一种抑制鸡先天性免疫反应鸡马立克氏病病毒蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN109929014B

    公开(公告)日:2021-06-11

    申请号:CN201910119158.3

    申请日:2019-02-18

    摘要: 本发明提供了一种抑制鸡先天性免疫反应鸡马立克氏病病毒蛋白及其应用,该蛋白表达升高可增强鸡马立克氏病病毒(尤其是疫苗株)在鸡胚成纤维细胞上的复制,从而提高疫苗的免疫效力,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白;或在SEQ ID NO.1中所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等活性由a)衍生的蛋白。本发明还构建该蛋白基因缺失的重组马立克氏病病毒研究结果发现,缺失了该蛋白的MDV病毒增强了MDV诱导IFN‑I的产生,从而为设计抗马立克氏病病毒强毒感染的药物提供物质基础。该蛋白过表达ICP0蛋白的鸡胚成纤维细胞能够增强MDV的复制。

    鸡CR2基因的克隆、蛋白的表达和纯化及其多克隆抗体的制备

    公开(公告)号:CN111763256A

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN202010781397.8

    申请日:2020-08-06

    摘要: 本发明提供了鸡CR2基因的克隆、蛋白的表达和纯化及其多克隆抗体的制备。提供了ChCR2蛋白的氨基酸序列和基因序列,构建了含有不同标签的ChCR2原核表达载体,利用大肠杆菌原核表达系统表达ChCR2蛋白,并对蛋白进行纯化。纯化后的蛋白能够制备效价较高的多克隆抗体。ChCR2基因,在鸡免疫系统中的作用十分重大。CR2能将先天性补体介导的免疫应答与病原体和外来抗原联系起来,通过与共价附着于靶标的C3d结合而产生的适应性免疫应答,其导致的细胞信号传导现象,能极大程度降低B细胞活化的阈值。B细胞在免疫系统中的位置举足轻重,所以本发明发现的ChCR2无论是从基础研究还是临床运用上的意义都是十分重大的。

    一种纯化重组鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的马立克氏病病毒CVI988株的方法

    公开(公告)号:CN109666656A

    公开(公告)日:2019-04-23

    申请号:CN201910062666.2

    申请日:2019-01-23

    IPC分类号: C12N7/01 C12N7/02

    摘要: 本发明提供了一种纯化重组鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的马立克氏病病毒CVI988株(CVI-VP2)的方法,该方法将感染重组病毒CVI-VP2种子毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)在96孔细胞板上进行有限稀释,一分为二进行6孔板和96孔细胞板培养后,采用固定液将6孔板中的VP2蛋白固定,以抗IBDV VP2单克隆抗体为一抗,辣根过氧化物酶HRP标记的羊抗鼠IgG进行结合反应,再进行AEC原位染色;进一步选取上述试验的6孔板90%以上空斑为IBDV VP2表达阳性孔(空斑被染成深褐色)对应的96孔板进行下一轮的纯化,直至筛选出高效表达IBDV VP2蛋白的细胞克隆。该方法操作简便、重复性好、肉眼或光镜下即可以读取实验结果。

    表达鹦鹉热衣原体pmpD-N基因的HVT重组体及其构建

    公开(公告)号:CN104046597A

    公开(公告)日:2014-09-17

    申请号:CN201410246278.7

    申请日:2014-06-05

    摘要: 本发明提供了可作为疫苗的重组HVT病毒,一种本发明是基于火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)的细菌人工染色体上,将鹦鹉热衣原体pmpD-N基因插入到HVT的基因组中,然后通过病毒拯救技术,获得重组HVT病毒。该病毒能使其感染的鸡胚成纤维细胞中表达出鹦鹉热衣原体pmpD-N蛋白,由此制备一种既可防控鸡马立克氏病,又可有效抵抗鹦鹉热衣原体的二联禽用疫苗,该疫苗由于HVT在细胞间传递,可以克服母源抗体的干扰,故可以用于1日龄雏鸡甚至18日龄鸡胚免疫;同时由于使用单一蛋白作为免疫原,故又能适用于将来进行疫苗免疫与野毒感染的鉴别诊断。

    禽流感病毒(H5N1亚型)血清抗体的aGST-ELISA检测方法

    公开(公告)号:CN1869703A

    公开(公告)日:2006-11-29

    申请号:CN200610089463.5

    申请日:2006-06-28

    IPC分类号: G01N33/577 G01N33/543

    摘要: 本发明涉及“禽流感病毒(H5N1亚型)血清抗体的aGST-ELISA检测方法”,其检测抗原为高纯度融合蛋白GST-HA1,所述高纯度融合蛋白GST-HA1是在酶联板上用抗GST单抗捕获融合蛋白GST-HA1而制得。该方法可用于禽流感血清抗体的检测,其优点是:既克服目前常规的以原核表达产物作为包被抗原方法中需要将表达产物变性、复性才能纯化的缺点,还有抗原制备工艺简单、生物安全度高、成本低廉、易于生产等特点,为进一步开发和研究禽流感检测试剂盒奠定基础。

    一种快速检测副鸡禽杆菌的试剂盒

    公开(公告)号:CN105695579A

    公开(公告)日:2016-06-22

    申请号:CN201610132798.4

    申请日:2016-03-09

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    CPC分类号: C12Q1/689 C12Q1/6844

    摘要: 本发明提供一种高灵敏度、高特异性的用于检测副鸡禽杆菌的LAMP引物组,包括外引物F3和B3,内引物FIP和BIP。在此基础上,本发明进一步提供一种简单、快速、准确的检测副鸡禽杆菌的试剂盒,该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、操作简单的特点。利用该试剂盒检测副鸡禽杆菌的方法,具有快速高效、操作简便、特异性强、灵敏度高、适合现场检测等优点,不需要配置相关检测仪器,为副鸡禽杆菌的检测提供了新的技术支撑,可用于畜牧业生产单位、兽医检测实验室、屠宰场、出入境和各疾病预防控制中心筛查和检测,具有广阔的市场前景,适于推广应用。