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公开(公告)号：CN117025421A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202310933156.4
申请日：2023-07-26
申请人： 南京师范大学 , 江西新瑞丰生化股份有限公司
摘要： 本发明涉及微生物基因改造技术，公开了一种生产脱落酸的重组菌株及其构建方法和应用。该重组菌株由出发菌株经遗传改造获得，相比于出发菌株，所述重组菌株的HMG‑CoA还原酶的活性增强且表达血红蛋白VHB；其中，所述重组菌株中含有编码氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的HMG‑CoA还原酶的基因以及编码氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的血红蛋白VHB的基因。发酵生产脱落酸的方法包括：将该重组菌株接种至产酸发酵培养基中进行发酵培养。该重组菌株能够高效、稳定地发酵生产脱落酸，产量较高且发酵成本较低。
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公开(公告)号：CN118704102A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202411206101.4
申请日：2024-08-30
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C40B40/06 , C12N15/113 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12N15/31 , C12N15/56 , C12N9/24 , C07K14/37 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及微生物基因改造技术，公开了一种灰霉菌启动子文库、重组载体、重组菌以及它们的应用。该启动子文库含有不同强度的启动子Pthi4、P30hs、Ptef、P70hs、Phy1、P90hs、Paba1、Phy2、Phy3、Pfes1、Pyqae、Pgdh、Pory、Phy4、Psis1、Phs、Pcole1、Prcf2、Phy5、Phy6、Pexp、Prcn1、Pthid、Phy7、Phy8、PbZIP、Phy9、Phy10、Phy11和Phy12，核苷酸序列依次如SEQ ID NO. 1‑30所示。本发明提供的启动子文库不仅能够较高地调控目的基因表达强度，而且大大丰富了灰霉菌的启动子遗传调控元件，有利于优化灰霉菌的工业化应用。
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公开(公告)号：CN118704102B
公开(公告)日：2024-11-01
申请号：CN202411206101.4
申请日：2024-08-30
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C40B40/06 , C12N15/113 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12N15/31 , C12N15/56 , C12N9/24 , C07K14/37 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及微生物基因改造技术，公开了一种灰霉菌启动子文库、重组载体、重组菌以及它们的应用。该启动子文库含有不同强度的启动子Pthi4、P30hs、Ptef、P70hs、Phy1、P90hs、Paba1、Phy2、Phy3、Pfes1、Pyqae、Pgdh、Pory、Phy4、Psis1、Phs、Pcole1、Prcf2、Phy5、Phy6、Pexp、Prcn1、Pthid、Phy7、Phy8、PbZIP、Phy9、Phy10、Phy11和Phy12，核苷酸序列依次如SEQ ID NO.1‑30所示。本发明提供的启动子文库不仅能够较高地调控目的基因表达强度，而且大大丰富了灰霉菌的启动子遗传调控元件，有利于优化灰霉菌的工业化应用。
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公开(公告)号：CN113061564B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202110324264.2
申请日：2021-03-26
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N1/36 , C12P7/6434 , C12R1/645
摘要： 本发明公开了一种使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法，通过将裂殖壶菌在逐渐增加木糖与葡萄糖的比例的驯化培养基中进行驯化培养得使得裂殖壶菌可以在富含木糖培养基中进行正常生长代谢且生产脂质化合物。本发明提供的方法，增加了裂殖壶菌可利用的底物种类，有助于后面裂殖壶菌对木制纤维素的高效利用，此外本发明的驯化方法目的性强，效率高，使得裂殖壶菌不仅可以在富含木糖的培养基上进行正常的生长代谢，而且可以保证裂殖壶菌的生物量、总油脂、DHA等指标，该方法有利于加强对廉价原材料木质纤维素的高效利用。
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公开(公告)号：CN112662569A
公开(公告)日：2021-04-16
申请号：CN202011563470.0
