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公开(公告)号:CN112695018B
公开(公告)日:2022-10-25
申请号:CN201911011008.7
申请日:2019-10-23
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明公开了一种提高发酵生产谷氨酰胺转胺酶产量的方法。该方法采用茂原轮枝链霉菌(Streptoverticillium mobaraense)DSM 40587为实验菌株,斜面孢子经种子培养后,接种至添加大豆多糖的发酵培养基中发酵制备谷氨酰胺转胺酶(MTG),结果发现谷氨酰胺转胺酶的表达量显著提高。其中,添加6g/L的大豆多糖作用效果最佳。该方法的优点是使用的大豆多糖无毒无害,成本低廉,操作方便,能够提高工业生产谷氨酰胺转胺酶效率并降低经济成本。在相同实验条件下,大豆多糖的添加能使产酶时间提前27.6%及以上,显著缩短发酵时间。
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公开(公告)号:CN112708617A
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN201911021014.0
申请日:2019-10-25
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明公开了一种快速筛选高产细菌纤维素菌株的方法。该方法通过使用细菌纤维素来吸附刚果红的原理来筛选高产细菌纤维素菌株,属于微生物技术领域。所述方法包括以下步骤:产纤维素菌株经亚硝基胍NTG诱变后,用NaBr‑NaBrO3平板高通量初筛,动态发酵后进一步用刚果红吸附法进行高通量筛选后,三角瓶发酵复筛,筛选得到高产菌株。本方法与常用的通过测定纤维素的干重测定方法来筛选高产菌株的效率不同,大大提高了高产菌株的筛选效率。
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公开(公告)号:CN112695018A
公开(公告)日:2021-04-23
申请号:CN201911011008.7
申请日:2019-10-23
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明公开了一种提高发酵生产谷氨酰胺转胺酶产量的方法。该方法采用茂原轮枝链霉菌(Streptoverticillium mobaraense)DSM 40587为实验菌株,斜面孢子经种子培养后,接种至添加大豆多糖的发酵培养基中发酵制备谷氨酰胺转胺酶(MTG),结果发现谷氨酰胺转胺酶的表达量显著提高。其中,添加6g/L的大豆多糖作用效果最佳。该方法的优点是使用的大豆多糖无毒无害,成本低廉,操作方便,能够提高工业生产谷氨酰胺转胺酶效率并降低经济成本。在相同实验条件下,大豆多糖的添加能使产酶时间提前27.6%及以上,显著缩短发酵时间。
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公开(公告)号:CN111650301A
公开(公告)日:2020-09-11
申请号:CN202010552596.1
申请日:2020-06-17
Applicant: 普研(上海)标准技术服务股份有限公司 , 华东师范大学
Abstract: 本发明提供了一种阿扎胞苷含量的测定分析方法,具体为:1、提取样品中阿扎胞苷:A、称取样品加入相应内标物,盐酸提取,超声波震荡至样品和溶液混匀;B、将得到的混合物高速离心分离得上清液;C、将上清液通过固相萃取柱富集净化收集洗脱净化溶液,氮气浓缩吹干,乙腈水复溶,供测试;2、标准工作溶液的配制:用乙腈水溶液配制成设定浓度的阿扎胞苷标准储备液,再稀释成浓度为五种不同浓度的阿扎胞苷标准工作溶液,并使各标品内标浓度一致;3、用液相色谱串联质谱仪检测,将阿扎胞苷标准工作溶液和待测样品分析液,经自动进样器注入液相色谱串联质谱仪分析系统,样品溶液经色谱柱分离,质谱多反应监测模式进行检测。
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公开(公告)号:CN103820412B
公开(公告)日:2016-05-04
申请号:CN201410035723.5
申请日:2014-01-24
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明公开了一种新型手术用止血产品及其制备方法和应用,该产品包含添加了所述的微生物谷氨酰胺转胺酶(mT6)的基质,其中所述谷氨酰胺转胺酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所述的基因编码的蛋白序列,或具有如SEQ ID NO:4所述的蛋白序列。更具体地,该止血产品选自止血剂、止血装置、止血急救包或常见的止血制品,并且所述基质为人体可吸收的流体或半固体形态,或可塑性的胶状或胶体形态。其含有微生物谷氨酰胺转胺酶和明胶。本发明具有快速止血、使用方便、防器官黏连、促进伤口愈合、毒副作用低、吸收完全等优势,能够用于临床手术创伤用快速止血、避免器官粘连、易吸收、不易传播疾病、成本低廉的医用止血材料或产品。
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公开(公告)号:CN103816562A
