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公开(公告)号：CN1236055C
公开(公告)日：2006-01-11
申请号：CN03130264.5
申请日：2003-06-27
申请人： 南开大学
IPC分类号： C12N5/00
摘要： 本发明涉及癌细胞系，特别是一种高转移倾向的人乳腺癌细胞系及其建立的方法，属动物细胞系领域。有关肿瘤的侵袭与移转的机制目前尚不十分清楚。需要建立肿瘤转移动物模型对其进行深入的研究。以往在肿瘤转移动物模型中应用裸鼠，在本发明中，我们采用SCID小鼠作为实验对象，取乳腺癌亲本MCF-7细胞悬液(5×107/0.2ml)皮下接种于SCID小鼠肩部，接种MCF-7细胞68天后，将SCID鼠处死，取出肺脏，进行原代培养，当由组织块中长出的细胞能够长满培养瓶底部后，进行细胞传代，将该细胞命名为LM-MCF-7。当LM-MCF-7细胞体外培养20代后，将瘤细胞再回注到SCID鼠皮下，方法同前；成瘤率达到100%(5/5只)，并且在SCID鼠的肺脏、肾脏、脾脏、骨髓、淋巴结和心脏等脏器出现广泛转移。
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公开(公告)号：CN1546668A
公开(公告)日：2004-11-17
申请号：CN200310107316.2
申请日：2003-12-12
申请人： 南开大学
摘要： 本发明公开了一种乙型肝炎病毒X蛋白转导系统表达载体及其构建，是通过人乙肝病毒的X基因与pTAT－GFP载体构建重组质粒pTAT－GFP－X，构建的pTAT－GFP－X重组质粒可表达含有乙型肝炎病毒X蛋白的融合蛋白；经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导可大量表达融合蛋白；可以通过6组氨酸(His6)进行纯化；TAT多肽具有能够穿过细胞膜的结构，利用该功能本发明可以使HBx蛋白导入细胞；本发明将HBx蛋白导入细胞后，可通过GFP检测导入效率和胞内示踪；本发明在进行蛋白转导细胞实验时，可实现HBx蛋白的“定量”导入，本发明可详细地研究乙肝病毒X蛋白的致病作用。
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公开(公告)号：CN1810982A
公开(公告)日：2006-08-02
申请号：CN200510013154.5
申请日：2005-01-28
申请人： 南开大学
摘要： 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选在乳腺癌转移中参与细胞凋亡作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM－MCF－7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF－7形成配对细胞系作为实验样本，不仅可随时无限量培养获得，且由于实验样本的细胞成分均一，保证了分离结果的精确性和准确性。本发明方法还通过基因表达谱芯片技术分离出了这些参与细胞凋亡作用的基因，这些基因的表达和功能的确认，在乳腺癌药物或基因治疗方面以及在用于制备肿瘤转移芯片、制备抗肿瘤转移基因疫苗及建立抗肿瘤转移药物筛选技术平台方面，都将有着重要的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN1810981A
公开(公告)日：2006-08-02
申请号：CN200510013153.0
申请日：2005-01-28
申请人： 南开大学
摘要： 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选乳腺癌转移中参与新陈代谢作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM－MCF－7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF－7形成配对细胞系作为实验样本，不仅可随时无限量培养获得，且由于实验样本的细胞成分均一，保证了分离结果的精确性和准确性。本发明方法还通过基因表达谱芯片技术分离出了这些在乳腺癌转移中参与新陈代谢作用的基因，这些基因的表达和功能的确认，在乳腺癌药物或基因治疗方面以及在用于制备肿瘤转移芯片、制备抗肿瘤转移基因疫苗及建立抗肿瘤转移药物筛选技术平台方面，都将有着重要的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN1563376A
公开(公告)日：2005-01-12
申请号：CN200410019057.2
申请日：2004-04-20
申请人： 南开大学
摘要： 本发明公开了一种人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法，所述人肝癌转移亚克隆细胞系是用下述方法建立的：将人肝癌细胞H7402单细胞悬液接种于SCID鼠；确认转移部位为肺脏；原代培养；传代培养，当细胞传代到第三代以后，将培养液中的胎牛血清浓度降为10％，细胞生长良好，形态逐渐均一，即建立了一种来源于亲本人肝癌细胞H7402的肝癌转移亚克隆细胞系，并与亲本细胞形成配对关系，为肝癌细胞转移的研究提供新的实验材料；可用于筛选肝癌转移相关基因；可用于筛选肝癌转移相关蛋白；可用于筛选抗肿瘤转移药物；可用于肿瘤转移分子机理的研究；可用于进行肿瘤转移DNA疫苗的研究。
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公开(公告)号：CN1473930A
