公开(公告)号：CN105671016B

公开(公告)日：2019-07-26

申请号：CN201610115975.8

申请日：2016-03-02

申请人： 吉林农业大学

发明人： 王秀然 ,  许春晓 ,  卢天成 ,  王晓龙 ,  王浩 ,  王岩 ,  李海燕 ,  李校堃 ,  孙喆 ,  李晓薇 ,  孙天旭 ,  王法微 ,  杨晶 ,  王艳芳 ,  刘秀明 ,  付玉芹

IPC分类号： C12N9/14 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04

摘要： 提高S‑腺苷‑L‑半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白，涉及蛋白免疫原性领域，其目的是为了给布鲁氏菌提供更好的疫苗候选抗原。该方法为：4℃将六糖与高碘酸钠按摩尔比1:1混合在pH 6.0的PBS中反应1h；室温将EDC与NHS按摩尔比1:1加入上述体系中反应6h；室温将ahcy蛋白按ahcy蛋白与六糖摩尔比1:1000加入上述体系中过夜反应；4℃在50mmol/L、pH8.0～9.6的碳酸盐溶液中透析5h，再在50mmol/L、pH7.0～8.0的PBS中透析一天。获得的六糖修饰ahcy蛋白的刺激增殖指数、抗体效价、刺激小鼠脾淋巴细胞后产生的IFN‑γ和IL‑2的量都大大提高。

公开(公告)号：CN108101965A

公开(公告)日：2018-06-01

申请号：CN201711369745.5

申请日：2017-12-19

申请人： 吉林农业大学

发明人： 王秀然 ,  王晓龙 ,  卢天成 ,  王岩 ,  许春晓 ,  付玉芹 ,  李思圆 ,  孙喆 ,  胡祥坤 ,  刘思阳 ,  王茗宇 ,  李海燕 ,  杨艳玲

IPC分类号： C07K14/00 ,  C07K1/107 ,  A61K39/385

摘要： 一种降低免疫原性的组合物及其制备方法和应用，涉及蛋白质的免疫原性领域，本发明包括：将50mmol/L高碘酸钠与几丁寡糖以摩尔比为1:1的比例进行氧化反应；按EDC和NHS的摩尔比为1:1的比例向上述反应体系中加入EDC和NHS；按候选抗原蛋白与几丁寡糖的摩尔比为1:1000的投料比向上述反应体系中加入候选抗原蛋白，室温过夜反应，将最终反应体系补足至5ml，蛋白质的侧链氨基基团会替代酰胺键形成糖蛋白；加入透析袋，将透析袋置于50mmol/L、PH 9.0的碳酸盐缓冲液中；用PBS，4℃透析过夜，透析结束后收集袋内样品，获得几丁寡糖修饰的候选抗原蛋白。本发明可显著降低蛋候选抗原蛋白的免疫原性。

公开(公告)号：CN105671016A

公开(公告)日：2016-06-15

申请号：CN201610115975.8

申请日：2016-03-02

申请人： 吉林农业大学

发明人： 王秀然 ,  许春晓 ,  卢天成 ,  王晓龙 ,  王浩 ,  王岩 ,  李海燕 ,  李校堃 ,  孙喆 ,  李晓薇 ,  孙天旭 ,  王法微 ,  杨晶 ,  王艳芳 ,  刘秀明 ,  付玉芹

IPC分类号： C12N9/14 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04

摘要： 提高S-腺苷-L-半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白，涉及蛋白免疫原性领域，其目的是为了给布鲁氏菌提供更好的疫苗候选抗原。该方法为：4℃将六糖与高碘酸钠按摩尔比1:1混合在pH 6.0的PBS中反应1h；室温将EDC与NHS按摩尔比1:1加入上述体系中反应6h；室温将ahcy蛋白按ahcy蛋白与六糖摩尔比1:1000加入上述体系中过夜反应；4℃在50mmol/L、pH8.0～9.6的碳酸盐溶液中透析5h，再在50mmol/L、pH7.0～8.0的PBS中透析一天。获得的六糖修饰ahcy蛋白的刺激增殖指数、抗体效价、刺激小鼠脾淋巴细胞后产生的IFN-γ和IL-2的量都大大提高。