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公开(公告)号：CN102796708A
公开(公告)日：2012-11-28
申请号：CN201110137242.1
申请日：2011-05-25
申请人： 华中农业大学 , 武汉科前动物生物制品有限责任公司
摘要： 本发明属于动物传染病技术领域，具体涉及一种甲型H1流感病毒的分离鉴定及该病毒在MDCK细胞上稳定增殖的方法。本发明通过分离鉴定得到一株甲型H1流感病毒A-Influ/JML-F9，其保藏编号为CCTCC NO：V201105。通过优选方法、培养基及培养条件将该甲型H1流感病毒在MDCK细胞上的稳定增殖，大规模增殖该病毒的平均血凝效价达到7log2，其最高血凝效价达到9log2。
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公开(公告)号：CN102732487B
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201210193365.1
申请日：2012-06-13
申请人： 武汉科前动物生物制品有限责任公司 , 华中农业大学 , 中国兽医药品监察所
摘要： 本发明一种生物反应器大规模培养的方法，其步骤：（1）重组H5N1禽流感病毒在MDCK细胞上适应；（2）病毒株作为反应器大规模培养病毒种子批制备，种子批病毒代次≥F6；血凝效价≥28；EID50≥107.5；（3）以聚酯片为载体培养MDCK细胞，以聚酯片为载体，反应器为篮式固定床，每克载体投放细胞；培养基为新生牛血清DMEM；（4）培养的MDCK细胞接种病毒，病毒稀释液清洗细胞，病毒接种；吸附后更换细胞维持液；（5）MDCK细胞维持和病毒增殖，搅拌，更换细胞维持液；（6）监测血凝效价收获病毒，收获反应器培养体积病毒液。方法易行，操作简便，适应后病毒HA效价>27，解决了目前重组H5亚型禽流感病毒在MDCK细胞上培养病毒滴度不能满足疫苗生产的难题。
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公开(公告)号：CN102732487A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201210193365.1
申请日：2012-06-13
申请人： 武汉科前动物生物制品有限责任公司 , 华中农业大学 , 中国兽医药品监察所
摘要： 本发明一种生物反应器大规模培养的方法,其步骤:（1）重组H5N1禽流感病毒在MDCK细胞上适应；（2）病毒株作为反应器大规模培养病毒种子批制备，种子批病毒代次≥F6；血凝效价≥28；EID50≥107.5；（3）以聚酯片为载体培养MDCK细胞，以聚酯片为载体，反应器为篮式固定床，每克载体投放细胞；培养基为新生牛血清DMEM；（4）培养的MDCK细胞接种病毒，病毒稀释液清洗细胞，病毒接种；吸附后更换细胞维持液；（5）MDCK细胞维持和病毒增殖，搅拌，更换细胞维持液；（6）监测血凝效价收获病毒，收获反应器培养体积病毒液。方法易行，操作简便，适应后病毒HA效价>27，解决了目前重组H5亚型禽流感病毒在MDCK细胞上培养病毒滴度不能满足疫苗生产的难题。
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公开(公告)号：CN118389749A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410489690.5
申请日：2024-04-23
申请人： 华中农业大学 , 武汉科前生物股份有限公司
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种用于检测禽呼吸道重要病毒的4重荧光RT‑PCR引物组合及其试剂盒，所述4重荧光RT‑PCR引物组合包括检测禽流感病毒的引物和探针组合、检测新城疫病毒强毒的引物和探针组合、检测鸡传染性支气管炎病毒的引物和探针组合和检测鸡传染性喉气管炎病毒的引物和探针组合；本发明提供的4重荧光定量RT‑PCR检测方法覆盖广，特异性强，与传统的PCR检测方法和血凝试验等方法相比，操作简便，通量高，且具有更好的特异性和敏感性，因此在检测方法中囊括了特异性检测新城疫强毒株核酸的方法，省去了新城疫病毒感染样品扩增和测序的过程，给临床的诊断提供了便捷的工具。
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公开(公告)号：CN104560888A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201310496992.7
申请日：2013-10-21
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明公开了一种H9N2亚型禽流感病毒的大规模培养方法，本方法中H9N2病毒在MDCK适应快速，适应后病毒HA效价为28；以7.5L反应器为种细胞罐，cytodex1为载体培养MDCK细胞为种子细胞，放大到40L固定床篮式搅拌系统反应器的大规模培养，收获血凝效价（HA）可以达到210H9N2病毒80L。本方法生产的病毒效价高、产量大，方法易于标准化，适用于所有的H9亚型流感病毒，解决了目前H9N2禽流感病毒在MDCK细胞上培养病毒滴度不能满足疫苗生产的难题。
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