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公开(公告)号：CN102645360A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210111914.6
申请日：2012-04-16
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： G01N1/28
摘要： 本发明公开了一种紫微属植物茎尖生长点染色体制片方法。本发明方法选取紫薇属植物一年生枝条茎尖生长点或初冬修剪经冷藏处理的枝条水培后新发出的茎尖生长点最内侧长度为0.5～1.0cm的部分，依次经固定液(按体积比乙醇∶冰醋酸∶三氯甲烷＝5∶3∶2)固定、前低渗处理、混合酶液酶解后低渗处理，火焰干燥法制片。本发明的染色体制片方法省去预处理、解离、染色压片过程，直接固定，提高制片效率，避免预处理液及解离液对染色体的毒害作用，维持染色体原始形态，获得更好的染色体分散效果，同时扩大了紫薇属植物染色体制片的取材范围及时间。本发明方法的制片能够用于荧光原位杂交实验，为紫薇属基因组的进一步研究奠定良好基础。
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公开(公告)号：CN102787166B
公开(公告)日：2014-03-12
申请号：CN201210245928.7
申请日：2012-07-16
申请人： 北京林业大学
摘要： 本发明涉及一种梅花染色体的荧光原位杂交方法，以梅花中期染色体作为靶DNA，以玉米45SrDNA为探针，用缺刻平移法标记探针，将玉米45SrDNA探针清晰的定位在梅花染色体上。本发明在现有技术基础上，对共变性方法进行改进，采用探针变性、染色体和探针共变性两步来完成变性过程，大大提高杂交成功率。本发明确定了合适的变性温度和变性时间，杂交时间和洗脱方法，杂交特异性高，使得FISH技术很好的应用于梅花等小染色体植物的染色体检测，为梅花染色体深入研究，提供了新的途径和方法。
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公开(公告)号：CN102787166A
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201210245928.7
申请日：2012-07-16
申请人： 北京林业大学
摘要： 本发明涉及一种梅花染色体的荧光原位杂交方法，以梅花中期染色体作为靶DNA，以玉米45SrDNA为探针，用缺刻平移法标记探针，将玉米45SrDNA探针清晰的定位在梅花染色体上。本发明在现有技术基础上，对共变性方法进行改进，采用探针变性、染色体和探针共变性两步来完成变性过程，大大提高杂交成功率。本发明确定了合适的变性温度和变性时间，杂交时间和洗脱方法，杂交特异性高，使得FISH技术很好的应用于梅花等小染色体植物的染色体检测，为梅花染色体深入研究，提供了新的途径和方法。
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公开(公告)号：CN103305614A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310223882.3
申请日：2013-06-06
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及一种紫薇属植物染色体的原位杂交方法，包括制片、制备探针、杂交前预处理、制备杂交液、探针变性与染色体变性、杂交和检测七个步骤。以紫薇属植物中期染色体作为靶DNA，以玉米45S rDNA为探针，将玉米45S rDNA探针清晰的定位在紫薇属植物染色体上。本发明所述的杂交方法能有效消除背景干扰，提高检测灵敏度和准确性，可以较好的应用于紫薇属等小染色体植物的染色体检测，为紫薇属植物染色体的深入研究，提供了新的途径和方法。
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公开(公告)号：CN103305614B
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201310223882.3
申请日：2013-06-06
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及一种紫薇属植物染色体的原位杂交方法，包括制片、制备探针、杂交前预处理、制备杂交液、探针变性与染色体变性、杂交和检测七个步骤。以紫薇属植物中期染色体作为靶DNA，以玉米45S rDNA为探针，将玉米45S rDNA探针清晰的定位在紫薇属植物染色体上。本发明所述的杂交方法能有效消除背景干扰，提高检测灵敏度和准确性，可以较好的应用于紫薇属等小染色体植物的染色体检测，为紫薇属植物染色体的深入研究，提供了新的途径和方法。
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公开(公告)号：CN102564821A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201110406925.2
申请日：2011-12-08
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： G01N1/28
摘要： 本发明公开了一种梅花生长点染色体制片方法，其为选取梅花一年生枝条顶端生长点或经修剪后新发出的顶端生长点最内侧的长度为0.5～1.0cm的部分，依次进行卡诺固定液固定、前低渗处理、纤维素酶和果胶酶的酶解、后低渗处理，将处理后的顶端生长点进行火焰干燥法制片。本发明采用火焰法制片，省去预处理、解离、染色压片过程，直接固定，提高制片效率，拉长了染色体长度。此外，更重要的是，所得制片能够用于荧光原位杂交实验，同时解决了取材受限于早春的问题。
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公开(公告)号：CN102645360B
公开(公告)日：2014-05-28
申请号：CN201210111914.6
申请日：2012-04-16
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： G01N1/28
摘要： 本发明公开了一种紫微属植物茎尖生长点染色体制片方法。本发明方法选取紫薇属植物一年生枝条茎尖生长点或初冬修剪经冷藏处理的枝条水培后新发出的茎尖生长点最内侧长度为0.5～1.0cm的部分，依次经固定液(按体积比乙醇∶冰醋酸∶三氯甲烷＝5∶3∶2)固定、前低渗处理、混合酶液酶解后低渗处理，火焰干燥法制片。本发明的染色体制片方法省去预处理、解离、染色压片过程，直接固定，提高制片效率，避免预处理液及解离液对染色体的毒害作用，维持染色体原始形态，获得更好的染色体分散效果，同时扩大了紫薇属植物染色体制片的取材范围及时间。本发明方法的制片能够用于荧光原位杂交实验，为紫薇属基因组的进一步研究奠定良好基础。
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公开(公告)号：CN102564821B
公开(公告)日：2014-01-15
申请号：CN201110406925.2
申请日：2011-12-08
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： G01N1/28
摘要： 本发明公开了一种梅花生长点染色体制片方法，其为选取梅花一年生枝条顶端生长点或经修剪后新发出的顶端生长点最内侧的长度为0.5～1.0cm的部分，依次进行卡诺固定液固定、前低渗处理、纤维素酶和果胶酶的酶解、后低渗处理，将处理后的顶端生长点进行火焰干燥法制片。本发明采用火焰法制片，省去预处理、解离、染色压片过程，直接固定，提高制片效率，拉长了染色体长度。此外，更重要的是，所得制片能够用于荧光原位杂交实验，同时解决了取材受限于早春的问题。
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