公开(公告)号：CN102747045B

公开(公告)日：2013-12-18

申请号：CN201110097884.3

申请日：2011-04-19

申请人： 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

发明人： 金梅林 ,  杨影 ,  陈焕春 ,  徐高原 ,  郭学波 ,  张安定 ,  周红波 ,  陈章表

IPC分类号： C12N7/00 ,  A61K39/145 ,  A61P31/16 ,  C12R1/93

摘要： 本发明属于动物病毒学技术领域，具体涉及一种分离的猪流感H1N1亚型灭活疫苗株，其制备方法与应用。所述的疫苗株是H1N1亚型猪流感病毒(swine influenza virus)H1H1 SIVTJ，该病毒株保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，其保藏号为：CCTCC NO：V201107。本发明制备的灭活疫苗经试验证明具有良好的安全性，免疫保护效果达到80％以上。

公开(公告)号：CN102533577B

公开(公告)日：2013-10-02

申请号：CN201010595828.8

申请日：2010-12-14

申请人： 武汉科前动物生物制品有限责任公司 ,  华中农业大学

发明人： 陈关平 ,  陈守文 ,  何伟 ,  金梅林 ,  冀志霞 ,  徐高原 ,  陈波 ,  韩进 ,  尹争艳 ,  康超 ,  曹毅 ,  顾伟 ,  陈焕春

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12R1/46

摘要： 本发明属于农业微生物技术领域，具体涉及一种猪链球菌2型高密度发酵培养基及应用。其特征在于，按重量体积比计的组分及配比如下：胰蛋白胨0.1％～5.0％，酵母粉0.1％～5.0％，醋酸铵0.01％～2.0％，MgSO4·7H2O 0.01％～2％、K2HPO4·3H2O 0.1％～4.0％、KH2PO4 0.01％～1％、葡萄糖0.01％～2.0％；按体积比的牛血清为1％～15％，灭菌前调培养基的pH至7.4～7.8。本发明有利于猪链球菌2型生长代谢，菌体生长速度快，能获得较高菌量，培养猪链球菌2型活菌数可达到85亿。本发明的培养基原材料来源广泛，成本低廉，可有效扩增猪链球菌2型，能满足大规模生产猪链球菌2型疫苗的需要。

公开(公告)号：CN103018442A

公开(公告)日：2013-04-03

申请号：CN201110286912.6

申请日：2011-09-23

申请人： 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

发明人： 何启盖 ,  马丰英 ,  李燕 ,  库旭钢 ,  邹浩勇 ,  陈焕春 ,  郭爱珍 ,  徐高原

IPC分类号： G01N33/569 ,  G01N33/531

摘要： 本发明属于动物病毒学与动物传染病学检测技术领域，具体涉及一种猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。本发明通过基因工程重组技术得到两株表达猪肺炎支原体p46蛋白和p65蛋白的重组的大肠杆菌pGEX-KG-46和pGEX-KG-65。本发明的试剂盒包括以突变后猪肺炎支原体膜蛋白P46和P65基因表达蛋白共同作为抗原包被的酶标板和其他核心试剂。本发明公开了猪肺炎支原体膜蛋白P46和P65基因的克隆，定点突变以及P46和P65蛋白的表达及纯化方法。还公开了猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法。本发明制备的间接ELISA抗体检测试剂盒可用于猪肺炎支原体抗体的临床大规模检测和流行病学调查，具有广阔的市场前景。

公开(公告)号：CN102796708A

公开(公告)日：2012-11-28

申请号：CN201110137242.1

申请日：2011-05-25

申请人： 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

发明人： 金梅林 ,  杨影 ,  陈焕春 ,  徐高原 ,  李国红 ,  郭学波 ,  张安定 ,  周红波 ,  陈章表

IPC分类号： C12N7/00 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

摘要： 本发明属于动物传染病技术领域，具体涉及一种甲型H1流感病毒的分离鉴定及该病毒在MDCK细胞上稳定增殖的方法。本发明通过分离鉴定得到一株甲型H1流感病毒A-Influ/JML-F9，其保藏编号为CCTCC NO：V201105。通过优选方法、培养基及培养条件将该甲型H1流感病毒在MDCK细胞上的稳定增殖，大规模增殖该病毒的平均血凝效价达到7log2，其最高血凝效价达到9log2。

