的定位及克隆奠定基础，也为蓝粒性状的分子标记辅助选择提供依据。

公开(公告)号：CN114196782B

公开(公告)日：2023-06-20

申请号：CN202210014338.7

申请日：2022-01-04

申请人： 江汉大学

发明人： 张静 ,  彭海 ,  肖华锋 ,  李论 ,  方治伟 ,  陈利红 ,  李甜甜 ,  高利芬 ,  万人静 ,  周俊飞

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种检测番茄转基因元件和品系的引物对组合、试剂盒及检测方法。所述的检测番茄常用的转基因元件及转基因品系的引物对组合包括以扩增11种常用番茄转基因元件、1种转基因品系特异性序列以及1种番茄内参基因Sl_LAT52的引物组。本发明还涉及检测番茄转基因元件和品系的试剂盒与检测方法。本发明技术方案操作简单，检测效率高，检验对象全面，具有较高的检测特异性、准确度和灵敏性等特点；可用于转基因番茄及其制品的大规模检测，具有较好的应用前景。

公开(公告)号：CN105624297B

公开(公告)日：2020-03-10

申请号：CN201610060794.X

申请日：2016-01-29

申请人： 江汉大学

发明人： 张静 ,  彭海 ,  高利芬

IPC分类号： C12Q1/6895

摘要： 本发明公开了一种植物微生物耐药性基因的检测方法。所述方法包括：确定耐药性基因、内源标准基因和外源标准基因；制备多重扩增引物；向待测样品中加入外源核酸，得到混合样品并提取基因组；向基因组中加入外源标准基因，获得混合核酸；扩增混合核酸，利用扩增产物构建高通量测序文库并进行高通量测序，得到测序片段组；分析所述测序片段组，并根据获得的外源标准基因和内源标准基因的测序片段的数量，判断实验是否成功；若实验成功，则计算耐药性基因的含量；根据耐药性基因的含量判定待测样品是否含有耐药性基因。所述方法可以一次性定量检测任意微生物中的任意多种希望检测的耐药性基因，且检测不需要培养与纯化微生物，速度快，结果准确可靠。

公开(公告)号：CN105603081B

公开(公告)日：2019-12-06

申请号：CN201610061101.9

申请日：2016-01-29

申请人： 北京工商大学 ,  江汉大学

发明人： 肖俊松 ,  曹雁平 ,  李秀婷 ,  吴华 ,  卢龙 ,  彭海 ,  许朵霞 ,  袁英髦 ,  王少甲 ,  赵晓丹 ,  章伟雄 ,  任圣 ,  张静

IPC分类号： C12Q1/689

摘要： 本发明公开了一种非诊断目的的肠道微生物定性与定量的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：确定待测样品中的目标微生物类群、目标微生物和非目标生物、以及不存在于所述待测样品中的参考微生物；设计目标微生物类群与目标微生物的特征区域；设计特征区域的多重扩增引物；在待测样品中加入参考微生物与外源核酸后，提取待测样品中的微生物的核酸；利用设计的多重引物扩增微生物核酸，扩增获得特征测序片段；利用特征测序片段定性、定量分析待测样品中微生物。本发明不需要对微生物进行预培养与增殖，可以一次性地对待测样品中的多种已知微生物进行高通量、高准确度、高分辨率的检测，检测过程简单、快速且流程规范。

公开(公告)号：CN104846077B

公开(公告)日：2018-11-13

申请号：CN201510148702.9

申请日：2015-03-31

申请人： 江汉大学 ,  中国农业科学院作物科学研究所

发明人： 张静 ,  彭海 ,  陈斌 ,  陈红霖 ,  王沁

IPC分类号： C12Q1/6869 ,  C40B50/06

摘要： 本发明公开了一种测试纯系油菜新品种的特异性、一致性与稳定性的方法。所述方法包括：获得变异位点；确定待测油菜品种的测试区域；构建数据库；确定抽样量后，随机抽样混合并提取混合样本的DNA；制备引物；利用引物对混合样本的DNA进行扩增，扩增产物用于构建高通量测序文库；对高通量测序文库进行高通量测序，得到测序片段组；分析测序片段组，获得待测油菜品种基因型和杂株基因型；比较获得近似品种、变异位点和变异位点率；将杂株基因型与数据库中的基因型比较，获得杂株品种后，计算杂株率；利用变异位点、变异位点率和杂株率，判断待测油菜品种特异性、一致性和稳定性。该方法能够准确、完整地判断待测油菜品种的特异性、稳定性与一致性。

公开(公告)号：CN104805184B

公开(公告)日：2018-03-20

申请号：CN201510148635.0

申请日：2015-03-31

申请人： 江汉大学 ,  农业部科技发展中心

发明人： 彭海 ,  张静 ,  陈红 ,  方治伟 ,  冯涛

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明公开了一种测试纯系水稻新品种的特异性、一致性与稳定性的方法，具体包括：获得变异位点；确定待测水稻品种的测试区域；构建数据库；确定抽样量后，随机抽样混合并提取混合样本的DNA；制备引物；利用引物对混合样本的DNA进行扩增，扩增产物用于构建高通量测序文库；对高通量测序文库进行高通量测序，得到测序片段组；分析测序片段组，获得待测水稻品种基因型和杂株基因型；比较获得近似品种、变异位点和变异位点率；将杂株基因型与数据库中的基因型比较，获得杂株品种后，计算杂株率；利用变异位点、变异位点率和杂株率，判断待测水稻品种特异性、一致性和稳定性。该方法能够准确、完整地判断待测水稻品种的特异性、稳定性与一致性。