一种基于CRISPR/Cas12a和恒温扩增的DENV一步法核酸检测方法

    公开(公告)号:CN113234856B

    公开(公告)日:2024-02-20

    申请号:CN202110458729.3

    申请日:2021-04-27

    Abstract: 本发明公开一种基于CRISPR/Cas12a和恒温扩增的DENV一步法核酸检测方法,属于生物技术领域。本发明设计的crRNA与DENV‑1靶序列的识别结合具有高度特异性,有效保证检测结果的准确性。本发明设计的crRNA不受PAM序列的限制,只能特异性识别剪切单链DNA,而不能剪切双链DNA,因此Cas12a蛋白不会消耗用于扩增的模板,扩增与Cas12a‑crRNA检测可在同一体系同时进行,实现了高灵敏度。本发明只需要常温下40min便可通过试纸条显色或荧光强度读取检测结果,检测时间短,不需要昂贵、复杂的控温仪器,只需要一个恒温装置和荧光检测设备便可完成检测反应,检测成本低。

    一种基于CRISPR/Cas12a和恒温扩增的DENV一步法核酸检测方法

    公开(公告)号:CN113234856A

    公开(公告)日:2021-08-10

    申请号:CN202110458729.3

    申请日:2021-04-27

    Abstract: 本发明公开一种基于CRISPR/Cas12a和恒温扩增的DENV一步法核酸检测方法,属于生物技术领域。本发明设计的crRNA与DENV‑1靶序列的识别结合具有高度特异性,有效保证检测结果的准确性。本发明设计的crRNA不受PAM序列的限制,只能特异性识别剪切单链DNA,而不能剪切双链DNA,因此Cas12a蛋白不会消耗用于扩增的模板,扩增与Cas12a‑crRNA检测可在同一体系同时进行,实现了高灵敏度。本发明只需要常温下40min便可通过试纸条显色或荧光强度读取检测结果,检测时间短,不需要昂贵、复杂的控温仪器,只需要一个恒温装置和荧光检测设备便可完成检测反应,检测成本低。

    一种基于单管PRA-CRISPR/Cas12a的现场便携式检测装置

    公开(公告)号:CN220183277U

    公开(公告)日:2023-12-15

    申请号:CN202320240661.6

    申请日:2023-02-17

    Abstract: 本实用新型公开了一种基于单管PRA‑CRISPR/Cas12a的现场便携式检测装置。该装置包括带有盖子的壳体、阵列载样板、彩色玻璃滤光片、硅胶加热箱、阵列LED蓝光灯、恒温控制器和蓄电池;所述盖子设置于壳体的顶面;所述的阵列载样板设置于壳体的顶面中部;所述的彩色玻璃滤光片设置于壳体壁上;所述的硅胶加热箱设置于壳体内,其内部中空,侧面与彩色玻璃滤光片相邻处设置观察孔,顶面与阵列载样板设置样品放置孔;阵列LED蓝光灯倾斜于水平设置于硅胶加热板中空内部底部,提供激发光光源,照射至样品产生荧光。集合RPA+CRISPR/CAS12a反应条件、结果判读于一体,具有便携,操作简单,灵敏高等优点。

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