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公开(公告)号：CN118813517A
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202410906980.5
申请日：2024-07-08
申请人： 云南大学 , 云南省农业科学院花卉研究所
IPC分类号： C12N5/04
摘要： 本发明涉及植物原生质体制备领域，特别是涉及一种万寿菊叶片原生质体的制备方法。包括：将万寿菊幼嫩叶片进行黑暗处理，得到处理叶片；将处理叶片与原生质体酶解液混合、酶解，得到酶解物；将得到的酶解物过滤、离心、洗涤和纯化，得到万寿菊叶片原生质体。本发明通过对万寿菊叶片进行低温、黑暗预处理，利用原生质体酶解液、洗涤液和纯化液建立了高效的万寿菊叶片的原生质体制备体系，可在短期内获得大量完整的原生质体，为后续万寿菊原生质体培养、瞬时转化建立了坚实的基础。
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公开(公告)号：CN115583997B
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202211047440.3
申请日：2022-08-29
申请人： 云南大学
摘要： 本发明公开了一种产黄青霉菌灭活菌丝体多糖及其提取方法和应用，涉及青霉菌领域，针对现有的无法分离出产黄青霉菌灭活菌丝体多糖中具体的活性成分，使得产黄青霉菌灭活菌丝体多糖的应用受到制约的问题。本发明确切公布了产黄青霉菌灭活菌丝体多糖的结构和制备方法，包括乙醇沉淀、酶解除蛋白、凝胶色谱柱分离纯化，红外光谱、高效液相色谱、核磁共振分析结构，制备的产黄青霉菌灭活菌丝体多糖对烟草花叶病毒的防治具有较好的效果，制备的产黄青霉菌灭活菌丝体多糖使得产黄青霉菌灭活菌丝体有效成分更为明确，制备方法简单，药理更为清楚，为开发天然抗病毒制剂提供了依据和方法，在天然产物抗植物病害领域具有广泛的适用性。
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公开(公告)号：CN107723270A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201711193369.9
申请日：2017-11-24
申请人： 玉溪中烟种子有限责任公司 , 云南大学 , 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12N5/04
CPC分类号： C12N5/04 , C12N5/0025
摘要： 烟草花粉管的半离体培养方法，具体步骤为：取烟草始开期雌蕊，授粉后置于28 ℃恒温箱中预培养；用剃须刀片切割预培养的花柱二分之一或四分之三部位，切割完毕后置于含培养基的载玻片上，在保湿盒中28 ℃继续培养24 h；培养结束后，花粉管从花柱切割部位成束长出；用眼科镊在显微镜下切取花粉管，悬浮于含培养基的离心管中，5000 rpm离心10 min即可获得半离体培养的烟草花粉管。本发明中的培养基组分简单有效，可重复性高，针对花柱不同切割部位设置不同的培养时间和培养基，易于操作，为高效收集烟草半离体培养花粉管提供了有效途径。该方式适用于自交授粉和没有花柱不亲和阻碍的杂交授粉组合，为研究烟草花粉管和雌蕊互作调控机制提供了稳定体系。
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公开(公告)号：CN115521944B
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202211053162.2
申请日：2022-08-29
申请人： 云南大学
摘要： 本发明公开了一种青霉菌发酵物乙酸乙酯提取物的制备方法及其应用，涉及生物技术领域，针对现有的无法很好的提取乙酸乙酯的问题。现提出如下方案，其包括如下原料：经过100℃高温烘干的青霉菌发酵物，甲醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇，蒸馏水；本发明还提供了一种青霉菌发酵物乙酸乙酯提取物的制备方法，包括如下制备步骤：步骤一:将粉末状的青霉菌发酵物加入10倍量的甲醇中常温浸提24h，期间充分搅拌多次，回流提取3次，温度60℃，过滤，合并滤液。本发明的优点在于：乙酸乙酯提取操作简便、效率高、成本低廉，用于促进植物细胞的增殖效果佳，更为生物源的植物生长调节剂的开发提供了具有开发前景的物质。
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公开(公告)号：CN111217914B
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202010102860.1
申请日：2020-02-19
申请人： 玉溪中烟种子有限责任公司 , 云南大学
IPC分类号： C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573
摘要： 本发明公开了一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用，所述的单克隆抗体的重链可变区序列包含SEQ ID NO.1所示的CDR1的氨基酸序列GYTFTDYY，SEQ ID NO.2所示的CDR2的氨基酸序列INPYNGDT和SEQ ID NO.3所示的CDR3的氨基酸序列AREDYSGSSYVANFDY；所述的单克隆抗体的轻链可变区序列包含SEQ ID NO.4所示的CDR1的氨基酸序列KSLLHSNGITY，SEQ ID NO.5所示的CDR2的氨基酸序列QMS和SEQ ID NO.6所示的CDR3的氨基酸序列AQNLELWT。本发明提供一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用，以通过提供一个靶向蛋白研究的工具，使得对烟草和其它植物不同组织，不同生理条件下PPO蛋白表达变化及蛋白网络图谱的更深层次研究得以实现。
