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公开(公告)号：CN112176070B
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202010765498.6
申请日：2020-08-03
申请人： 南京农业大学 , 常州市枫华牧业有限公司
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12N15/12
摘要： 本发明公开了一种与猪肌内脂肪性状相关的UCP3基因、分子标记及其应用，该SNP分子标记为位于如SEQ ID NO：6所示序列的2159bp处的G/T突变，其基因组位置位于猪11.1版本第9号染色体从5’端起的8387309位点。本发明首先在279头试验猪群中利用FastTarget目标区域测序技术在该基因中鉴定了一个影响猪肌内脂肪含量的变异位点，并建立了针对该位点的PCR‑RsaI‑RFLP基因快速分型方法；在此基础上，本发明在500头试验猪群中对该位点提高肌内脂肪的应用效果进行了验证，结果表明通过该位点有利基因型的选择可显著提高猪群肌内脂肪含量，所鉴定的变异位点可用于种猪肌内脂肪的早期、活体、快速的标记辅助选育。
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公开(公告)号：CN112176070A
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN202010765498.6
申请日：2020-08-03
申请人： 南京农业大学 , 常州市枫华牧业有限公司
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12N15/12
摘要： 本发明公开了一种与猪肌内脂肪性状相关的UCP3基因、分子标记及其应用，该SNP分子标记为位于如SEQ ID NO：6所示序列的2159bp处的G/T突变，其基因组位置位于猪11.1版本第9号染色体从5’端起的8387309位点。本发明首先在279头试验猪群中利用FastTarget目标区域测序技术在该基因中鉴定了一个影响猪肌内脂肪含量的变异位点，并建立了针对该位点的PCR‑RsaI‑RFLP基因快速分型方法；在此基础上，本发明在500头试验猪群中对该位点提高肌内脂肪的应用效果进行了验证，结果表明通过该位点有利基因型的选择可显著提高猪群肌内脂肪含量，所鉴定的变异位点可用于种猪肌内脂肪的早期、活体、快速的标记辅助选育。
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公开(公告)号：CN108165635A
公开(公告)日：2018-06-15
申请号：CN201611113063.3
申请日：2016-12-07
申请人： 南京农业大学
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11
摘要： 本发明属于分子生物学领域，提供一种KIAA1462基因启动子区变异位点及其在扬州鹅产蛋性状选育上的应用。该突变位点位于KIAA1462基因启动子区转录起始位点上游696bp处，具有多态性SNP位点，分别为鸟嘌呤G或胞嘧啶C，从而获得了与扬州鹅产蛋性状相关的功能基因及分子遗传标记，为鹅产蛋性状的选育工作提供了理论依据。
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公开(公告)号：CN111549058B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202010286443.7
申请日：2020-04-13
申请人： 南京农业大学
摘要： 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统在猪胎儿成纤维细胞中实现基因敲除的方法，包括下述步骤：构建Cas9/sgRNA真核表达载体；构建RGS‑CR双荧光代替性报告载体；将Cas9/sgRNA真核表达载体和RGS‑CR报告载体共转至293T细胞中，筛选最高效的sgRNA序列；将筛选出的Cas9/sgRNA质粒电转至猪胎儿成纤维细胞中，实现敲除。本发明的方法操作简单，可在猪体细胞上可实现高效的基因编辑。
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公开(公告)号：CN107267627B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN201710565071.X
申请日：2017-07-12
申请人： 南京农业大学
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11
摘要： 本发明属于猪标记辅助选择(MAS)技术领域，公开了与猪生产性状相关的Six1基因分子标记的制备与应用。该分子标记选自(1)～(2)中的至少一种：(1)其DNA序列如序列表SEQ ID NO：2所示，在序列表SEQ ID NO：2所示序列的第11bp处有1个A11‑G11突变，导致HindII‑RFLP多态性；(2)其DNA序列如序列表SEQ ID NO：13所示，在序列表SEQ ID NO：13所示序列的第11bp处有1个(AC)n微卫星变异，n表示(AC)重复数。通过群体数据关联分析，启动子活性，以及基因表达分析，证实了两个分子标记与猪生产性状呈显著相关。本发明所建立的分子标记的制备方法和应用可用于猪相关生产性状的分子选育。
