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公开(公告)号：CN103937830B
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201410109952.7
申请日：2014-03-21
申请人： 北京燕京啤酒股份有限公司 , 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了一种可高效分泌表达纳豆激酶的重组菌，可显著提高纳豆激酶的产量。本发明的重组菌是含有两个拷贝以上纳豆激酶Pro-NK基因和Hac1p调控因子基因的重组巴斯德毕赤酵母菌，该重组菌在摇瓶发酵96小时后，纳豆激酶的酶活可达470IU/mL。
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公开(公告)号：CN103937830A
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201410109952.7
申请日：2014-03-21
申请人： 北京燕京啤酒股份有限公司 , 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了一种可高效分泌表达纳豆激酶的重组菌，可显著提高纳豆激酶的产量。本发明的重组菌是含有两个拷贝以上纳豆激酶Pro-NK基因和Hac1p调控因子基因的重组巴斯德毕赤酵母菌，该重组菌在摇瓶发酵96小时后，纳豆激酶的酶活可达470IU/mL。
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公开(公告)号：CN118048250A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202211434096.3
申请日：2022-11-16
申请人： 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了分泌表达葡萄糖氧化酶的工程菌。本发明提供了重组菌，为共表达葡萄糖氧化酶和分子伴侣的毕赤酵母；所述分子伴侣为如下三种中任一种：OST2蛋白、OST3蛋白和JEM1蛋白，或三种中任意两种组合，或三种中任一种或任2种与其他分子伴侣蛋白组合。本发明将多种伴侣蛋白分别与GOX共表达，结果部分伴侣蛋白能够提高GOX的酶活，各种伴侣蛋白组合过表达的策略对于提高细胞GOX分泌能力具有明显的效果，优于单独过表达伴侣蛋白的菌株。
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公开(公告)号：CN105567716A
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201410524271.7
申请日：2014-10-08
申请人： 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了1,2,4-丁三醇相关蛋白在生物法制备1,2,4-丁三醇中的应用。本发明也涉及编码该酶的核苷酸序列，被导入核苷酸序列的重组宿主以及利用重组宿主制备1,2,4-丁三醇的方法。本发明提供的酶可以催化木糖生物合成1,2,4-丁三醇途径中的关键步骤，该酶的应用显著提高了重组宿主1,2,4-丁三醇的生产能力。本发明还构建了利用木糖生产1,2,4-丁三醇能力提高的重组大肠杆菌。
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公开(公告)号：CN102719481B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201210196996.9
申请日：2012-06-14
申请人： 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了一种将多个基因同时导入微生物基因组的方法。本发明提供了制备表达多个外源基因的重组微生物的的方法，包括如下步骤：将各个基因的表达盒一起导入宿主微生物，得到将多个外源基因整合入基因组并表达所述多个外源基因的重组微生物；第一个基因的表达盒的5’端具有同源臂甲，最后一个基因的表达盒的3’端具有同源臂乙，每个基因的表达盒的3’末端和下一个基因的表达盒的5’末端具有相同的同源臂；所述同源臂甲和所述同源臂乙可与所述宿主微生物的基因组发生同源重组。通过该方法，可以将目标代谢途径所含多个基因一步导入宿主菌株中，并按所设定的顺序排列，直接获得所需要的工程菌株，避免多次转化及载体构建所带来的麻烦。
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公开(公告)号：CN104099262A
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201310120494.2
申请日：2013-04-09
申请人： 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了一种组成型表达碱性β-甘露聚糖酶的重组菌。本发明提供的一种制备重组菌B的方法，包括如下步骤：为将调控因子基因和碱性β-甘露聚糖酶编码基因表达盒导入宿主菌中，得到重组菌B；所述调控因子为Hac1p调控因子或Pdi调控因子；所述碱性β-甘露聚糖酶编码基因表达盒中的启动子为组成型启动子。本发明的实验证明，本发明构建的这些重组菌，可以无需甲醇诱导，可大量组成型分泌表达碱性β-甘露聚糖酶，且发酵周期比现有技术水平显著缩短；为工业化制备碱性β-甘露聚糖酶提供更简便的方法。
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公开(公告)号：CN101633897A
公开(公告)日：2010-01-27
申请号：CN200910091763.0
申请日：2009-08-27
申请人： 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了一种重组菌。本发明提供的重组菌是含有谷氨酰胺转胺酶前体基因和枯草杆菌蛋白酶类水解酶基因SAM-P45的重组甲醇营养型酵母菌。本发明还保护重组菌为巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GSMTGB，已于2009年8月25日保藏于中国微生物菌种保藏管委理员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：中国北京市朝阳区大屯路)，保藏号为CGMCC №.3249，其诱导发酵72h时，谷氨酰胺转胺酶的酶活达0.43u/ml。
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公开(公告)号：CN118360173A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202310057766.2
申请日：2023-01-17
申请人： 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了合成4‑磷酸赤藓糖前体和赤藓糖醇的方法。本发明提供了一种重组菌，为使毕赤酵母表达赤藓糖还原酶基因ALR和4‑磷酸赤藓糖磷酸酶基因YidA，且在所述毕赤酵母进行如下A‑B中任一的改造或2个改造组合，得到的重组菌：敲除或者抑制所述毕赤酵母中1,6‑二磷酸果糖醛缩酶编码基因FBA或1,7‑二磷酸景天庚酮糖磷酸酶编码基因SHB的表达；提高所述毕赤酵母中磷酸丙糖异构酶基因TPI的表达量。本发明的引入外源的4‑磷酸赤藓糖磷酸酶基因和赤藓糖还原酶，实现在甲醇酵母中赤藓糖醇的合成。另外，需要对其磷酸戊糖途径进行系统的改造，以显著提升赤藓糖醇等以4‑磷酸赤藓糖为前体的化合物的合成。
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公开(公告)号：CN102433267B
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201010297135.0
申请日：2010-09-29
申请人： 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了一种制备β-甘露聚糖酶的方法及专用菌株。该菌株为巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS4SMAN CGMCC NO.4095。本发明公开的重组菌含有多个拷贝的、由甲醇诱导表达的甘露聚糖酶基因。实验证明，本发明的用该重组菌进行高密度发酵生产碱性甘露聚糖酶的工艺，可使最终碱性甘露聚糖酶在84h的诱导周期内，酶活达到6336u/ml。本发明方法成本低、操作简单、产率高。因此，本发明方法在甘露聚糖酶的制备领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101633897B
公开(公告)日：2012-05-02
申请号：CN200910091763.0
申请日：2009-08-27
申请人： 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了一种重组菌。本发明提供的重组菌是含有谷氨酰胺转胺酶前体基因和枯草杆菌蛋白酶类水解酶基因SAM-P45的重组甲醇营养型酵母菌。本发明还保护重组菌为巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GSMTGB，已于2009年8月25日保藏于中国微生物菌种保藏管委理员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：中国北京市朝阳区大屯路)，保藏号为CGMCC №.3249，其诱导发酵72h时，谷氨酰胺转胺酶的酶活达0.43u/ml。
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