一种牛冠状病毒病毒样颗粒的制备方法

    公开(公告)号:CN118894911A

    公开(公告)日:2024-11-05

    申请号:CN202410985959.9

    申请日:2024-07-23

    Abstract: 本发明公开了一种牛冠状病毒病毒样颗粒的制备方法,涉及牛冠状病毒病毒样颗粒制备技术领域。以BCoV的S、M、E基因片段转化至感受态细胞中,获得杆粒DNA,命名为Bac‑S、Bac‑M、Bac‑E;转染至Sf9细胞液,收集P2代病毒液,裂解,得到重组杆状病毒rBac‑S、rBac‑M、rBac‑E;按照1:1.72:0.36的比例进行混合,滴加于Sf9细胞液中培养,4~5d后收取活力在60~80%时的细胞培养上清,离心,收获上清,纯化,获得BCoV VLPs。通过免疫小鼠后发现BCoV VLPs中高剂量可诱导机体产生体液免疫与细胞免疫,具有一定的免疫原性,为进一步开发牛冠状病毒新型疫苗提供基础。

    牛支原体的RAA-CRISPR检测方法及应用

    公开(公告)号:CN118755854A

    公开(公告)日:2024-10-11

    申请号:CN202410914795.0

    申请日:2024-07-09

    Abstract: 本发明公开了牛支原体的RAA‑CRISPR检测方法及应用。属于病原体检测技术领域。本发明根据牛支原体特异性oppD/F基因设计1对引物,利用RAA技术,在39℃等温扩增25min,其产物作为该方法反应体系的模板,RAA‑CRISPR/Cas12a扩增反应体系反应组分,在37℃反应10min,根据试纸条显色情况来检测牛支原体。与现有技术相比,本发明取得的有益效果为:本发明方法方便快捷,能在34℃~42℃温度条件下,较短的时间内检测牛支原体,且不依赖于昂贵的仪器设备,灵敏度高,特异性好,对于牛支原体感染的临床快速诊断具有较高的参考价值,适于推广应用。

    牛呼吸道合胞体病毒F和N双基因检测引物、方法及应用

    公开(公告)号:CN118621062A

    公开(公告)日:2024-09-10

    申请号:CN202410752481.5

    申请日:2024-06-12

    Abstract: 本发明公开了一种牛呼吸道合胞体病毒F和N双基因检测引物、方法及应用涉及牛呼吸道合胞体病毒检测技术领域,引物如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.9所示,根据牛呼吸道合胞体病毒的F和N基因的保守区域设计引物与探针,可同时实现对BRSV的F和N两个特异性基因进行检测。此外,还引入牛原癌基因ABL1作为内参基因,在精准快速鉴别BRSV的同时,可对每份检测样品、整个检测流程及结果判定进行有效性评价。通过对检测方法进行系列优化,建立高效、灵敏、特异的检测牛呼吸道合胞体病毒F和N双基因的多重RT‑PCR检测方法,为BRSV的快速检测、牛群净化及分子流行病学调查提供必要的技术支持。

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