公开(公告)号：CN102759619A

公开(公告)日：2012-10-31

申请号：CN201210245250.2

申请日：2012-07-16

申请人： 武汉科前动物生物制品有限责任公司 ,  华中农业大学

发明人： 康超 ,  金梅林 ,  徐高原 ,  郭学波 ,  董晓晖 ,  肖圣建

IPC分类号： G01N33/545

摘要： 本发明公开了一种猪链球菌2型荚膜多糖抗体的酶联免疫试剂盒及应用，所述的试剂盒还包括抗原酶标板、稀释液A、脱脂奶粉、阳性对照、阴性对照、洗涤液、羊抗猪酶标二抗、显色液A、显色液B、终止液；抗原酶标板是以猪链球菌2型荚膜多糖作为抗原；阳性对照为猪链球菌2型菌免疫过的猪阳性对照血清；洗涤液含有Tween-20的PBS缓冲液；终止液含有氢氟酸溶液；显色液A含有过氧化氢脲的柠檬酸盐缓冲液，显色液B液含TMBpH5.0的柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液；稀释液A含有Tween-20的PBS缓冲液。试剂盒在检测猪链球菌2型荚膜多糖抗体的酶联免疫中的应用。猪链球菌2型荚膜多糖的使用，特异性好，灵敏度高。检测时间短，一般2个小时内即可出结果。

公开(公告)号：CN102732473B

公开(公告)日：2017-03-15

申请号：CN201110087938.8

申请日：2011-04-08

申请人： 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

发明人： 何启盖 ,  马丰英 ,  邹浩勇 ,  陈焕春 ,  郭爱珍 ,  徐高原 ,  吴斌 ,  张灏

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12R1/42 ,  C12R1/35

摘要： 本发明属于动物细菌基因工程技术领域，具体涉及一种不含抗性标记表达猪肺炎支原体主要免疫原性膜蛋白的重组猪霍乱沙门氏菌的构建、疫苗制备及应用。本发明得到一株不含抗性标记表达猪肺炎支原体p46蛋白的猪霍乱沙门氏菌C500(pYA-46)，其保藏号为CCTCC NO：M2011106，该重组株缺失了猪霍乱沙门氏菌生长所必需的asd基因，含有能在该重组株中表达asd基因和猪肺炎支原体p46蛋白的质粒。本发明还公开了该重组株制备猪霍乱沙门氏菌和猪支原体肺炎疫苗的方法及其应用。本发明制备的二价疫苗可刺激猪产生抵抗猪霍乱沙门氏菌和猪肺

公开(公告)号：CN103013895B

公开(公告)日：2014-07-16

申请号：CN201110286965.8

申请日：2011-09-23

申请人： 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

发明人： 何启盖 ,  徐丽丽 ,  库旭钢 ,  李燕 ,  李娜娜 ,  张坤 ,  陈焕春 ,  郭爱珍 ,  徐高原

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/50 ,  C12N15/63 ,  A61K39/295 ,  A61P31/04 ,  A61P31/14 ,  C12R1/42 ,  A61K39/112 ,  A61K39/215

摘要： 本发明属于动物细菌基因工程技术领域，具体涉及一种不含抗性标记的表达猪流行性腹泻病毒主要抗原位点的重组的猪霍乱沙门氏菌菌株C501-COE和C501-SD的构建、疫苗制备及应用。本发明得到一种不含抗性标记的表达猪流行性腹泻病毒主要抗原位点的重组猪霍乱沙门氏菌C501-COE和C501-SD，其保藏号分别为CCTCC NO：M2011296；CCTCC NO：M2011297，这两株重组菌株缺失了猪霍乱沙门氏菌生长所必需的asd基因，并含有能够在该菌株中表达asd基因和猪流行性腹泻病毒COE基因片段、SD基因片段的质粒。还公开了利用该重组菌制备猪霍乱沙门氏菌和猪流行性腹泻疫苗的方法及应用。本发明的疫苗可以刺激猪产生抵抗猪霍乱沙门氏菌和猪流行性腹泻病毒的保护性免疫反应，有效防止猪霍乱沙门氏菌和猪流行性腹泻病毒的感染。

