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公开(公告)号:CN108314709A
公开(公告)日:2018-07-24
申请号:CN201810239679.8
申请日:2018-03-22
申请人: 吉林农业大学
IPC分类号: C07K14/23 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/22 , C07K1/16 , C12N15/31 , C12N15/81 , A61K39/39 , A61K39/10 , A61P31/04
摘要: 一种重组糖基化蛋白P39及其制备方法和应用,涉及重组蛋白领域。本发明包括:对p39基因进行克隆,将PCR片段与克隆载体pMD-19T(Simple)相连,经测序和酶切验证正确后将目的片段与真核表达载体pPICZαA相连构建重组表达质粒pPICZαA-P39;电转化法将质粒pPICZαA-P39转化至毕赤酵母GS115感受态细胞,经诱导表达,亲和层析纯化,分子筛进一步分离纯化后经western blot验证即为目的蛋白,最佳发酵条件为:pH6、磷酸盐浓度0.02M、甲醇诱导浓度1%、诱导72h,纯化后的重组蛋白P39浓度为5mg/ml。本发明为布鲁氏菌流行性疾病免疫预防奠定基础。
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公开(公告)号:CN108101965A
公开(公告)日:2018-06-01
申请号:CN201711369745.5
申请日:2017-12-19
申请人: 吉林农业大学
IPC分类号: C07K14/00 , C07K1/107 , A61K39/385
摘要: 一种降低免疫原性的组合物及其制备方法和应用,涉及蛋白质的免疫原性领域,本发明包括:将50mmol/L高碘酸钠与几丁寡糖以摩尔比为1:1的比例进行氧化反应;按EDC和NHS的摩尔比为1:1的比例向上述反应体系中加入EDC和NHS;按候选抗原蛋白与几丁寡糖的摩尔比为1:1000的投料比向上述反应体系中加入候选抗原蛋白,室温过夜反应,将最终反应体系补足至5ml,蛋白质的侧链氨基基团会替代酰胺键形成糖蛋白;加入透析袋,将透析袋置于50mmol/L、PH 9.0的碳酸盐缓冲液中;用PBS,4℃透析过夜,透析结束后收集袋内样品,获得几丁寡糖修饰的候选抗原蛋白。本发明可显著降低蛋候选抗原蛋白的免疫原性。
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公开(公告)号:CN107616500A
公开(公告)日:2018-01-23
申请号:CN201711025763.1
申请日:2017-10-27
申请人: 吉林农业大学
IPC分类号: A23L33/10 , A23L33/125 , A23L31/00 , C12N15/70 , C12P19/04 , C12P19/12 , C12P19/00 , A61K36/068 , A61P3/06 , A61K31/702
摘要: 蛹虫草低聚果糖组合物及其制备方法和应用,涉及农产品加工及新型食品的制备领域,填补了蛹虫草在降血脂、降胆固醇领域中的应用空白。本发明包括:将蛹虫草和水混合泡发过夜;在95~100℃下煎煮1~3h获得提取液;过滤,滤液在60~100℃下浓缩至步骤一中水体积的1/20,获得浓缩液;将蛹虫草粉碎至80~120目获得蛹虫草粉;向浓缩液中加入蛹虫草粉,蛹虫草粉与步骤一中蛹虫草质量相同,在95~100℃下煎煮0.5~2h,匀速搅拌,获得混合液;按蛹虫草粉与低聚果糖质量比为10:1向混合液中加入低聚果糖混匀,获得蛹虫草低聚果糖组合物。该组合物能够显著降低血压胆固醇及低密度脂蛋白,提高高密度脂蛋白含量。
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公开(公告)号:CN107236039A
公开(公告)日:2017-10-10
申请号:CN201710579816.8
申请日:2017-07-17
申请人: 吉林农业大学
摘要: 重组Wzt蛋白兔血清多克隆抗体及其制备方法,涉及抗体制备领域,填补了应用重组Wzt蛋白制备特异性多克隆抗体的空白。该多克隆抗体的制备方法包括:将重组Wzt蛋白与等体积的弗氏完全佐剂混合乳化后,在雌性家兔背部进行皮下多点注射;二次免疫:一周后,将重组Wzt蛋白与等体积的弗氏不完全佐剂混合乳化后,在雌性家兔背部进行皮下多点注射;按二次免疫过程每间隔一周进行三次、四次免疫;每次免疫后采集雌性家兔耳静脉血,检测兔血清抗体效价;第四次免疫一周后,收集兔全血,离心收集上清得兔血清,经纯化后得到重组Wzt蛋白兔血清多克隆抗体。该重组Wzt蛋白兔血清多克隆抗体特异性良好,可用于检测布鲁氏菌Wzt蛋白。
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