公开(公告)号：CN108220214A

公开(公告)日：2018-06-29

申请号：CN201711444595.X

申请日：2017-12-27

申请人： 华南农业大学

发明人： 焦培荣 ,  廖明 ,  吴斯宇 ,  黄鉴妮 ,  冯赛祥 ,  何婉婷

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/21 ,  C07K14/56

CPC分类号： C07K14/56 ,  C12N15/70 ,  C12N2800/22

摘要： 本发明公开了一种高效表达重组鸡α干扰素的工程菌，其获得包括以下步骤：S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对Genebank中发表的鸡α干扰素基因序列进行密码子优化合成；S2、根据优化后的鸡α干扰素基因，设计特异性引物；S3、将鸡α干扰素基因PCR扩增；PCR产物经EcoRI、HindIII双酶切克隆到原核表达载体pET‑41a；S4、将测序正确的pET‑41a‑ChIFN‑α重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞；S5、重组鸡α干扰素的原核表达及抗病毒活性测定。本发明公开的工程菌可以实现鸡α干扰素的高效表达，获得的鸡α干扰素抗病毒活性达到1.71×107UI/mg。

公开(公告)号：CN106939042B

公开(公告)日：2020-12-15

申请号：CN201710045372.X

申请日：2017-01-19

申请人： 华南农业大学 ,  北京利昂盛生物技术有限公司

发明人： 廖明 ,  孙俭波 ,  焦培荣 ,  古明珠 ,  白大勇 ,  孙超 ,  廖想 ,  吴斯宇 ,  崔进 ,  冯赛祥 ,  徐成刚

IPC分类号： C07K14/56 ,  C12N15/21 ,  A61K38/21 ,  A61P31/12 ,  A61P35/00 ,  A61P37/04 ,  C12N15/70

摘要： 本发明提供一种猪α干扰素及其应用，依据大肠杆菌原核表达系统密码子的偏嗜性，选择高表达密码子设计合成一种猪α干扰素，其氨基酸序列序列如SEQ ID NO.1所示，编码其的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明制备猪α干扰素的方法简单，成本低，易于工业化生产，猪α干扰素表达量高，包涵体处理过程中变性彻底，复性蛋白得率高，本发明制得的猪α干扰素效价高，能够抑制100TCID50的水泡性口炎病毒，比活性高达108，具有较好的生物学活性功能，可用于制备预防和治疗猪的病毒感染类疾病和增强免疫功能的药物，具备广阔的市场应用前景。

公开(公告)号：CN106399321A

公开(公告)日：2017-02-15

申请号：CN201610743781.2

申请日：2016-08-27

申请人： 华南农业大学 ,  北京利昂盛生物技术有限公司

发明人： 廖明 ,  焦培荣 ,  吴斯宇 ,  冯赛祥 ,  孙超 ,  孙俭波 ,  廖想

IPC分类号： C12N15/21 ,  C12N15/70 ,  C07K14/56

摘要： 本发明公开了一种制备融合表达重组鸡α干扰素的生产工艺，其包括以下步骤：S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对Genebank中发表的鸡α干扰素基因序列进行密码子优化，人工合成该鸡α干扰素基因；S2、根据密码子优化后的鸡α干扰素基因，设计三条特异性的引物；S3、构建含ProS2促溶标签的重组鸡α干扰素质粒；S4、重组表达质粒的转化和鉴定；S5、重组鸡α干扰素的诱导表达；S6、表达产物的提取与蛋白复性纯化：S61、包涵体的提取与处理；S62、包涵体变性；S63、变性液复性；S64、镍柱亲和纯化。本发明通过细胞病变抑制法测出了该干扰素具有抑制水泡口炎病毒繁殖的活性，活性单位达到7.32×107UI/mg。

公开(公告)号：CN118307668A

公开(公告)日：2024-07-09

申请号：CN202410511336.8

申请日：2024-04-26

申请人： 华南农业大学 ,  广东省农业科学院农业生物基因研究中心

发明人： 温珍玉 ,  余界石 ,  廖明 ,  胡万可 ,  吴斯宇 ,  魏文康 ,  刘莎莎 ,  罗帝洲

IPC分类号： C07K16/10 ,  C07K16/06 ,  C12N15/70 ,  C12N15/44 ,  G01N33/569 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及抗体制备领域，特别是涉及一种丁型流感病毒核蛋白的多克隆抗体及其制备方法和应用。该多克隆抗体的抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。同时本发明还提供了利用该抗原免疫动物，并对所得血清进行纯化，得到多克隆抗体的方法。该多克隆抗体能够有效识别特异性抗原，可以为丁型流感病毒的鉴定以及其病毒生物学功能和致病机制研究提供技术支持。同时该多克隆抗体具有成本低、效价高和特异性好的优势，可以有效运用于丁型流感病毒的病原检测和鉴定方面。

