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公开(公告)号：CN112210521B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN201910625231.4
申请日：2019-07-11
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/90 , C12N15/54 , C12N15/52 , C12N15/60 , C12N15/53 , C12N15/10 , C12N9/00 , C12R1/19
Abstract: 一种筛选丙酰辅酶A羧化酶pcc的CT亚基的重组菌及其构建方法与应用，属于基因工程和蛋白质工程领域。针对丙酰辅酶A羧化酶酶活较低，以及如何对丙酰辅酶A羧化酶进行高通量筛选的问题，本发明提供了一种筛选丙酰辅酶A羧化酶pcc的CT亚基的重组菌，所述重组菌是以草酰乙酸营养缺陷型的大肠杆菌为宿主菌，在所述宿主菌中过表达甲基丙二酸单酰辅酶A羧基转移酶基因mct，乙酰辅酶A羧化酶BCCP亚基基因accB和乙酰辅酶A羧化酶BC亚基基因accC，本发明还提供了能够提高丙酰辅酶A羧化酶pcc酶活的单一位点突变体以及多位点突变体。本发明可实现丙酰辅酶A羧化酶基因pcc的CT亚基高通量筛选。
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公开(公告)号：CN112210521A
公开(公告)日：2021-01-12
申请号：CN201910625231.4
申请日：2019-07-11
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/90 , C12N15/54 , C12N15/52 , C12N15/60 , C12N15/53 , C12N15/10 , C12N9/00 , C12R1/19
Abstract: 一种筛选丙酰辅酶A羧化酶pcc的CT亚基的重组菌及其构建方法与应用，属于基因工程和蛋白质工程领域。针对丙酰辅酶A羧化酶酶活较低，以及如何对丙酰辅酶A羧化酶进行高通量筛选的问题，本发明提供了一种筛选丙酰辅酶A羧化酶pcc的CT亚基的重组菌，所述重组菌是以草酰乙酸营养缺陷型的大肠杆菌为宿主菌，在所述宿主菌中过表达甲基丙二酸单酰辅酶A羧基转移酶基因mct，乙酰辅酶A羧化酶BCCP亚基基因accB和乙酰辅酶A羧化酶BC亚基基因accC，本发明还提供了能够提高丙酰辅酶A羧化酶pcc酶活的单一位点突变体以及多位点突变体。本发明可实现丙酰辅酶A羧化酶基因pcc的CT亚基高通量筛选。
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公开(公告)号：CN110656074B
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN201810687117.X
申请日：2018-06-28
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明公开了一种合成次黄嘌呤的重组菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。该重组菌是以大肠杆菌为出发菌株，分别敲除大肠杆菌基因组上的转录阻遏蛋白基因purR、磷酸葡萄糖酸脱水酶基因edd、腺苷酸琥珀酸合成酶基因purA和次黄苷酸脱氢酶基因guaB，并且过表达D128A突变的PRPP合成酶基因prs和K326Q、P410W双突变的PRPP转酰胺酶基因purF。同时，本发明还提供了该重组菌的制备方法及利用该重组菌的生产次黄嘌呤的方法。本发明首次实现了工程大肠杆菌中次黄嘌呤的高效生物合成。该重组菌适用于发酵生产次黄嘌呤。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110656073B
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN201810687083.4
申请日：2018-06-28
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明公开了一种生产黄嘌呤的重组菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。该重组菌是以大肠杆菌为出发菌株，分别敲除大肠杆菌基因组上的转录阻遏蛋白基因purR、磷酸葡萄糖异构酶基因pgi、磷酸葡萄糖酸脱水酶基因edd、腺苷酸琥珀酸合成酶基因purA和GMP合成酶基因guaA，过表达D128A突变的PRPP合成酶基因prs和K326Q、P410W双突变的PRPP转酰胺酶purF。同时，本发明还提供了该重组菌的制备方法及利用该重组菌的生产黄嘌呤的方法。本发明首次实现了重组菌中黄嘌呤的高效生物合成。该重组菌适用于发酵生产黄嘌呤。
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公开(公告)号：CN110656073A
公开(公告)日：2020-01-07
申请号：CN201810687083.4
申请日：2018-06-28
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明公开了一种生产黄嘌呤的重组菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。该重组菌是以大肠杆菌为出发菌株，分别敲除大肠杆菌基因组上的转录阻遏蛋白基因purR、磷酸葡萄糖异构酶基因pgi、磷酸葡萄糖酸脱水酶基因edd、腺苷酸琥珀酸合成酶基因purA和GMP合成酶基因guaA，过表达D128A突变的PRPP合成酶基因prs和K326Q、P410W双突变的PRPP转酰胺酶purF。同时，本发明还提供了该重组菌的制备方法及利用该重组菌的生产黄嘌呤的方法。本发明首次实现了重组菌中黄嘌呤的高效生物合成。该重组菌适用于发酵生产黄嘌呤。
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公开(公告)号：CN110791467B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201810865467.0
申请日：2018-08-01
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明公开了一种生产乙酰丙酮的重组菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域，所述重组菌是以大肠杆菌为出发菌株，将编码乙酰丙酮裂解酶的基因、甲基乙二醛合成酶的基因、磷酸丙糖异构酶的基因导入到大肠杆菌，得到重组菌，首次实现了乙酰丙酮的生物合成。本发明所构建的重组菌可以利用葡萄糖为唯一碳源合成乙酰丙酮，发酵48h，可以得到53mg/L的乙酰丙酮。
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公开(公告)号：CN110656074A
公开(公告)日：2020-01-07
申请号：CN201810687117.X
申请日：2018-06-28
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明公开了一种合成次黄嘌呤的重组菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。该重组菌是以大肠杆菌为出发菌株，分别敲除大肠杆菌基因组上的转录阻遏蛋白基因purR、磷酸葡萄糖酸脱水酶基因edd、腺苷酸琥珀酸合成酶基因purA和次黄苷酸脱氢酶基因guaB，并且过表达D128A突变的PRPP合成酶基因prs和K326Q、P410W双突变的PRPP转酰胺酶基因purF。同时，本发明还提供了该重组菌的制备方法及利用该重组菌的生产次黄嘌呤的方法。本发明首次实现了工程大肠杆菌中次黄嘌呤的高效生物合成。该重组菌适用于发酵生产次黄嘌呤。
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公开(公告)号：CN110791467A
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201810865467.0
申请日：2018-08-01
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明公开了一种生产乙酰丙酮的重组菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域，所述重组菌是以大肠杆菌为出发菌株，将编码乙酰丙酮裂解酶的基因、甲基乙二醛合成酶的基因、磷酸丙糖异构酶的基因导入到大肠杆菌，得到重组菌，首次实现了乙酰丙酮的生物合成。本发明所构建的重组菌可以利用葡萄糖为唯一碳源合成乙酰丙酮，发酵48h，可以得到53mg/L的乙酰丙酮。
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