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公开(公告)号：CN102337343B
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN201110344297.X
申请日：2011-11-04
Applicant: 南京农业大学 , 中国科学院南京土壤研究所
Abstract: 本发明公开了一种定量检测土壤中沙门氏菌的方法及其检测试剂盒，该方法是在参考相关研究的基础上，采用MPN结合PCR的方法来定量检测土壤中的病原微生物。利用了PCR方法快速准确的优势，取代了传统MPN方法中阳性结果的生化鉴定和血清学鉴定等步骤，从而减少了国标方法中的繁琐步骤，提高了检测效率，同时也采用了国标法中的前增菌步骤，来提高检测目的病原菌的准确性，由于土壤自身的复杂性，土壤中存在着大量微生物，其中还包括不同名目的各种病原微生物，为了更好更准确地定量检测目的病原菌，采用了选择性培养目的病原菌来提高检测效率。经过发明人的创造性的努力以及科学实验验证，最终在土壤中添加纯菌实验中可以得到沙门氏菌定量检测方法的灵敏度为250个/g土壤。
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公开(公告)号：CN102337343A
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN201110344297.X
申请日：2011-11-04
Applicant: 南京农业大学 , 中国科学院南京土壤研究所
Abstract: 本发明公开了一种定量检测土壤中沙门氏菌的方法及其检测试剂盒，该方法是在参考相关研究的基础上，采用MPN结合PCR的方法来定量检测土壤中的病原微生物。利用了PCR方法快速准确的优势，取代了传统MPN方法中阳性结果的生化鉴定和血清学鉴定等步骤，从而减少了国标方法中的繁琐步骤，提高了检测效率，同时也采用了国标法中的前增菌步骤，来提高检测目的病原菌的准确性，由于土壤自身的复杂性，土壤中存在着大量微生物，其中还包括不同名目的各种病原微生物，为了更好更准确地定量检测目的病原菌，采用了选择性培养目的病原菌来提高检测效率。经过发明人的创造性的努力以及科学实验验证，最终在土壤中添加纯菌实验中可以得到沙门氏菌定量检测方法的灵敏度为250个/g土壤。
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公开(公告)号：CN118792212A
公开(公告)日：2024-10-18
申请号：CN202411102096.2
申请日：2024-08-12
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N1/20 , B09B3/60 , C12R1/01 , B09B101/75
Abstract: 本发明涉及微生物领域，具体涉及一株类节杆菌及其在聚乙烯塑料降解中的应用。本发明提供的噬尼古丁类节杆菌(paenarthrobacter nicotinovorans)JPEA‑9，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：64534；保藏时间为2024年4月22日；JPEA‑9是首次被证实能够降解聚乙烯塑料，在120d内使未经紫外预处理的聚乙烯薄膜减重6.95％，使聚乙烯膜片表面出现明显生物侵蚀痕迹，实现对聚乙烯塑料膜片的有效降解，填补了聚乙烯塑料降解菌株资源的匮乏，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN101736023B
公开(公告)日：2012-05-09
申请号：CN201010018298.0
申请日：2010-01-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及纤维素水解酶β-1，4葡聚糖内切酶基因，属于应用工业微生物领域。本发明提供了纤维素水解酶系中关键酶之一的β-1，4葡聚糖内切酶基因及其所推导的水解酶蛋白质。该基因全长为1332bp，G+C含量为43.77％，编码443个氨基酸，为新的纤维素水解酶基因资源。利用该基因构建的工程菌株能高效表达β-1，4葡聚糖内切酶，该酶在以羧甲基纤维素钠为底物时的Km值和Vmax分别是19.92mg/ml和1941μmolmin-1mg-1，生产的酶制剂可用于食品，医药，饲料，纺织、洗涤等工业，不仅可以解决纤维素的再利用问题，还可以取得可观的经济效益。
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公开(公告)号：CN118995662A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202410911227.5
申请日：2024-07-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了能降解聚氨酯塑料的PurH酶及其编码基因purh。其核苷酸序列为SEQ ID NO.1，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。通过构建其与PAZy塑料活性酶数据库中已报道聚氨酯降解酶的进化树，PurH与角质酶亲缘关系最近并形成单独分支，表明PurH是塑料解聚酶中一种是新型角质酶。本发明具体内容包括：purh基因的克隆；pET29a‑purh表达载体的构建；PurH蛋白的表达、纯化及功能验证；PurH酶在Impranil#imgabs0#平板产生透明圈，并造成PUR泡沫重量损失达72.69％，证明所述purh基因编码的蛋白具有降解聚氨酯塑料的功能，在生物降解聚氨酯塑料具有巨大的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102337344B
