公开(公告)号：CN104818266A

公开(公告)日：2015-08-05

申请号：CN201510234528.X

申请日：2015-05-08

申请人： 南京工业大学

发明人： 黄和 ,  杨鑫 ,  江凌 ,  贾义刚 ,  宋小刚 ,  胡燚 ,  李霜

IPC分类号： C12N9/96 ,  C12N9/20

CPC分类号： C12N9/96 ,  C12N9/20 ,  C12Y301/01003

摘要： 在含有有机溶剂的脂肪酶催化反应体系中外源添加海藻糖，脂肪酶活力相比没有添加海藻糖可以提高20%-40%，本发明所用的海藻糖天然无毒，化学性质稳定。本发明提供的方法简单有效，不危害环境，仅通过较低的附加投入，可以低成本、高效率地解决脂肪酶在工业应用中有机溶剂耐受性差的问题。

公开(公告)号：CN105950687A

公开(公告)日：2016-09-21

申请号：CN201610535699.0

申请日：2016-07-09

申请人： 南京工业大学

发明人： 江凌 ,  晏星辰 ,  黄和 ,  宋小刚 ,  李阳 ,  宋哲 ,  唐苏苏

IPC分类号： C12P19/24 ,  C12P19/12 ,  C12N9/90

CPC分类号： C12P19/24 ,  C12N9/90 ,  C12P19/12 ,  C12Y504/99016

摘要： 一种应用自诱导培养基和全细胞催化合成海藻糖的方法。将包含海藻糖合成酶基因的大肠杆菌基因工程菌接种至自诱导培养基中诱导产酶，获取发酵液；从发酵液中提取大肠杆菌基因工程菌湿菌体，用磷酸盐缓冲液重悬，获取反应液；用磷酸盐缓冲液配制麦芽糖溶液，与反应液进行催化反应，后分离干燥获得海藻糖晶体。采用本发明的方法，自诱导培养基培养出来的细胞不需要经过外源处理，直接在磷酸盐缓冲体系中进行全细胞催化反应合成海藻糖，便可实现高效催化。

公开(公告)号：CN105838704A

公开(公告)日：2016-08-10

申请号：CN201610320569.5

申请日：2016-05-16

申请人： 南京工业大学

发明人： 江凌 ,  宋小刚 ,  黄和 ,  唐苏苏

IPC分类号： C12N11/18 ,  C12N1/21 ,  C12N9/26 ,  C12N9/10 ,  C12P19/12 ,  C12R1/19

CPC分类号： Y02P20/588 ,  C12N11/18 ,  C12N9/1051 ,  C12N9/2425 ,  C12P19/12 ,  C12Y204/01245 ,  C12Y302/01002

摘要： 本发明提供了一种纳米纤维生物膜固定化双酶系统及其催化合成海藻糖的方法。本方法在发酵产耐高温海藻糖合酶的大肠杆菌细胞表面自组装淀粉质纳米纤维生物膜，利用可基因编码的多肽标签SpyTag?SpyCatcher特异性共价结合高效固定重组β淀粉酶，自主构建海藻糖合酶—β淀粉酶双酶催化体系，最终使胞外、胞内两步催化连续进行。本方法对β淀粉酶的固定化效率可达到50%?62%；含量为20%?25%重量的可溶性淀粉在胞外经生物膜上的β?淀粉酶催化形成麦芽糖后进入细胞内与海藻糖合成酶反应生成海藻糖，固定化细胞重复利用10?16次后淀粉的转化率可达到45%?55%。