基于KASP技术检测κ-酪蛋白基因型的方法

    公开(公告)号:CN109321639A

    公开(公告)日:2019-02-12

    申请号:CN201811181116.4

    申请日:2018-10-10

    IPC分类号: C12Q1/6858

    摘要: 本发明涉及一种基于KASP技术检测κ-酪蛋白基因型的方法,包括如下步骤:制备DNA样品;制备好PCR扩增体系;进行PCR扩增;PCR扩增体系中的混合引物包括三种KASP引物:上游突变基因引物、上游未突变基因引物以及下游引物,并且,上游突变基因引物及上游未突变基因引物中,一条设计有HEX荧光标签序列,另一条设计有FAM荧光标签序列;根据PCR扩增后DNA样品的荧光强度,进行基因分型。本发明实现了对奶牛中CSN3三种常见变异体的全面筛选,可充分利用基因检测等领域的资源与技术优势培育优质种牛,发掘奶牛特色种质资源,为牧场选择合适的奶牛,提高乳蛋白率,从种源解决相关领域的技术瓶颈,对奶牛良种产业健康发展具有重要意义。

    一种检测牛APAF1基因隐性致死突变的方法

    公开(公告)号:CN105838821B

    公开(公告)日:2019-12-06

    申请号:CN201610394658.4

    申请日:2016-06-06

    IPC分类号: C12Q1/6888 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种检测牛APAF1基因隐性致死突变的方法,涉及分子生物学领域,本发明方法基于焦磷酸测序技术,采用一对扩增引物、一条通用引物和一条测序引物,其核苷酸序列如SEQ ID No.1、2、3、4所示,对牛5号染色体63150400bp位点的单核苷酸多态性进行分析,结果发现牛APAF1基因野生型纯合子在C碱基处有峰,T碱基处无峰;而致死突变携带者在C碱基与T碱基处均有峰。本发明提供的方法操作简单,灵敏度高,准确性强,通量高,检测成本低,可快速检测APAF1基因隐性致死突变携带者的个体,在牛的育种过程中具有重要应用价值。

    基于高效液相色谱对β乳球蛋白进行分型的方法

    公开(公告)号:CN109613139A

    公开(公告)日:2019-04-12

    申请号:CN201910004121.6

    申请日:2019-01-03

    IPC分类号: G01N30/02

    摘要: 本发明涉及一种基于高效液相色谱对β乳球蛋白进行分型的方法,包括如下步骤:步骤S1:利用冷冻奶样制备分型样品;步骤S2:向高效液相色谱柱进样;步骤S3:分别在不同时间点以不同体积的洗脱液洗脱样品;步骤S4:根据分型样品洗脱后出峰的保留时间和峰面积参数将β-乳球蛋白分型为A-β乳球蛋白和B-β乳球蛋白。本发明提供的基于高效液相色谱对β乳球蛋白进行分型的方法,重现性好,准确度高,能够实现对样品的批量检测,大大减少分析时间,而且方法简单易行,方便可靠。

    一种检测牛SMC2基因隐性致死突变的方法

    公开(公告)号:CN106011250A

    公开(公告)日:2016-10-12

    申请号:CN201610393611.6

    申请日:2016-06-06

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种检测牛SMC2基因隐性致死突变的方法,涉及分子生物学领域,本发明方法基于焦磷酸测序技术,采用一对引物、一条通用引物和一条测序引物,核苷酸序列如SEQ ID No.1、2、3、4所示,对牛8号染色体95410507bp位点的单核苷酸多态性进行分析,结果发现野生型纯合子在突变位点处为T/T基因型,焦磷酸测序结果图显示T碱基与C碱基的峰高比例为3:1;而致死突变携带者峰图在突变位点处为T/C基因型,焦磷酸测序结果图显示T碱基与C碱基的峰高比例为5:3。本发明提供的方法操作简单,灵敏度高,准确性强,通量高,检测成本低,在牛的保种、育种过程中具有重要应用价值。

    一种检测牛SMC2基因隐性致死突变的方法

    公开(公告)号:CN106011250B

    公开(公告)日:2019-08-30

    申请号:CN201610393611.6

    申请日:2016-06-06

    IPC分类号: C12Q1/6883 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种检测牛SMC2基因隐性致死突变的方法,涉及分子生物学领域,本发明方法基于焦磷酸测序技术,采用一对引物、一条通用引物和一条测序引物,核苷酸序列如SEQ ID No.1、2、3、4所示,对牛8号染色体95410507bp位点的单核苷酸多态性进行分析,结果发现野生型纯合子在突变位点处为T/T基因型,焦磷酸测序结果图显示T碱基与C碱基的峰高比例为3:1;而致死突变携带者峰图在突变位点处为T/C基因型,焦磷酸测序结果图显示T碱基与C碱基的峰高比例为5:3。本发明提供的方法操作简单,灵敏度高,准确性强,通量高,检测成本低,在牛的保种、育种过程中具有重要应用价值。

    基于KASP技术检测β-乳球蛋白基因型的方法

    公开(公告)号:CN109402265A

    公开(公告)日:2019-03-01

    申请号:CN201811182098.1

    申请日:2018-10-10

    IPC分类号: C12Q1/6888 C12Q1/686

    摘要: 本发明涉及一种基于KASP技术检测β-乳球蛋白基因型的方法,包括如下步骤:制备DNA样品;制备好PCR扩增体系;进行PCR扩增;PCR扩增体系中的混合引物包括三种KASP引物:上游未突变基因引物、上游突变基因引物以及下游引物,并且,上游未突变基因引物及上游突变基因引物中分别设计有HEX荧光标签序列及FAM突变荧光标签序列;根据PCR扩增后DNA样品的荧光强度,进行基因分型。本发明实现了对奶牛中BLG基因两种常见变异体的全面筛选,可充分利用基因检测等领域的资源与技术优势培育优质种牛,发掘奶牛特色种质资源,为牧场选择合适的奶牛,提高产奶性状,从种源解决相关领域的技术瓶颈,对奶牛良种产业健康发展具有重要意义。