公开(公告)日:2014-05-28
申请号:CN201410035698.0
申请日:2014-01-24
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明公开了一种战争创伤快速止血产品及其制备方法和应用,该产品包含添加了所述的微生物谷氨酰胺转胺酶(mTG)的基质,其中所述谷氨酰胺转胺酶的氨基酸序列具有如SEQ?ID?NO:3所述的基因编码的蛋白序列,或具有如SEQ?ID?NO:4所述的蛋白序列。更具体地,该止血产品选自止血剂、止血装置、止血急救包或常见的止血制品,并且所述基质为人体可吸收的流体或半固体形态,或可塑性的胶状或胶体形态。其含有微生物谷氨酰胺转胺酶和明胶。本发明具有快速止血、使用方便、防器官黏连、促进伤口愈合、毒副作用低、吸收完全等优势,除了用于战争止血外,还可广泛用于消防、安全事故等野外环境的创伤快速止血。
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公开(公告)号:CN102776160A
公开(公告)日:2012-11-14
申请号:CN201210276705.7
申请日:2012-08-06
Applicant: 华东师范大学
IPC: C12N9/10
Abstract: 本发明公开一种微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法,是在链霉菌发酵液中加入50-200mg/L的分散酶处理,经乙醇沉淀、阴离子交换层析、阳离子交换层析,再经脱盐、浓缩、过滤、冻干后得到所述微生物谷氨酰胺转胺酶;其中,所述微生物谷氨酰胺转胺酶的纯度大于95%,比活力为20000-50000U/g。本发明工艺简单,可从微生物发酵产物中获得高纯度的谷氨酰胺转胺酶,酶的得率在70%以上。
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公开(公告)号:CN102727929A
公开(公告)日:2012-10-17
申请号:CN201210192240.7
申请日:2012-06-12
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明公开了一种止血剂,包括明胶、微生物谷氨酰胺转胺酶酶原以及所述微生物谷氨酰胺转胺酶酶原的激活剂;所述明胶、微生物谷氨酰胺转胺酶酶原和激活剂的比例为100000:1~200:1~100。本发明还公开了该止血剂的制备方法及应用。本发明止血剂具有更好稳定性和止血效果,其安全性和可靠性增强。
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公开(公告)号:CN100523172C
公开(公告)日:2009-08-05
申请号:CN200410018543.2
申请日:2004-05-21
Applicant: 华东师范大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/12 , C12N15/16 , C12N15/63 , C12N15/70 , C12N15/72 , C12P21/02 , A61K38/17 , A61K38/32 , A61P37/02 , A61P35/00 , A61P31/18
Abstract: 一种高效表达人α1-胸腺肽的基因工程菌及其构建方法和应用,属于生物工程技术领域。该基因工程菌为大肠杆菌DH5α或BLR(DE3),其携带的质粒中含有n个表达人α1-胸腺肽的基因,其中,n为1到16的整数,质粒的启动子为IPTG诱导启动子Lac,如质粒pET系列。在DNA水平上,将含有人α1-胸腺肽基因的DNA序列串联为多串体,构建成一系列表达载体,转化大肠杆菌,获得一系列高效表达人α1-胸腺肽的基因工程菌。用该基因工程菌可批量制备人α1-胸腺肽样品。本发明的优点在于,用本发明构建的基因工程菌生产人α1-胸腺肽样品,产量高,纯化工艺简单,生产成本低。
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公开(公告)号:CN1982336A
公开(公告)日:2007-06-20
申请号:CN200610024355.X
申请日:2006-03-03
Applicant: 华东师范大学
IPC: C07K14/605 , C12P21/02 , C12N15/09 , A61K38/26 , A61P3/10
Abstract: 一种具有人胰高血糖素样肽-1活性的人胰高血糖素样肽-1衍生物及其制备和应用,属于生物工程技术领域。该衍生物的分子结构式为以下的三种结构式:GLP-1(7-37)-Xaa38(Seq ID No.2),GLP-1(7-37)-Xaa38-Xaa39(Seq ID No.3)和GLP-1(7-37)-Xaa38-Xaa39-Xaa40(Seq ID No.4)之一,其中Xaa38,Xaa39和Xaa40分别是Cys,Ala,Gly,His,Ser和Thr中的任何一个氨基酸。采用DNA重组技术制备该衍生物。该衍生物具有长于GLP-1的半衰期;通过DNA重组技术制备,易于纯化,收率高,成本较低,特别适于在制备治疗糖尿病的药物中作该药物的活性成分。
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