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公开(公告)号：CN116868893A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202310939869.1
申请日：2023-07-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种单叶蔷薇异位繁殖保存的方法及其应用，所述单叶蔷薇异位繁殖保存方法具体包括以下步骤：采集成熟的单叶蔷薇果实，剥取其中的种子，晾干，消化，浸泡，消毒，冲洗后备用；得到的单叶蔷薇种子接种在初代培养基上，待种子萌发形成小苗后切分成茎段，接种到增殖培养繁殖，再接种到壮苗培养基上培养，后进行生根培养，生根后的单叶蔷薇组培苗经练苗移栽即可实现单叶蔷薇的异位繁殖保存。本发明的异位繁殖保存的方法可以实现单叶蔷薇的异地保存，打破了由于单叶蔷薇繁殖方式的限制，一直无法在新疆之外的地区保存的问题，同时大幅度提高了单叶蔷薇组培苗移栽成活率，与种植实生苗相比，组培苗生长更加旺盛、分枝更多。
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公开(公告)号：CN114300050A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202111634211.7
申请日：2021-12-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物信息分析技术领域，本发明提供了一种鉴定谱系特异性扩增基因家族的方法。本发明是利用直系同源性分析，对不同亚科中出现的谱系特异性扩增基因筛选和鉴定的方法。该方法操作简单、需要的数据量小，分析软件操作容易学习，并且筛选出的基因有很好的代表性，为将来谱系特异性基因的大范围鉴定以及功能分析奠定了基础。
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公开(公告)号：CN111149526A
公开(公告)日：2020-05-15
申请号：CN202010012280.3
申请日：2020-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高月季扦插生根的方法，主要包含如下步骤：（1）茉莉酸甲酯母液配制：先将茉莉酸甲酯乳化剂配制成1g/L的茉莉酸甲酯水溶液，作为母液；（2）插穗准备：选择无病虫害、长势良好的枝条作为扦插母枝截成插穗；（3）插穗处理：将步骤（1）准备好的茉莉酸甲酯母液稀释成工作液浸泡插穗基部；（4）苗床准备：准备育苗盘作为扦插苗床，并采用基质栽培方法进行育苗；（5）嫩枝扦插：将步骤（3）处理后的插穗立即扦插在育苗盘苗床中；（6）扦插管理：扦插育苗在人工气候箱中进行，设置光照周期为长日照，并设置光强为弱光强，加盖防止水分快速蒸发；扦插育苗期间保持穴盘内基质湿润，但不能积水。
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公开(公告)号：CN106868042B
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201710263493.1
申请日：2017-04-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种月季不定芽真空渗透转基因方法，包括以下步骤：切取月季无菌苗的幼嫩茎尖，在增殖培养基上诱导产生大量不定芽；切取不定芽在增殖培养基上预培养3天，然后转移到携带目的基因的农杆菌转化液中真空渗透5～10 min，充分浸湿；去除菌液后的不定芽转移到增殖培养基上在黑暗条件下共培养3天，然后把经无菌水彻底清洗后的不定芽转入抑菌培养基培养5天，再根据携带目的基因表达载体的选择标记转入到选择培养基上按由低到高梯度筛选，获得的抗性不定芽转移到生根培养基上诱导生根；采集阳性植株的叶片进行PCR鉴定和报告基因检测，都为阳性的植株为转基因植株。本发明增值系数高、繁殖周期短、基因转化率高、假阳性率低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114317570A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111633759.X
申请日：2021-12-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程应用技术领域，提供一种编码月季丙二烯氧化物合酶的基因RcAOS及其在抗月季灰霉病中的应用。本发明提供编码月季丙二烯氧化物合酶的基因RcAOS，所述基因RcAOS的CDS序列如SEQ ID NO.1所示；提供了编码月季丙二烯氧化物合酶的基因RcAOS的干扰RNA，所述干扰RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；以及所述编码月季丙二烯氧化物合酶的基因RcAOS在抗月季灰霉病中的应用。过表达基因RcAOS能够增强月季对灰霉病的抗性，而沉默该基因使得月季对灰霉病的防御减弱。该发明为通过提升植物内源茉莉酸合成来提高抗病性提供了指导与依据，为月季生产中病害的绿色防控提供新的思路。
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公开(公告)号：CN106868042A
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201710263493.1
申请日：2017-04-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种月季不定芽真空渗透转基因方法，包括以下步骤：切取月季无菌苗的幼嫩茎尖，在增殖培养基上诱导产生大量不定芽；切取不定芽在增殖培养基上预培养3天，然后转移到携带目的基因的农杆菌转化液中真空渗透5～10 min，充分浸湿；去除菌液后的不定芽转移到增殖培养基上在黑暗条件下共培养3天，然后把经无菌水彻底清洗后的不定芽转入抑菌培养基培养5天，再根据携带目的基因表达载体的选择标记转入到选择培养基上按由低到高梯度筛选，获得的抗性不定芽转移到生根培养基上诱导生根；采集阳性植株的叶片进行PCR鉴定和报告基因检测，都为阳性的植株为转基因植株。本发明增值系数高、繁殖周期短、基因转化率高、假阳性率低。
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公开(公告)号：CN111149527A
公开(公告)日：2020-05-15
申请号：CN202010048050.2
申请日：2020-01-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提出了一种月季扦插生根能力的评价方法，属于植物栽培和繁育技术领域。主要方法是扦插多个品种月季，并于扦插后20天对月季扦插根系指标进行测定，包括平均生根率、平均根长、平均生根数、最长根长四项根系指标。对四项根系指标进行标准化处理，而后进行主成分分析，并进行隶属函数值计算，最终转化成生根综合评价值。综合评价值将四项根系指标归一化处理，最终的综合评价值大小可以用来衡量统一条件下不同月季品种的生根能力，综合评价值越大生根能力越强。本发明可以综合不同根系指标归一化考量不同品种月季的扦插生根能力，对于月季繁殖方式的选择和良种选育具有重要意义。
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公开(公告)号：CN107014792B
公开(公告)日：2019-08-09
申请号：CN201710259815.5
申请日：2017-04-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用月季瞬时表达系统鉴定蛋白互作的方法，包括如下步骤：（1）提取含有目的基因的入门载体质粒；（2）将含有目的基因的入门载体质粒分别和含有萤火虫荧光素酶基因N端、C端的双元表达载体进行LR重组反应，提取质粒；（3）将LR反应后得到的含有目的基因和萤火虫荧光素酶基因片段的重组质粒转化农杆菌，制备转化液；（4）取继代培养1个月的月季无菌苗转移到上述所得转化液中，真空渗透3～5分钟，然后用无菌水清洗后将月季苗放回到继代培养基中培养；（5）取上述转化后月季苗均匀喷洒荧光素后放置CCD荧光照相系统的暗室中拍照，鉴定是否存在蛋白互作。本发明简便易行、设备要求不高、假阳性率低。
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公开(公告)号：CN108611353A
公开(公告)日：2018-10-02
申请号：CN201810437844.0
申请日：2018-05-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种用病毒诱导的基因沉默体系鉴定月季开花基因功能的方法。构建了烟草脆裂病毒TRV介导的RcCO基因病毒诱导基因沉默载体，并转化感受态农杆菌，继而通过真空渗透法对月季进行了瞬时转化，诱导了月季内源RcCO基因的沉默，实现病毒诱导的基因沉默体系鉴定月季开花基因功能。该种方法简便易行、材料易得，采用TRV 1/TRV 2-RcCO等比例混合的侵染液侵染月季，假阳性率低，表型鉴定周期短、转化效率高，便于高通量操作，为大规模开展月季基因功能研究提供依据。
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