7β‑羟基甾醇脱氢酶突变体及其在熊脱氧胆酸合成中的应用

    公开(公告)号:CN107099516A

    公开(公告)日:2017-08-29

    申请号:CN201710413074.1

    申请日:2017-06-05

    IPC分类号: C12N9/04 C12N15/53 C12P33/00

    摘要: 本发明公开了一种通过分子进化获得的活性和稳定性提高的7β‑羟基甾醇脱氢酶突变体、含有7β‑羟基甾醇脱氢酶突变基因的重组表达质粒及重组表达转化子、重组突变体酶制剂的制备方法,以及该重组突变体酶制剂在熊脱氧胆酸合成中的应用。本发明的7β‑羟基甾醇脱氢酶具有出色的活性和热稳定性,可以高效催化7‑羰基石胆酸不对称还原制备熊脱氧胆酸;将本发明所述的7β‑羟基甾醇脱氢酶固定化后与固定化7α‑羟基甾醇脱氢酶酶法耦联,可以直接催化廉价底物鹅脱氧胆酸的差向异构,连续转化制备熊脱氧胆酸,操作简便。与现有报道相比,本发明的羟基甾醇脱氢酶催化制备熊脱氧胆酸,具有底物浓度高、反应时间短、反应完全,产品纯度高的优势,有很强的工业应用前景。

    油酸水合酶突变体及其在制备10-羟基硬脂酸中的应用

    公开(公告)号:CN112226428A

    公开(公告)日:2021-01-15

    申请号:CN202011182795.4

    申请日:2020-10-29

    IPC分类号: C12N9/88 C12N15/60 C12P7/64

    摘要: 本发明涉及油酸水合酶突变体及其在制备10‑羟基硬脂酸中的应用,公开了一种活性及稳定性显著提高的油酸水合酶突变体,其编码基因和氨基酸序列,含有该基因序列的重组表达载体和重组表达转化体,重组油酸水合酶突变体催化剂,以及该油酸水合酶突变体或重组油酸水合酶突变体催化剂在催化油酸转化制备10‑羟基硬脂酸与10‑羰基硬脂酸中的实际应用。与现有技术相比,本发明的油酸水合酶突变体具有显著高的活性和稳定性,从而极大地减少了催化剂的用量,并且在10‑羰基硬脂酸的酶法氧化制备过程中,使用廉价的双氧水作为氧化剂,成本低,绿色环保,在10‑羰基硬脂酸的生产中将具有很好的应用前景。

    一株谷氨酰胺转氨酶高产诱变菌株及其应用

    公开(公告)号:CN107384820B

    公开(公告)日:2020-04-07

    申请号:CN201710614341.1

    申请日:2017-07-25

    IPC分类号: C12N1/20 C12N9/10 C12R1/465

    摘要: 本发明公开了一株谷氨酰胺转氨酶高产诱变菌株,即茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)CGMCC 14389及其应用。本发明茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)CGMCC 14389是由茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)ECU7480出发,采用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术,经过多轮迭代诱变,筛选获得。该菌株发酵生产谷氨酰胺转氨酶的产量高,达20.6U/mL。对该菌株发酵表达的谷氨酰胺转氨酶进行了序列测定以及活性测定,与出发菌株相比,茂原链霉菌CGMCC 14389表达的谷氨酰胺转氨酶有三个氨基酸位点突变,酶的比活力提高了6.5倍,为26.2U/mg蛋白。