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公开(公告)号：CN109917058A
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201910193809.3
申请日：2019-03-14
申请人： 南京农业大学
摘要： 本发明公开了一种细胞内四种游离脱氧核苷酸的高效液相测定方法，色谱条件为：InertSustain AQ-C18色谱柱；流动相A：40-60mM KH2PO4，pH5.0-6.0；流动相B：CH3OH；流速：1.0ml/min；波长：260nm；柱温：40℃；等梯度洗脱，A:B＝90:10。本发明的细胞内四种游离脱氧核苷酸的高效液相色谱测定方法，能有效分离细胞内四种游离的脱氧核苷酸，操作简单，重复性好，其测定的精密度满足细胞分析的要求。
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公开(公告)号：CN118389603A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410562641.X
申请日：2024-05-08
申请人： 南京农业大学
IPC分类号： C12N15/867 , C12N15/62 , C12N9/22 , C12N9/12 , C12N5/10
摘要： 本发明公开了条件性表达PE2的细胞系建立及其应用。将pCW‑PE2载体与慢病毒包装相关载体(pMD2G，psPAX)共转入293T细胞制备病毒悬液。然后将病毒悬液感染到PK15细胞系，在添加强力霉素(Dox)的条件下诱导培养72h后，利用嘌呤霉素进行药筛，最后得到存活的PK15细胞，利用免疫荧光检测其阳性率。本发明所述的条件性表达PE2的PK15细胞系(以下简称PE2‑PK15)，可以在含有Dox的条件下诱导PE2表达，反之则不表达。PE2‑PK15细胞系在进行PE编辑的时候，只需要将pegRNA转入细胞即可达到实验目的。同时，本发明可以极大简化PEs编辑实验流程，提高定点编辑效率。
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公开(公告)号：CN109588568B
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN201811546492.9
申请日：2018-12-18
申请人： 南京农业大学
IPC分类号： A23K50/30 , A23K20/105
摘要： 本发明属于饲料添加剂领域，公开了一种通过日粮添加原花青素提高母猪繁殖性能的方法。从哺乳中后期(断奶前2周)至断奶后发情(断奶后2周)，在基础日粮中额外添加150～300mg/天的原花青素，可显著提高母猪的窝产仔数和仔猪初生重。对于产仔数较低，环境不良应激较多的猪场，通过日粮添加原花青素对母猪产仔性能的提升十分显著；对于产仔性能较高的猪场，通过日粮添加原花青素仍能有效提高产仔数。该技术试验成本每100窝不到1000元，产仔数的增加在35‑145头之间，因此该项技术在产仔数优良与较差的猪场都具有较大的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN108165635B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN201611113063.3
申请日：2016-12-07
申请人： 南京农业大学
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11
摘要： 本发明属于分子生物学领域，提供一种KIAA1462基因启动子区变异位点及其在扬州鹅产蛋性状选育上的应用。该突变位点位于KIAA1462基因启动子区转录起始位点上游696bp处，具有多态性SNP位点，分别为鸟嘌呤G或胞嘧啶C，从而获得了与扬州鹅产蛋性状相关的功能基因及分子遗传标记，为鹅产蛋性状的选育工作提供了理论依据。
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公开(公告)号：CN109706159A
公开(公告)日：2019-05-03
申请号：CN201811542502.1
申请日：2018-12-17
申请人： 南京农业大学
IPC分类号： C12N15/54 , C12N9/10 , C12Q1/6888 , C12Q1/6851
摘要： 本发明公开了一种肌内脂肪沉积FASN基因及其应用，从杜洛克×梅山杂交猪的背最长肌组织分离、克隆了与肌内脂肪相关的脂肪酸合成酶(fatty acid synthase，FASN)基因，其长度为8127bp，包括7539bp CDS、97bp 5’UTR及491bp 3’UTR，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1；CDS核苷酸序列如SEQ.ID.NO.2；编码的氨基酸序列为SEQ.ID.NO.3。检测结果显示FASN基因在脂肪组织中极其高表达。FASN基因与肌内脂肪含量的相关性检测结果表明FASN基因表达水平在高肌内脂肪个体中显著高于其在低肌内脂肪个体。本发明可以为今后猪肌内脂肪含量性状的选育提供了分子基础。
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