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公开(公告)号：CN113881806A
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN202111115472.8
申请日：2021-09-23
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种基于CRISPR/Cas12a技术检测新冠病毒和69/70突变株的方法及试剂盒。本发明通过LbaCas12a/crRNA系统特异性识别DNA靶标的能力，通过分别设计针对新冠病毒的非突变的靶点69/70和突变靶点69/70缺失的69/70‑crRNA‑W以及69/70‑crRNA‑M，对样品分子进行检测，只需要一台PCR仪或者恒温装置和简易荧光读取装置，当使用两个crRNA检测同一个样品时，可快速、有效区分核酸样品中含有新冠病毒野生型还是69/70缺失突变株，同时具有高特异性、高灵敏度以及低成本的特点，更加广泛适用于各种分子诊断实验室。本发明对新冠病毒疫情防控具有重要意义。
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公开(公告)号：CN108929918A
公开(公告)日：2018-12-04
申请号：CN201810795649.5
申请日：2018-07-19
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种用于检测PRRSV的现场快速检测方法及试剂盒，涉及畜牧领域。本发明利用crRNA的特异性和RPA引物的特异性有效保证对病毒检测的正确度，且在常温下1～2小时之内即可通过试纸确定是否感染及感染蓝耳病病毒的亚型，相比传统基于PCR的检测方法精确度有所提高。本发明可以形成配有纯化的冻干LwaCas13a和crRNA试剂盒，可以在现场，如猪场，屠宰场方便快速地对猪蓝耳病病毒进行检测，且不需要复杂的控温仪器如PCR仪和离心机等复杂设备，只需要一个恒温装置即可快速获得可以用肉眼观测的结果，可以更加高效地了解猪场的健康状况，避免损失，为蓝耳病的检测提供更低成本，快速方便的检测方法。
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公开(公告)号：CN108103098A
公开(公告)日：2018-06-01
申请号：CN201711335463.3
申请日：2017-12-14
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种化合物皮肤致敏体外评估细胞模型及其构建方法。该细胞模型的构建方法包括如下步骤：利用CRISPR/Cas9设计并构建sgRNA表达载体；设计并构建能将连接自裂解肽序列的报告基因定点敲入HMOX1基因的表达框内的同源重组载体；将同源重组载体，与hCas9质粒、sgRNA表达载体共转染细胞，进行单克隆化扩大培养，即得细胞模型。本发明通过CRISPR/CAS9结合细胞单克隆技术，获得HMOX1基因终止密码子前敲入荧光素酶基因的HaCaT细胞模型。该细胞模型实现荧光素酶基因与HMOX1基因的同步表达，从而有效分辨致敏化合物和非致敏化合物，为化合物致敏性研究提供更特异，更灵敏的细胞模型。
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公开(公告)号：CN113403424B
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202110589822.8
申请日：2021-05-28
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种基于CRISPR/Cas12a技术快速检测新冠病毒和突变株的方法及试剂盒，属于生物技术领域。本发明通过LbaCas12/crRNA系统的单碱基分辨率能力，通过分别设计针对新冠病毒的非突变的靶点N501和突变靶点Y501的501‑crRNA‑W以及501‑crRNA‑M，对样品分子进行检测，只需要一台PCR仪或者恒温装置和简易荧光读取装置，当使用两个crRNA同时检测同一个样品的时候，可快速、有效区分待测核酸样品是非突变株还是突变株，同时具有高特异性、高灵敏度以及低成本的特点，更加广泛适用于各种分子诊断实验室。本发明对新冠病毒疫情防控具有重要意义。
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公开(公告)号：CN113234856B
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202110458729.3
申请日：2021-04-27
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种基于CRISPR/Cas12a和恒温扩增的DENV一步法核酸检测方法，属于生物技术领域。本发明设计的crRNA与DENV‑1靶序列的识别结合具有高度特异性，有效保证检测结果的准确性。本发明设计的crRNA不受PAM序列的限制，只能特异性识别剪切单链DNA，而不能剪切双链DNA，因此Cas12a蛋白不会消耗用于扩增的模板，扩增与Cas12a‑crRNA检测可在同一体系同时进行，实现了高灵敏度。本发明只需要常温下40min便可通过试纸条显色或荧光强度读取检测结果，检测时间短，不需要昂贵、复杂的控温仪器，只需要一个恒温装置和荧光检测设备便可完成检测反应，检测成本低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113817873A
