湖泊沉积物中微生物总DNA的提取及生物量的鉴定方法

    公开(公告)号:CN100427598C

    公开(公告)日:2008-10-22

    申请号:CN200610085355.0

    申请日:2006-06-12

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种湖泊沉积物中微生物总DNA的提取及生物量的鉴定方法,首先抽取部分样品冷冻干燥计算样品含水率;沉积物样品加入提取缓冲液以及SDS裂解,离心、去除腐质酸和多糖,沉淀分离得到单细胞;收集上清液加入高盐和阳离子去污剂消化,提抽;向上述水相中加入萃取剂沉淀,冷乙醇洗涤,临界干燥;最后对粗提液处理,紫外测定OD260nm/OD280nm吸光度,定量计算微生物总DNA以及单位沉积物生物量。本发明直接提取总DNA,整个过程简单、不需要花费贵重的药品,比较经济、实用。本发明特别适用于湖泊沉积物中微生物总DNA的提取及生物量的鉴定方法。

    微生物固体发酵水生植物生产蛋白饲料的方法

    公开(公告)号:CN100379355C

    公开(公告)日:2008-04-09

    申请号:CN200510038613.5

    申请日:2005-03-30

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种微生物固体发酵水生植物生产蛋白饲料的方法,其以水生植物或藻类为原料,粉碎后的原料具有适当含水量,添加适量麸皮和尿素搅拌均匀装入反应器,灭菌后加入1%-5%重量百分比的纤维素分解霉菌并培养12-48小时;再接种1%-5%重量百分比的酵母菌并培养48小时至96小时;由于以水生植物或藻类为原料,在改善了生态环境的同时还产生了经济效益,其次在发酵过程中由于霉菌和酵母菌的共同作用使产品中蛋白含量显著提高。

    转聚磷激酶基因的大肠杆菌的构建方法

    公开(公告)号:CN1876809A

    公开(公告)日:2006-12-13

    申请号:CN200610038917.6

    申请日:2006-03-17

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种转聚磷激酶基因的大肠杆菌的构建方法,该方法包括基因的克隆和载体的构建;克隆包括:提取大肠杆菌的总DNA;设计引物,扩增ppk基因;扩增出的目的基因重组到克隆载体pMD18-T中;转化大肠杆菌DH5α;构建包括:采用限制性内切酶BamHI和HindIII双酶切带有ppk目的基因的pMD18-T质粒和空表达载体pET-28a(+);将目的基因通过T4连接酶定向连接到表达载体pET-28a(+)中,然后转化DH5α;利用PCR和双酶切的方法筛选鉴定出阳性重组子;提取出重组质粒pET28a-PPK,转化受体菌株BL21(DE3)中。本发明工艺简单,所得基因菌具有高效的去除磷的能力。

    三苯基甲烷类染料脱色酶及其应用

    公开(公告)号:CN101870968A

    公开(公告)日:2010-10-27

    申请号:CN201010175228.6

    申请日:2010-05-18

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种三苯基甲烷类染料脱色酶,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明还公开了表达上述三苯基甲烷类染料脱色酶的基因,其核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示,该基因来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida KT2440)的三苯基甲烷染料脱色酶基因。本发明还公开了上述三苯基甲烷类染料脱色酶的纯化方法,以及上述三苯基甲烷类染料脱色酶在去除三苯基甲烷类染料中的应用。本发明的三苯基甲烷类染料脱色酶对三苯基甲烷类染料具有高效的脱色活性,具有巨大的应用前景。

    砷污染土壤的治理方法
    7.
    发明授权

    公开(公告)号:CN100493744C

    公开(公告)日:2009-06-03

    申请号:CN200610038301.9

    申请日:2006-02-15

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种砷污染土壤的治理方法,其特征在于该方法包括以下步骤:(1)向被砷污染的土壤中添加生物有机肥;(2)添加甲硫氨酸和谷氨酸作为甲基供体;(3)调节土壤含水率;(4)调节pH值为5.3-8;(5)创造厌氧环境。传统的物理和化学修复方法只能通过添加剂来降低土壤中砷的生物可利用性,并不能实质性的去除土壤中的砷,本发明利用土壤微生物的挥发作用可实质性的去除土壤中的砷,成本低,无二次污染。超积累植物法需要大面积种植植物和及时收割植物,如何处置收割后的植物也是一个难题,生物挥发技术则不存在这些问题,相对省时省力。

    砷污染土壤的治理方法
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1806952A

    公开(公告)日:2006-07-26

    申请号:CN200610038301.9

    申请日:2006-02-15

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种砷污染土壤的治理方法,其特征在于该方法包括以下步骤:(1)向被砷污染的土壤中添加生物有机肥;(2)添加甲硫氨酸和谷氨酸作为甲基供体;(3)调节土壤含水率;(4)调节pH值为5.3-8;(5)创造厌氧环境。传统的物理和化学修复方法只能通过添加剂来降低土壤中砷的生物可利用性,并不能实质性的去除土壤中的砷。本发明利用土壤微生物的挥发作用可实质性的去除土壤中的砷,成本低,无二次污染。超积累植物法需要大面积种植植物和及时收割植物,如何处置收割后的植物也是一个难题,生物挥发技术则不存在这些问题,相对省时省力。

    泛菌属菌Pantoea sp.M3及其用于降解孔雀石绿的方法

    公开(公告)号:CN100494348C

    公开(公告)日:2009-06-03

    申请号:CN200710021045.7

    申请日:2007-03-23

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种泛菌属菌Pantoea sp.M3(CCTCC No.M 207022)。这种细菌具有降解孔雀石绿的能力。取对数期该菌株,按2%~4%的重量百分比浓度添加到浓度为0.5mg/L~5mg/L的灭菌孔雀石绿降解培养液中,降解培养液组成按g/L计为:葡萄糖0.5~1;NaCl 0.01~0.1;MgSO40.01~0.1;NH4NO30.02~0.1;K2HPO40.01~0.1;KH2PO40.01~0.1;酵母膏0.06~0.3;pH值6.0~8.0。20~30℃降解5~10天孔雀石绿,降解效果较好。本发明可有效去除渔业水体中残留的孔雀石绿及其主要代谢产物隐孔雀石绿,对低浓度孔雀石绿渔业水体具有很好的处理效果,该菌株对0.5~2mg/L的孔雀石绿降解率在90%以上。

    泛菌属菌Pantoea sp.M3及其用于降解孔雀石绿的方法

    公开(公告)号:CN101050436A

    公开(公告)日:2007-10-10

    申请号:CN200710021045.7

    申请日:2007-03-23

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种泛菌属菌Pantoea sp.M3(CCTCC No.M 207022)。这种细菌具有降解孔雀石绿的能力。取对数期该菌株,按2%~4%的重量百分比浓度添加到浓度为0.5mg/L~5mg/L的灭菌孔雀石绿降解培养液中,降解培养液组成按g/L计为:葡萄糖0.5~1;NaCl 0.01~0.1;MgSO40.01~0.1;NH4NO30.02~0.1;K2HPO40.01~0.1;KH2PO40.01~0.1;酵母膏0.06~0.3;pH值6.0~8.0。20~30℃降解5~10天孔雀石绿,降解效果较好。本发明可有效去除渔业水体中残留的孔雀石绿及其主要代谢产物隐孔雀石绿,对低浓度孔雀石绿渔业水体具有很好的处理效果,该菌株对0.5~2mg/L的孔雀石绿降解率在90%以上。

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