申请日：2020-12-25
申请人： 南京师范大学
摘要： 本发明公开了一种吗啡啉在控制裂殖壶菌发酵过程中不皂化物含量、提高DHA油脂的含量中的应用，本发明通过在裂殖壶菌发酵过程中外源添加吗啡啉来降低裂殖壶菌发酵过程中甾醇含量且提高油脂含量，并通过裂殖壶菌的细胞生长的生物量、油脂产量以及不皂化物含量指标来确定吗啡啉的最佳添加浓度，与未添加相比，添加1.8g/L的吗啡啉的甾醇含量降低了64.86％，油脂产量提高了67.51％，DHA含量提高了25.5％，虾青素含量提高了85％，显著提高了裂殖壶菌产DHA油脂和虾青素的含量。本发明首次将吗啡啉应用到裂殖壶菌不皂化物含量的调控中，为提高裂殖壶菌中油脂的含量提供了新的思路，在工业化生产方面存在巨大的潜力。
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公开(公告)号：CN118755750A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202411239470.3
申请日：2024-09-05
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N15/80 , C12N15/113 , C12N9/22 , G01N30/02 , C12Q1/6869 , C12Q1/6895 , C12P7/42 , C12N1/15 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及微生物基因改造技术，公开了一种微生物基因改造靶点的鉴定方法及其应用。该鉴定方法包括以下步骤：将外源Cas效应蛋白表达框整合到原始菌株中得到改造工程菌，合成靶向原始菌株的基因组编码区的sgRNA文库；将所述sgRNA文库导入所述改造工程菌中获得多个突变菌株；将多个所述突变菌株进行发酵筛选得到目标产物产量高于原始菌株的突变菌株作为目标菌株；对目标菌株进行基因测序，鉴定提高原始菌株合成目标产物能力的基因组靶点。该靶点鉴定方法能够方便、快捷地鉴定出微生物的新靶点，获得高产目标产物的突变菌株，为微生物菌株的代谢工程改造提供了新的平台。
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公开(公告)号：CN112662569B
公开(公告)日：2023-01-31
申请号：CN202011563470.0
申请日：2020-12-25
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N1/14 , C12P7/6434 , C12P23/00 , C12R1/645
摘要： 本发明公开了一种吗啡啉在控制裂殖壶菌发酵过程中不皂化物含量、提高DHA油脂的含量中的应用，本发明通过在裂殖壶菌发酵过程中外源添加吗啡啉来降低裂殖壶菌发酵过程中甾醇含量且提高油脂含量，并通过裂殖壶菌的细胞生长的生物量、油脂产量以及不皂化物含量指标来确定吗啡啉的最佳添加浓度，与未添加相比，添加1.8g/L的吗啡啉的甾醇含量降低了64.86％，油脂产量提高了67.51％，DHA含量提高了25.5％，虾青素含量提高了85％，显著提高了裂殖壶菌产DHA油脂和虾青素的含量。本发明首次将吗啡啉应用到裂殖壶菌不皂化物含量的调控中，为提高裂殖壶菌中油脂的含量提供了新的思路，在工业化生产方面存在巨大的潜力。
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公开(公告)号：CN118599880A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410583696.9
申请日：2024-05-11
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N15/80 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/60 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及基因工程技术，公开了一种CRISPR/Cas9基因编辑系统及其构建方法和在微生物基因编辑中的应用。该基因编辑系统含有载体质粒、Cas9基因、能够靶向目的序列的gRNA基因、用于驱动所述Cas9基因的启动子I以及用于驱动所述gRNA基因的启动子II。微生物基因编辑的方法包括：将所述基因编辑系统转入所述微生物细胞内，进行目的基因的敲除和/或插入。该系统对微生物进行基因编辑的周期短、效率高，可一步实现对多个基因的编辑。
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公开(公告)号：CN113061564A
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN202110324264.2
申请日：2021-03-26
申请人： 南京师范大学
摘要： 本发明公开了一种使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法，通过将裂殖壶菌在逐渐增加木糖与葡萄糖的比例的驯化培养基中进行驯化培养得使得裂殖壶菌可以在富含木糖培养基中进行正常生长代谢且生产脂质化合物。本发明提供的方法，增加了裂殖壶菌可利用的底物种类，有助于后面裂殖壶菌对木制纤维素的高效利用，此外本发明的驯化方法目的性强，效率高，使得裂殖壶菌不仅可以在富含木糖的培养基上进行正常的生长代谢，而且可以保证裂殖壶菌的生物量、总油脂、DHA等指标，该方法有利于加强对廉价原材料木质纤维素的高效利用。
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