公开(公告)日：2013-08-21
申请号：CN201110344298.4
申请日：2011-11-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种定量检测土壤中大肠杆菌的方法及其检测试剂盒，该方法是在参考相关研究的基础上，采用MPN结合PCR的方法来定量检测土壤中的病原微生物。利用了PCR方法快速准确的优势，取代了传统MPN方法中阳性结果的生化鉴定和血清学鉴定等步骤，从而减少了国标方法中的繁琐步骤，提高了检测效率，同时也采用了国标法中的前增菌步骤，来提高检测目的病原菌的准确性，由于土壤自身的复杂性，土壤中存在着大量微生物，其中还包括不同名目的各种病原微生物，为了更好更准确地定量检测目的病原菌，采用了选择性培养目的病原菌来提高检测效率。经过发明人的创造性的努力以及科学实验验证，最终在土壤中添加纯菌实验中可以得到大肠杆菌定量检测方法的灵敏度为25个/g土壤。
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公开(公告)号：CN101993878A
公开(公告)日：2011-03-30
申请号：CN201010506356.4
申请日：2010-10-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/70 , C12N15/56 , C12N9/42
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了一种rRNA嵌合启动子及含有该嵌合启动子的表达载体。该嵌合启动子是在大肠杆菌rRNArrnB操纵元启动子P1的上下游分别插入乳糖操纵元的两个lacO1启动子；或者在大肠杆菌rRNA操纵元启动子P1的上下游分别插入阿拉伯糖操纵元的araI1和araO2启动子，形成环状DNA结构实现对启动子P1的控制。该诱导型表达载体由载体pET29a的T7启动子被所述的rRNArrnBP1嵌合启动子代替所得。本发明所述嵌合启动子及表达载体pRNP2和pRBB可以方便的实现在多种大肠杆菌菌株中进行外源基因的高效表达，其中pRBB还可以用于基因的定向进化。
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公开(公告)号：CN101781639A
公开(公告)日：2010-07-21
申请号：CN200910233690.4
申请日：2009-10-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种有机磷水解酶重组表达菌株高密度发酵方法及产品保存方法，属于环境生物技术领域。本发明将有机磷水解酶MPH重组表达菌株Eshcherichia coliBL21(DE3)pETMb进行了高密度培养条件优化，使得12小时发酵结束后发酵液光密度OD达29，酶活达到18.5IU/ml。并在生产MPH加入合适的保护溶液以延长该酶的保存期，该酶还可与生物型表面活性剂混合使用，简化降解酶的使用程序。可以作为一种优化配方应用于加酶果蔬洗洁精的生产中，使其在瓜果蔬菜表面的农药降解方面发挥更大的作用。通过该发明的保存方案可以使酶在液体保存条件下保存期延长至90天以上。
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公开(公告)号：CN109912700B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN201910220003.9
申请日：2019-03-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种利用β‑1,6葡聚糖酶联产酵母葡聚糖、甘露糖蛋白和酵母提取物的方法，该方法以酵母细胞为原料，通过对酵母细胞进行高温灭活处理，离心，干燥上清得到酵母提取物；利用β‑1,6葡聚糖酶酶解酵母细胞壁，离心，离心分别得到的酶解液上清和酶解沉淀，酶解液上清经水提醇沉、离心分离、干燥得到甘露糖蛋白；乙醇经回收后，剩余液体部分经浓缩、喷雾干燥得到酵母提取物；酶解沉淀经脱脂、蛋白酶处理、喷雾干燥得到酵母葡聚糖。本发明制备的酵母葡聚糖和甘露糖蛋白纯度高、得率高，且制备过程成本低，不使用强酸、强碱试剂，对环境污染小。
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公开(公告)号：CN103805536B
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201310728965.8
申请日：2013-12-25
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种解钾菌类芽孢杆菌G4及其在植物促生中的应用，所述的解钾菌，分类命名为类芽孢杆菌（Paenibacillus sp.）G4，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2013548，保藏日期为2013年11月12日，保藏地址为中国武汉武汉大学。本发明从土壤中筛选到一株解钾菌，经鉴定为类芽孢杆菌属G4，该菌具有较强的解钾活性，接种到土壤中能改善土壤微环境，促进植物生长，可作为微生物肥料应用到农业生产中。
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