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公开(公告)号：CN111303291A
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN202010102554.8
申请日：2020-02-19
申请人： 云南大学
IPC分类号： C07K16/40 , G01N33/573
摘要： 一种烟草腺苷三磷酸酶的单克隆抗体，所述的单克隆抗体的重链可变区序列包含SEQ ID NO.2所示的CDR1的氨基酸序列GYSITSGYY，SEQ ID NO.4所示的CDR2的氨基酸序列ISYDGSN和SEQ ID NO.6所示的CDR3的氨基酸序列FGKGY；轻链可变区序列包含SEQ ID NO.9所示的CDR1的氨基酸序列QSIVHSNGNTY，SEQ ID NO.11所示的CDR2的氨基酸序列KVS和SEQ ID NO.13所示的CDR3的氨基酸序列FQGSHVPWT。本发明提供一种烟草腺苷三磷酸酶(Apyrases，APY)的单克隆抗体及其应用，以解决现有技术存在的缺陷，本发明通过提供一个靶向蛋白研究的工具，使得对烟草和其它植物不同组织，不同生理条件下APY蛋白表达变化检测得以实现。
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公开(公告)号：CN111217914A
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN202010102860.1
申请日：2020-02-19
申请人： 云南大学
IPC分类号： C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573
摘要： 本发明公开了一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用，所述的单克隆抗体的重链可变区序列包含SEQ ID NO.2所示的CDR1的氨基酸序列GYTFTDYY，SEQ ID NO.4所示的CDR2的氨基酸序列INPYNGDT和SEQ ID NO.6所示的CDR3的氨基酸序列AREDYSGSSYVANFDY；所述的单克隆抗体的轻链可变区序列包含SEQ ID NO.9所示的CDR1的氨基酸序列KSLLHSNGITY，SEQ ID NO.11所示的CDR2的氨基酸序列QMS和SEQ ID NO.13所示的CDR3的氨基酸序列AQNLELWT。本发明提供一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用，以通过提供一个靶向蛋白研究的工具，使得对烟草和其它植物不同组织，不同生理条件下PPO蛋白表达变化及蛋白网络图谱的更深层次研究得以实现。
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公开(公告)号：CN104996295A
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201510449640.5
申请日：2015-07-28
申请人： 云南大学
IPC分类号： A01H1/02
摘要： 提高栽培烟与花烟草杂交亲和性和结籽率的方法，属农业生物技术领域。方法为：母本花朵开放挂牌，挂牌时间为始开期，挂牌后72h、96h和120h为始开期后的衰老阶段，在这3个时间段，用父本成熟花粉对母本柱头授粉，授粉48h后采样，用胼胝质荧光统计花粉管数目和结籽率，比较授粉对杂交亲和性的影响；选母本始开期花朵，剥取雌蕊并剪取柱头，柱头在室内自然晾干2天后碎为粉末，将父本成熟花粉与柱头粉末按1:5-1:50的重量比混合；用混合的花粉对母本始开期后120h的花朵授粉，授粉48h后采样，用胼胝质荧光统计花粉管数目和结籽率，比较混合花粉对杂交结籽率的影响；栽培烟为母本，花烟草为父本。优点：操作简单，成本低，易推广，为植物种间杂交种的获得提供了参考。
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公开(公告)号：CN115583997A
公开(公告)日：2023-01-10
申请号：CN202211047440.3
申请日：2022-08-29
申请人： 云南大学
摘要： 本发明公开了一种产黄青霉菌灭活菌丝体多糖及其提取方法和应用，涉及青霉菌领域，针对现有的无法分离出产黄青霉菌灭活菌丝体多糖中具体的活性成分，使得产黄青霉菌灭活菌丝体多糖的应用受到制约的问题。本发明确切公布了产黄青霉菌灭活菌丝体多糖的结构和制备方法，包括乙醇沉淀、酶解除蛋白、凝胶色谱柱分离纯化，红外光谱、高效液相色谱、核磁共振分析结构，制备的产黄青霉菌灭活菌丝体多糖对烟草花叶病毒的防治具有较好的效果，制备的产黄青霉菌灭活菌丝体多糖使得产黄青霉菌灭活菌丝体有效成分更为明确，制备方法简单，药理更为清楚，为开发天然抗病毒制剂提供了依据和方法，在天然产物抗植物病害领域具有广泛的适用性。
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公开(公告)号：CN115521944A
公开(公告)日：2022-12-27
申请号：CN202211053162.2
申请日：2022-08-29
申请人： 云南大学
摘要： 本发明公开了一种青霉菌发酵物乙酸乙酯提取物的制备方法及其应用，涉及生物技术领域，针对现有的无法很好的提取乙酸乙酯的问题。现提出如下方案，其包括如下原料：经过100℃高温烘干的青霉菌发酵物，甲醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇，蒸馏水；本发明还提供了一种青霉菌发酵物乙酸乙酯提取物的制备方法，包括如下制备步骤：步骤一:将粉末状的青霉菌发酵物加入10倍量的甲醇中常温浸提24h，期间充分搅拌多次，回流提取3次，温度60℃，过滤，合并滤液。本发明的优点在于：乙酸乙酯提取操作简便、效率高、成本低廉，用于促进植物细胞的增殖效果佳，更为生物源的植物生长调节剂的开发提供了具有开发前景的物质。
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