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN202111165253.0
申请日：2021-09-30
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6827 , C12Q1/6804 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开一种用于新冠病毒D614G突变的检测方法及试剂盒，属于生物技术领域。本发明通过LbaCas12/crRNA系统的单碱基分辨率能力，通过分别设计针对新冠病毒的非突变的靶点D614和突变靶点G614的614‑crRNA‑W以及614‑crRNA‑M，对样品分子进行检测，只需要一台PCR仪或者恒温装置和简易荧光读取装置，当使用两个crRNA分别检测同一个样品的时候，可快速、有效区分待测核酸样品是非突变株还是突变株，同时具有高特异性、高灵敏度以及低成本的特点，更加广泛适用于各种分子诊断实验室。本发明可快速有效地区分新冠病毒非突变株和突变株，对新冠病毒疫情防控具有重要意义。
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公开(公告)号：CN108929918B
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN201810795649.5
申请日：2018-07-19
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种用于检测PRRSV的现场快速检测方法及试剂盒，涉及畜牧领域。本发明利用crRNA的特异性和RPA引物的特异性有效保证对病毒检测的正确度，且在常温下1～2小时之内即可通过试纸确定是否感染及感染蓝耳病病毒的亚型，相比传统基于PCR的检测方法精确度有所提高。本发明可以形成配有纯化的冻干LwaCas13a和crRNA试剂盒，可以在现场，如猪场，屠宰场方便快速地对猪蓝耳病病毒进行检测，且不需要复杂的控温仪器如PCR仪和离心机等复杂设备，只需要一个恒温装置即可快速获得可以用肉眼观测的结果，可以更加高效地了解猪场的健康状况，避免损失，为蓝耳病的检测提供更低成本，快速方便的检测方法。
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公开(公告)号：CN113403424A
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110589822.8
申请日：2021-05-28
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种基于CRISPR/Cas12a技术快速检测新冠病毒和突变株的方法及试剂盒，属于生物技术领域。本发明通过LbaCas12/crRNA系统的单碱基分辨率能力，通过分别设计针对新冠病毒的非突变的靶点N501和突变靶点Y501的501‑crRNA‑W以及501‑crRNA‑M，对样品分子进行检测，只需要一台PCR仪或者恒温装置和简易荧光读取装置，当使用两个crRNA同时检测同一个样品的时候，可快速、有效区分待测核酸样品是非突变株还是突变株，同时具有高特异性、高灵敏度以及低成本的特点，更加广泛适用于各种分子诊断实验室。本发明对新冠病毒疫情防控具有重要意义。
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公开(公告)号：CN113234856A
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN202110458729.3
申请日：2021-04-27
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种基于CRISPR/Cas12a和恒温扩增的DENV一步法核酸检测方法，属于生物技术领域。本发明设计的crRNA与DENV‑1靶序列的识别结合具有高度特异性，有效保证检测结果的准确性。本发明设计的crRNA不受PAM序列的限制，只能特异性识别剪切单链DNA，而不能剪切双链DNA，因此Cas12a蛋白不会消耗用于扩增的模板，扩增与Cas12a‑crRNA检测可在同一体系同时进行，实现了高灵敏度。本发明只需要常温下40min便可通过试纸条显色或荧光强度读取检测结果，检测时间短，不需要昂贵、复杂的控温仪器，只需要一个恒温装置和荧光检测设备便可完成检测反应，检测成本低。
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公开(公告)号：CN108103098B
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN201711335463.3
申请日：2017-12-14
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种化合物皮肤致敏体外评估细胞模型及其构建方法。该细胞模型的构建方法包括如下步骤：利用CRISPR/Cas9设计并构建sgRNA表达载体；设计并构建能将连接自裂解肽序列的报告基因定点敲入HMOX1基因的表达框内的同源重组载体；将同源重组载体，与hCas9质粒、sgRNA表达载体共转染细胞，进行单克隆化扩大培养，即得细胞模型。本发明通过CRISPR/CAS9结合细胞单克隆技术，获得HMOX1基因终止密码子前敲入荧光素酶基因的HaCaT细胞模型。该细胞模型实现荧光素酶基因与HMOX1基因的同步表达，从而有效分辨致敏化合物和非致敏化合物，为化合物致敏性研究提供更特异，更灵敏的细胞模型。
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