公开(公告)号：CN102949714B

公开(公告)日：2014-03-26

申请号：CN201110376199.4

申请日：2011-11-23

申请人： 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

发明人： 金梅林 ,  康超 ,  陈波 ,  尹珍艳 ,  徐高原 ,  陈关平 ,  滑亚峰 ,  陈章表

IPC分类号： A61K39/09 ,  A61P31/04

摘要： 本发明属于动物疫苗制备技术领域，具体涉及一种马链球菌兽疫亚种、猪链球菌2型、猪链球菌7型的三价灭活疫苗及制备方法与应用。本发明的灭活疫苗主要适用于母猪，公猪及仔猪对猪链球菌病的防治。本发明公开了三株专用于制备猪链球菌病三价灭活疫苗的菌株的分离、鉴定及应用，三株疫苗菌株分别为猪链球菌2-LT株(保藏号为CCTCC NO：M2011282)；猪链球菌7-YZ株(保藏号为CCTCC NO：M2011160)和马链球菌兽疫亚种XS株(保藏号为CCTCC NO：M2011405)。本发明的灭活疫苗能够达到“一针多防”的效果，减少猪只应激，且灭活疫苗安全可靠，不存在散毒的隐患。

公开(公告)号：CN101838627A

公开(公告)日：2010-09-22

申请号：CN200910273372.0

申请日：2009-12-25

申请人： 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

发明人： 何启盖 ,  库旭钢 ,  陈冬焕 ,  徐高原 ,  陈焕春 ,  金梅林

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/34 ,  C12N15/74 ,  A61K39/295 ,  A61K39/12 ,  A61K39/112 ,  A61P31/04 ,  A61P31/20 ,  C12R1/42

摘要： 本发明属于动物细菌基因工程技术领域，具体涉及一种不含抗性标记的表达猪II型圆环病毒主要抗原Cap蛋白的重组猪霍乱沙门氏菌株的构建、二价基因工程疫苗及其制备方法与应用。本发明得到一株不含抗性标记的表达猪II型圆环病毒主要抗原位点的重组猪霍乱沙门氏菌C501(pYA-Δ41ORF2)，其保藏号为CCTCC M209314。该株缺失了猪霍乱沙门氏菌生长必需的asd基因，并含有能在该株中表达asd基因和猪II型圆环病毒Cap蛋白抗原位点基因的质粒。公开了利用该重组株制备猪霍乱沙门氏菌和猪II型圆环病毒二价基因工程疫苗的方法及应用。本发明的二价基因工程疫苗可以刺激猪产生抵抗猪霍乱沙门氏菌和猪II型圆环病毒的保护性免疫反应，有效防止猪霍乱沙门氏菌和猪II型圆环病毒的感染。

公开(公告)号：CN102732487B

公开(公告)日：2014-03-26

申请号：CN201210193365.1

申请日：2012-06-13

申请人： 武汉科前动物生物制品有限责任公司 ,  华中农业大学 ,  中国兽医药品监察所

发明人： 金梅林 ,  李国红 ,  蒋桃珍 ,  徐高原 ,  李俊平 ,  周明光 ,  洪灯 ,  左静 ,  涂加刚 ,  邸海波 ,  韦大坤 ,  徐玲莉 ,  陈焕春

IPC分类号： C12N7/00 ,  C12R1/93

摘要： 本发明一种生物反应器大规模培养的方法，其步骤：（1）重组H5N1禽流感病毒在MDCK细胞上适应；（2）病毒株作为反应器大规模培养病毒种子批制备，种子批病毒代次≥F6；血凝效价≥28；EID50≥107.5；（3）以聚酯片为载体培养MDCK细胞，以聚酯片为载体，反应器为篮式固定床，每克载体投放细胞；培养基为新生牛血清DMEM；（4）培养的MDCK细胞接种病毒，病毒稀释液清洗细胞，病毒接种；吸附后更换细胞维持液；（5）MDCK细胞维持和病毒增殖，搅拌，更换细胞维持液；（6）监测血凝效价收获病毒，收获反应器培养体积病毒液。方法易行，操作简便，适应后病毒HA效价>27，解决了目前重组H5亚型禽流感病毒在MDCK细胞上培养病毒滴度不能满足疫苗生产的难题。