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    一种万寿菊花瓣原生质体的制备方法和瞬时转化方法
    1.
    发明公开
    一种万寿菊花瓣原生质体的制备方法和瞬时转化方法 审中-公开

    公开(公告)号：CN118909911A

    公开(公告)日：2024-11-08

    申请号：CN202411097820.7

    申请日：2024-08-12

    申请人： 云南省农业科学院花卉研究所 ,  云南大学

    发明人： 段青 ,  王继华 ,  吴含 ,  马岚 ,  杨丽梅 ,  李想 ,  杜文文 ,  崔光芬

    IPC分类号： C12N5/04 ,  C12N15/82 ,  C12N15/65

    摘要： 本发明涉及植物组织培养技术领域，特别是涉及一种万寿菊花瓣原生质体的制备方法和瞬时转化方法。包括：将未完全开放的万寿菊花朵进行预处理，得到预处理花瓣；预处理的条件包括：在4℃下暗处理12～48h；将预处理花瓣与酶解液混合、酶解，得到酶解物；酶解的条件包括：温度为20～30℃，时间为8～12h；将酶解物与W5溶液混合后过滤，将得到的滤液离心，得到的沉淀为万寿菊花瓣原生质体。本发明以万寿菊花瓣为材料，预处理后使用酶解液酶解、分离、纯化原生质体，通过优化预处理条件、酶解时间等酶解条件，建立了高效、快捷的万寿菊花瓣原生质体制备体系。

    一种万寿菊叶片原生质体的制备方法
    2.
    发明公开
    一种万寿菊叶片原生质体的制备方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN118813517A

    公开(公告)日：2024-10-22

    申请号：CN202410906980.5

    申请日：2024-07-08

    申请人： 云南大学 ,  云南省农业科学院花卉研究所

    发明人： 段青 ,  陈弓林 ,  黄琳 ,  廖菊够 ,  陈穗云 ,  马岚 ,  杜文文 ,  崔光芬 ,  李想

    IPC分类号： C12N5/04

    摘要： 本发明涉及植物原生质体制备领域，特别是涉及一种万寿菊叶片原生质体的制备方法。包括：将万寿菊幼嫩叶片进行黑暗处理，得到处理叶片；将处理叶片与原生质体酶解液混合、酶解，得到酶解物；将得到的酶解物过滤、离心、洗涤和纯化，得到万寿菊叶片原生质体。本发明通过对万寿菊叶片进行低温、黑暗预处理，利用原生质体酶解液、洗涤液和纯化液建立了高效的万寿菊叶片的原生质体制备体系，可在短期内获得大量完整的原生质体，为后续万寿菊原生质体培养、瞬时转化建立了坚实的基础。

    一种蜗牛秋海棠离体组培繁殖方法
    3.
    发明公开
    一种蜗牛秋海棠离体组培繁殖方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN114402999A

    公开(公告)日：2022-04-29

    申请号：CN202111486691.7

    申请日：2021-12-07

    申请人： 云南省农业科学院花卉研究所

    发明人： 杜文文 ,  段青 ,  王继华 ,  王祥宁 ,  贾文杰 ,  马璐琳 ,  李想

    IPC分类号： A01H4/00

    摘要： 本发明提供一种蜗牛秋海棠离体组培繁殖方法，包括下列各步骤：1）采集蜗牛秋海棠叶片；2）对叶片进行消毒；3）切割成方块叶片；4）接种在MS+6‑BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L的培养基上，在空气相对湿度为70‑80%、光照10‑12个小时的室内条件下培养；5）接种到MS+6‑BA 1.0mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上增殖培养；6）接种到1/2MS+NAA0.1 mg/L+活性炭0.7g/L培养基上生根培养；7）移栽到以泥炭为基质的穴盘中培养成蜗牛秋海棠植株。用一个叶片，110—140天，就能繁殖出30‑60株小苗，大大提高了繁殖系数，促进了蜗牛秋海棠的高效繁育，尽快形成规模化生产，满足市场需求。

