防治猪流感病毒的复方中药制剂

    公开(公告)号:CN102697906A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210186234.0

    申请日:2012-06-07

    摘要: 防治猪流感病毒的复方中药制剂,其特征在于由麻黄22—28重量份、杏仁17—22重量份、石膏22—28重量份、连翘28—33重量份构成;或者由麻黄27—33重量份、杏仁27—33重量份、桂枝22—27重量份、炙甘草13—17重量份构成。本发明与已有技术相比,具有药源丰富、残毒较低或无残毒、副作用小、不易产生耐药性的,同时能调节机体免疫功能、抑制病毒复制、改善临床症状的优点。

    长期传代培养鸡胚胎干细胞的方法及其专用培养基

    公开(公告)号:CN102329771A

    公开(公告)日:2012-01-25

    申请号:CN201110306604.5

    申请日:2011-10-12

    IPC分类号: C12N5/0735

    摘要: 长期传代培养鸡胚胎干细胞的方法及其专用培养基,其特征在于分离期胚盘明区的细胞,经机械吹打分散成单个细胞或小细胞团后,接种于STO饲养层,用上述鸡胚胎干细胞在专用培养基及37~38℃环境下培养,3~5天传代一次,专用培养基包括条件培养液600-900mL;胎牛血清50-150mL;鸡血清5-20mL;非必需氨基酸中的一种或几种混合物5-25mL;L-谷氨酰胺0.146-0.292g;β-巯基乙醇6-14μL;小鼠白血病抑制因子1—2×106IU;碱性成纤维细胞生长因子10-50μg;干细胞生长因子5-20μg,将上述成分用DMEM高糖培养基定容至1000mL,调pH值为7.2-7.5,条件培养液是这样获得的,培养BRL-3A细胞至细胞汇合后,收集培养细胞的上清液,离心分离后再经滤膜过滤所得即为条件培养液。本发明与已有技术相比,具有可以实现鸡胚胎干细胞的长期传代培养,并具有细胞增殖快、克隆获得率高的优点。

    一种鸡生殖新月来源PGCs的分离培养方法

    公开(公告)号:CN104911144B

    公开(公告)日:2018-08-24

    申请号:CN201510262185.8

    申请日:2015-05-21

    IPC分类号: C12N5/0735

    摘要: 本发明所述一种鸡生殖新月来源PGCs的分离培养方法,包括以下步骤:(1)分离方法是通过贴滤膜法从种蛋中取出无卵黄污染的干净鸡胚,然后从鸡胚中获取生殖新月组织;(2)用胰酶将生殖新月组织消化成单细胞,然后对单细胞中的PGCs进行纯化;(3)将纯化后PGCs置入含有BRL‑3A细胞饲养层和PGCs完全培养液的培养体系中培养。本发明中的PGCs来源于鸡胚生殖新月区,5‑8HH期鸡胚生殖新月区的PGCs含量较高,具有更好增殖活力和维持高水平的多能性,贴滤膜法分离鸡胚胚盘,操作简单,重复性好,从种蛋中分离出无卵黄污染的干净鸡胚,获得较为纯净的PGCs。分离培养的PGCs可大量增殖,用于后续实验操作。

    一种分离鸡胚血来源的原始生殖干细胞的方法

    公开(公告)号:CN105779377A

    公开(公告)日:2016-07-20

    申请号:CN201610210520.4

    申请日:2016-04-05

    IPC分类号: C12N5/073

    CPC分类号: C12N5/0611 C12N2509/00

    摘要: 本发明公开了一种分离鸡胚血液来源原始生殖细胞的方法。其在制备微量玻璃针采血装置的基础上,利用玻璃细针虹吸原理快速有效的从血液分离鸡原始生殖细胞。包括以下步骤:微量玻璃针采血装置的制备;14HH鸡胚血液的采集;采集的14HH鸡胚血液置入含有BRL?3A细胞饲养层和PGCs完全培养液的培养体系中培养,原代培养10?15d即可纯化细胞;将纯化后PGCs重新置入含有完全培养基的BRL?3A饲养层细胞上进行体外培养扩增;对体外培养扩增的PGCs进行间接免疫荧光检测,包括SSEA?1和DAZL表面标记;对体外培养扩增的PGCs进行RT?PCR鉴定。经鉴定,通过本发明方法获得的细胞为阳性原始生殖细胞,且该细胞具有较好的体外增殖能力。本方明方法具有简便、快速、获取的细胞多等特点。

    一种原代培养犬脐带来源的间充质干细胞的方法

    公开(公告)号:CN107164319B

    公开(公告)日:2021-06-01

    申请号:CN201710380720.9

    申请日:2017-05-25

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明提供了一种原代培养犬脐带来源的间充质干细胞的方法。所述间充质干细胞来源于新生犬脐带,来源广泛,材料易得,使后期该细胞的大量生产和临床应用成为可能。本培养方法操作简单、重复性好,从中可获得较少的杂细胞和无污染的纯净间充质干细胞。培养方法中使用的胶原酶消化方法温和,对细胞的损害较少,能获得大量的具有较强增殖能力的间充质干细胞,可用于后续该细胞的建系、干细胞特性与治疗疾病等。

    一种犬间充质干细胞专用常温保存液及应用

    公开(公告)号:CN107912424A

    公开(公告)日:2018-04-17

    申请号:CN201711251147.8

    申请日:2017-12-01

    IPC分类号: A01N1/02

    CPC分类号: A01N1/021

    摘要: 本发明提供了一种犬间充质干细胞专用常温保存液,包括以下成分:犬血白蛋白、生理盐水、葡萄糖、柠檬酸、氯化钠。还提供了上述犬间充质干细胞专用常温保存液的应用方法,包括:将经过运输前处理的犬间充质干细胞加入所述犬间充质干细胞专用常温保存液中,调整细胞密度至5×105~6/ml,取1ml细胞悬液至2ml EP管中,密封。该犬间充质干细胞专用常温保存液易于制备,且制备成本较低,在常温下有良好的保存犬间充质干细胞效果,有效防止犬间充质干细胞死亡或成团。

    一种鸡生殖新月来源PGCs的分离培养方法

    公开(公告)号:CN104911144A

    公开(公告)日:2015-09-16

    申请号:CN201510262185.8

    申请日:2015-05-21

    IPC分类号: C12N5/0735

    摘要: 本发明所述一种鸡生殖新月来源PGCs的分离培养方法,包括以下步骤:(1)分离方法是通过贴滤膜法从种蛋中取出无卵黄污染的干净鸡胚,然后从鸡胚中获取生殖新月组织;(2)用胰酶将生殖新月组织消化成单细胞,然后对单细胞中的PGCs进行纯化;(3)将纯化后PGCs置入含有BRL-3A细胞饲养层和PGCs完全培养液的培养体系中培养。本发明中的PGCs来源于鸡胚生殖新月区,5-8HH期鸡胚生殖新月区的PGCs含量较高,具有更好增殖活力和维持高水平的多能性,贴滤膜法分离鸡胚胚盘,操作简单,重复性好,从种蛋中分离出无卵黄污染的干净鸡胚,获得较为纯净的PGCs。分离培养的PGCs可大量增殖,用于后续实验操作。