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    一种抑制肿瘤细胞增殖的重组腺病毒载体的构建方法
    1.
    发明公开
    一种抑制肿瘤细胞增殖的重组腺病毒载体的构建方法 无效

    公开(公告)号：CN104450786A

    公开(公告)日：2015-03-25

    申请号：CN201410784351.6

    申请日：2014-12-16

    Applicant: 南方医科大学

    Inventor： 庞建新 ,  邬贤 ,  丘玉昌 ,  曹莹 ,  谢宝平 ,  周平正 ,  王杞妹 ,  陈嘉盛 ,  李红卫

    IPC: C12N15/861 ,  C12N15/66 ,  A61P35/00

    Abstract: 本发明涉及一种抑制肿瘤细胞增殖的重组腺病毒载体的构建方法，该方法由以下步骤组成：(1)取如SEQ ID NO.1所示的N端带有6个his标签的人端粒酶C端第936-1132片段的编码序列，经双酶切、连接反应克隆至含有绿色荧光蛋白基因GFP的穿梭质粒中，得到重组穿梭质粒；(2)将得到的重组穿梭质粒进行PmeⅠ酶切线性化，通过与骨架质粒PAdEasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组，得到重组腺病毒质粒；(3)将得到的重组腺病毒质粒转染HEK293细胞进行重组包装，收集具有绿色荧光的细胞，得到细胞包装的重组腺病毒；(4)将得到细胞包装的重组腺病毒采用氯化铯梯度离心法进行纯化，得到重组腺病毒载体。本方法所得到的重组腺病毒载体不仅可抑制肿瘤细胞增殖，而且起效快。

    一种筛选降尿酸小分子化合物的方法
    2.
    发明授权
    一种筛选降尿酸小分子化合物的方法 有权

    公开(公告)号：CN110487877B

    公开(公告)日：2021-08-10

    申请号：CN201910622959.1

    申请日：2019-07-11

    Applicant: 南方医科大学

    Inventor： 吴婷 ,  陈演瑜 ,  庞建新 ,  周平正 ,  赵泽安 ,  李咏梅 ,  李璐

    IPC: G01N27/416

    Abstract: 本发明公开了一种基于膜片钳技术筛选促尿酸排泄的降尿酸小分子化合物的方法，包括以下步骤：构建表达GLUT9基因的重组质粒；将上述重组质粒瞬时转染至HEK293T细胞；18‑24h后，利用膜片钳技术记录表达GLUT9细胞转运尿酸时电流的变化；通过阳性药苯溴马隆和丙磺舒，与阴性药RDEA3170、别嘌呤醇验证模型可靠性。本发明的操作简单，简便快捷；结果稳定可靠，重现性好；相对于现有的利用爪蟾卵母细胞摄取同位素的检测方法用时更短、成本更低，可实现GLUT9抑制剂的高通量筛选。

    一种筛选降尿酸小分子化合物的方法
    3.
    发明公开
    一种筛选降尿酸小分子化合物的方法 有权

    公开(公告)号：CN110487877A

    公开(公告)日：2019-11-22

    申请号：CN201910622959.1

    申请日：2019-07-11

    Applicant: 南方医科大学

    Inventor： 吴婷 ,  陈演瑜 ,  庞建新 ,  周平正 ,  赵泽安 ,  李咏梅 ,  李璐

    IPC: G01N27/416

    Abstract: 本发明公开了一种基于膜片钳技术筛选促尿酸排泄的降尿酸小分子化合物的方法，包括以下步骤：构建表达GLUT9基因的重组质粒；将上述重组质粒瞬时转染至HEK293T细胞；18-24h后，利用膜片钳技术记录表达GLUT9细胞转运尿酸时电流的变化；通过阳性药苯溴马隆和丙磺舒，与阴性药RDEA3170、别嘌呤醇验证模型可靠性。本发明的操作简单，简便快捷；结果稳定可靠，重现性好；相对于现有的利用爪蟾卵母细胞摄取同位素的检测方法用时更短、成本更低，可实现GLUT9抑制剂的高通量筛选。

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