公开(公告)日：2004-02-11
申请号：CN03130264.5
申请日：2003-06-27
申请人： 南开大学
IPC分类号： C12N5/00
摘要： 本发明涉及癌细胞系，特别是一种高转移倾向的人乳腺癌细胞系及其建立的方法，属动物细胞系领域。有关肿瘤的侵袭与转移的机制目前尚不十分清楚。需要建立肿瘤转移动物模型对其进行深入的研究。以往在肿瘤转移动物模型中应用裸鼠，在本发明中，我们采用SCID小鼠作为实验对象，取乳腺癌亲本MCF－7细胞悬液(5×107/0.2m1)皮下接种于SCID小鼠肩部，接种MCF－7细胞68天后，将SCID鼠处死，取出肺脏，进行原代培养，当由组织块中长出的细胞能够长满培养瓶底部后，进行细胞传代，将该细胞命名为LM－MCF－7。当LM－MCF－7细胞体外培养20代后，将瘤细胞再回注到SCID鼠皮下，方法同前；成瘤率达到100％(5/5只)，并且在SCID鼠的肺脏、肾脏、脾脏、骨髓、淋巴结和心脏等脏器出现广泛转移。
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公开(公告)号：CN1974789A
公开(公告)日：2007-06-06
申请号：CN200610130108.8
申请日：2006-12-13
申请人： 南开大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明公开了一种应用乳腺癌转移相关基因基因芯片建立筛选抗乳腺癌转移药物的方法，与以往筛选抗肿瘤转移药物的方法相比，该方法包括：首先在抗乳腺癌转移药物作用下，通过流式细胞仪观察候选抗癌药物抑制高转移倾向的乳腺癌LM－MCF－7细胞增殖的有效浓度；通过“伤口愈合”实验初步筛选出该药物是否具有抑制肿瘤细胞迁移的作用；然后，应用建立的“乳腺癌转移相关基因基因芯片”，在基因水平上观察乳腺癌转移相关基因表达谱的变化，反向推测抗乳腺癌转移药物的作用和作用的靶基因。最后，在动物水平上进一步验证药物对肿瘤转移是否具有抑制作用。上述方法一方面从基因表达谱水平观察抗癌药物对乳腺癌转移相关基因的影响；另一方面从细胞水平和动物水平观察抗癌药物是否具有抑制乳腺癌细胞迁移和转移的作用。进而，在筛选出具有抗乳腺癌转移作用药物的同时，也阐明了药物作用的基因靶点，有利于揭示其分子机制。
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公开(公告)号：CN1810983A
公开(公告)日：2006-08-02
申请号：CN200510013155.X
申请日：2005-01-28
申请人： 南开大学
摘要： 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选在乳腺癌转移中参与细胞黏附作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM－MCF－7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF－7形成配对细胞系作为实验样本，不仅可随时无限量培养获得，且由于实验样本的细胞成分均一，保证了分离结果的精确性和准确性。本发明方法还通过基因表达谱芯片技术分离出了这些参与细胞黏附作用的基因，这些基因的表达和功能的确认，在乳腺癌药物或基因治疗方面以及在用于制备肿瘤转移芯片、制备抗肿瘤转移基因疫苗及建立抗肿瘤转移药物筛选技术平台方面，都将有着重要的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN1810980A
公开(公告)日：2006-08-02
申请号：CN200510013152.6
申请日：2005-01-28
申请人： 南开大学
摘要： 本发明公开了一种高精确度、高通量筛在乳腺癌转移中参与转运作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM－MCF－7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF－7形成配对细胞系作为实验样本，不仅可随时无限量培养获得，且由于实验样本的细胞成分均一，保证了分离结果的精确性和准确性。本发明方法还通过基因表达谱芯片技术分离出了这些参与转运作用的基因，这些基因的表达和功能的确认，在乳腺癌药物或基因治疗方面以及在用于制备肿瘤转移芯片、制备抗肿瘤转移基因疫苗及建立抗肿瘤转移药物筛选技术平台方面，都将有着重要的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN1810979A
公开(公告)日：2006-08-02
申请号：CN200510013150.7
申请日：2005-01-28
申请人： 南开大学
摘要： 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选筛选乳腺癌转移相关基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM－MCF－7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF－7形成配对细胞系作为实验样本，不仅可随时无限量培养获得，且由于实验样本的细胞成分均一，保证了分离结果的精确性和准确性。本发明方法还通过基因表达谱芯片技术分离出了与人乳腺癌转移相关基因，这些相关基因的表达和功能的确认，在乳腺癌药物或基因治疗方面以及在用于制备肿瘤转移芯片、制备抗肿瘤转移基因疫苗及建立抗肿瘤转移药物筛选技术平台方面，都将有着重要的实际应用价值。
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