公开(公告)号：CN107663523A

公开(公告)日：2018-02-06

申请号：CN201710940335.5

申请日：2017-09-30

申请人： 华南农业大学

发明人： 焦培荣 ,  欧阳国文 ,  廖明 ,  吴斯宇 ,  王念晨 ,  张友

IPC分类号： C12N15/21 ,  C12N15/79 ,  A61K38/21 ,  A61P37/04

CPC分类号： C07K14/56 ,  A61K38/00

摘要： 本发明公开了一种优化的鸡α干扰素基因真核表达重组质粒及其制备方法与应用。具体是将优化的鸡α干扰素基因与真核表达载体连接构建得到所述重组质粒；所述优化的鸡α干扰素基因序列（序列如SEQ ID NO.4所示）。本发明构建得到的优化的鸡α干扰素基因真核表达重组质粒可以在细胞内成功表达鸡α干扰素蛋白，可以增强禽类体内细胞和体液免疫反应；作为免疫增强剂使用，安全性和稳定性更高，且运输方便、使用简便、成本低，毒副反应更低，具有很好的推广应用前景。

公开(公告)号：CN106939042A

公开(公告)日：2017-07-11

申请号：CN201710045372.X

申请日：2017-01-19

申请人： 华南农业大学 ,  北京利昂盛生物技术有限公司

发明人： 廖明 ,  孙俭波 ,  焦培荣 ,  古明珠 ,  白大勇 ,  孙超 ,  廖想 ,  吴斯宇 ,  崔进 ,  冯赛祥 ,  徐成刚

IPC分类号： C07K14/56 ,  C12N15/21 ,  A61K38/21 ,  A61P31/12 ,  A61P35/00 ,  A61P37/04 ,  C12N15/70

摘要： 本发明提供一种猪α干扰素及其应用，依据大肠杆菌原核表达系统密码子的偏嗜性，选择高表达密码子设计合成一种猪α干扰素，其氨基酸序列序列如SEQ ID NO.1所示，编码其的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明制备猪α干扰素的方法简单，成本低，易于工业化生产，猪α干扰素表达量高，包涵体处理过程中变性彻底，复性蛋白得率高，本发明制得的猪α干扰素效价高，能够抑制100TCID50的水泡性口炎病毒，比活性高达108，具有较好的生物学活性功能，可用于制备预防和治疗猪的病毒感染类疾病和增强免疫功能的药物，具备广阔的市场应用前景。

公开(公告)号：CN106399322A

公开(公告)日：2017-02-15

申请号：CN201610743783.1

申请日：2016-08-27

申请人： 华南农业大学 ,  北京利昂盛生物技术有限公司

发明人： 焦培荣 ,  廖明 ,  冯赛祥 ,  吴斯宇 ,  孙超 ,  孙俭波 ,  廖想

IPC分类号： C12N15/22 ,  C07K14/565 ,  C12N15/70 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/22 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种鸡β干扰素优化基因及重组鸡β干扰素的生产工艺，包括以下步骤：S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对NCBI中已发表的鸡β干扰素基因进行密码子优化，人工合成优化后鸡β干扰素基因；S2、设计引物：根据密码子优化后的干扰素基因，设计1对引物；S3、重组表达质粒的构建；S4、重组表达质粒的转化和鉴定；S5、重组表达质粒在大肠杆菌中的诱导表达；S6、表达产物的提取与蛋白复性纯化：S61、包涵体的提取与处理；S62、包涵体变性；S63、变性液复性；S64、镍柱亲和纯化。本发明通过原核表达的方式表达并纯化出了重组鸡β干扰素蛋白，并通过细胞病变抑制法测出了该干扰素的具有抑制水泡口炎病毒繁殖的活性，活性单位达到2.73×106UI/mg。