    中国桔梗RPL13内参基因序列及其引物与应用
    4.
    发明公开
    中国桔梗RPL13内参基因序列及其引物与应用 审中-实审

    公开(公告)号：CN114277033A

    公开(公告)日：2022-04-05

    申请号：CN202111459066.3

    申请日：2021-12-01

    申请人： 云南省农业科学院花卉研究所

    发明人： 马璐琳 ,  王继华 ,  贾文杰 ,  段青 ,  杜文文 ,  王祥宁 ,  李想

    IPC分类号： C12N15/29 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q1/686

    摘要： 本发明涉及一个中国桔梗RPL13内参基因序列及其引物与应用，属于基因工程技术领域。所述RPL13内参基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该RPL13基因可以做为对中国桔梗以及与其亲缘关系较近的桔梗科其它植物中的类黄酮/花青素合成途径中的色素合成相关基因在中国桔梗及其同科其它植物的蓝、紫、白3种不同花色花器官中进行基因表达谱分析研究的内参基因。也可以做为对中国桔梗及其同科其它植物中的茎、叶及蓝、紫、白3种不同花色花器官共5种不同组织部位中的目标基因进行表达谱分析研究时所用的内参基因。

    一种泸定百合HIS内参基因及其引物和应用
    7.
    发明公开
    一种泸定百合HIS内参基因及其引物和应用 审中-实审

    公开(公告)号：CN115927729A

    公开(公告)日：2023-04-07

    申请号：CN202211556584.1

    申请日：2022-12-06

    申请人： 云南省农业科学院花卉研究所

    发明人： 马璐琳 ,  段青 ,  崔光芬 ,  贾文杰 ,  杜文文 ,  李想 ,  王祥宁 ,  王继华

    IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12N15/11

    摘要： 本发明提供了一种泸定百合HIS内参基因及其引物和应用，属于基因工程领域。所述泸定百合HIS内参基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供一个长为402bp的泸定百合HIS基因序列，可作为对泸定百合镰刀菌枯萎病抗病基因表达谱分析的内参基因。根据研究需要设计相应的基因表达分析(包括RT‑PCR、qRT‑PCR)内参引物来对泸定百合或与其亲缘关系相近的百合属其它植物中的镰刀菌枯萎病抗病相关基因的表达情况进行分析。所提供的一对qRT‑PCR分析用内参引物可以直接用来作为对泸定百合镰刀菌枯萎病抗病相关基因在百合镰刀菌诱导不同时间的泸定百合组培苗中的表达情况进行qRT‑PCR分析的内参引物。

    一种提高观叶秋海棠观赏品质的栽培方法
    8.
    发明公开
    一种提高观叶秋海棠观赏品质的栽培方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN115500232A

    公开(公告)日：2022-12-23

    申请号：CN202211167885.5

    申请日：2022-09-23

    申请人： 云南省农业科学院花卉研究所

    发明人： 杜文文 ,  段青 ,  王祥宁 ,  李想 ,  马璐琳 ,  贾文杰 ,  崔光芬

    IPC分类号： A01G22/60 ,  A01G13/00 ,  A01G2/10

    摘要： 本发明提供一种提高观叶秋海棠观赏品质的栽培方法，其特征在于它包括以下步骤：1）栽培基质选择，2）花盆选择，3）秋海棠扦插苗的扦插，4）浇水管理，5）苗期管理，6）生长期管理，7）销售前管理。以腐殖土作为栽培基质，促进根系生长，利于植株健壮，并根据不同品种秋海棠的生长速度，选择单盆栽种数量，有利于后期形成紧凑、致密的株型，提高秋海棠产品的观赏价值。通过对温度、湿度、光照强度的控制，让叶片着色，使叶片呈现更艳丽的色彩，提高观赏性能，不同肥料及药剂的搭配使用，提高植株健康程度、降低病虫害对其的侵害，延长秋海棠叶片较高的、稳定的观赏特征期限，满足市场需求，增加种植者经济效益。

    一种减弱东方百合和OT百合切花浓郁花香的方法
    10.
    发明公开
    一种减弱东方百合和OT百合切花浓郁花香的方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN117898285A

    公开(公告)日：2024-04-19

    申请号：CN202311700415.5

    申请日：2023-12-12

    申请人： 云南省农业科学院花卉研究所

    发明人： 杜文文 ,  杨亚辉 ,  崔光芬 ,  王继华 ,  段青 ,  李想 ,  马璐琳 ,  马岚 ,  贾文杰

    IPC分类号： A01N3/02

    摘要： 本发明提供一种减弱东方百合和OT百合切花浓郁花香的方法，其特征在于它包括以下步骤：（1）配制质量浓度为0.036%～0.045%的二氯异噁草酮溶液，常温下保存；（2）在步骤（1）配置好的二氯异噁草酮溶液500ml中，加入通用保鲜剂5g，配制成含1%质量比保鲜剂的二氯异噁草酮瓶插液；（3）将开放第一天的东方百合和OT百合切花分别插入步骤（2）的瓶插液中，瓶插24h后，即可降低东方百合和OT百合切花的浓郁香气，解决长时间接触这类百合给人带来不适的问题。