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公开(公告)号：CN1903372A
公开(公告)日：2007-01-31
申请号：CN200510021356.4
申请日：2005-07-29
IPC分类号： A61K48/00 , A61K39/215 , A61P31/14
摘要： 本发明涉及动物医药生物工程研究领域，是一种禽传染性支气管炎三基因组合DNA疫苗及应用。本发明的目的是将构建并保存的禽传染性支气管炎病毒中国分离株的S1、M、N结构基因的真核表达质粒pIBS1、pIBM和pIBN，按照一定的比例进行组合，研制成禽传染性支气管炎三基因组合的DNA疫苗，并对其免疫原性进行了研究。本发明进行了真核表达质粒生产的培养基和培养条件筛选，确定出含有质粒IBS1、pIBM和pIBN的工程菌的最优化培养基和培养条件。
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公开(公告)号：CN1903370A
公开(公告)日：2007-01-31
申请号：CN200510021325.9
申请日：2005-07-27
摘要： 本发明涉及动物医药生物工程研究领域，是一种禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBS1及应用。本发明根据Genbank中注册的禽传染性支气管炎病毒S1基因序列设计引物，以S1基因的重组质粒pUCS1为模板，用PCR方法扩增禽冠状病毒中国分离株SAIBk株的S1基因，并将PCR产物经HindIII和XhoI双酶切定向插入以HindIII和XhoI双酶切处理的真核表达载体pcDNA3.1(+)中，经双酶切和PCR鉴定，成功的构建了禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBk株的S1基因真核表达质粒，研制出禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBS1。该禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBS1可用于预防禽传染性支气管炎。
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公开(公告)号：CN1313478C
公开(公告)日：2007-05-02
申请号：CN200410081443.4
申请日：2004-12-10
摘要： 本发明涉及分子生物学研究领域，为一种简易快速大规模提纯质粒DNA的新方法。本方法所用试剂包括菌体清洗液、菌体重悬缓冲液、菌体裂解液、裂解中和液、异丙醇、硅藻土悬液、蛋白洗涤液、80%乙醇、DNA稀释液九种试剂和50ml-l00ml离心管。本发明与现有提纯方法比较操作简便，一次提取仅需90分钟。本发明结果稳定，得量高，纯度好，无蛋白质和RNA污染，与应用Qiagen柱式纯化试剂盒和国产赛百盛树脂型试剂盒提取相同的质粒DNA比较，所得DNA的电泳条带同样清晰，无RNA混杂。本发明价格低廉，不需用酚和氯仿等有毒试剂，经放大可用于DNA疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN1660878A
公开(公告)日：2005-08-31
申请号：CN200410081443.4
申请日：2004-12-10
摘要： 本发明涉及分子生物学研究领域，为一种简易快速大规模提纯质粒DNA的新方法。本方法所用试剂包括菌体清洗液、菌体重悬缓冲液、菌体裂解液、裂解中和液、异丙醇、硅藻土悬液、蛋白洗涤液、80％乙醇、DNA稀释液九种试剂和50ml－100ml离心管。本发明与现有提纯方法比较操作简便，一次提取仅需90分钟。本发明结果稳定，得量高，纯度好，无蛋白质和RNA污染，与应用Qiagen柱式纯化试剂盒和国产赛百盛树脂型试剂盒提取相同的质粒DNA比较，所得DNA的电泳条带同样清晰，无RNA混杂。本发明价格低廉，不需用酚和氯仿等有毒试剂，经放大可用于DNA疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN103820951A
公开(公告)日：2014-05-28
申请号：CN201410076613.3
申请日：2014-03-04
申请人： 王红宁
发明人： 王红宁
摘要： 本发明公开了一种全自动绕底线机，用于向线芯上卷绕底线，它包括底座、容置所述底线的绕线工位、推芯装置、设置在推芯装置上方的的线芯滑槽、内腔设有切线轮的固定架、绕线装置，其中推芯装置包括由进线电机驱动且端部在绕线工位和线芯滑槽之间做往复运动的推芯杆，绕线装置包括与固定架平行的支架、与推芯杆垂直的滑动装置、沿滑动装置往复滑动的绕线电机和顶线板，支架和固定架分别位于绕线工位的两侧，且切线轮的径向与推芯杆平行，轴向与绕线电机同轴，当绕线电机转轴端部位于固定架内时，绕线电机启动；绕线工位内设有与绕线电机和进线电机分别电连接的红外感应开关。本发明结构简单，通过往复运动实现连续的卷线切线，使用方便，安全可靠。
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公开(公告)号：CN1904054A
公开(公告)日：2007-01-31
申请号：CN200510021324.4
申请日：2005-07-27
摘要： 本发明涉及动物医药生物工程研究领域，是一种禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBM及应用。本发明根据Genbank中注册的禽传染性支气管炎病毒M基因序列设计引物，以M基因的重组质粒pUCM为模板，用PCR方法扩增禽冠状病毒中国分离株SAIBk株的M基因，并将PCR产物经HindIII和XhoI双酶切定向插入以HindIII和XhoI双酶切处理的真核表达载体pcDNA3.1(+)中，经双酶切和PCR鉴定，成功的构建了禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBk株的M基因真核表达质粒，研制出禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBM。该禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBM可用于预防禽传染性支气管炎。
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公开(公告)号：CN1903371A
公开(公告)日：2007-01-31
申请号：CN200510021326.3
申请日：2005-07-27
摘要： 本发明涉及动物医药生物工程研究领域，是一种禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBN及应用。本发明根据Genbank中注册的禽传染性支气管炎病毒N基因序列设计引物，以N基因的重组质粒pUCN为模板，用PCR方法扩增禽冠状病毒中国分离株SAIBk株的N基因，并将PCR产物经HindIII和XhoI双酶切定向插入以HindIII和XhoI双酶切处理的真核表达载体pcDNA3.1(+)中，经双酶切和PCR鉴定，成功的构建了禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBk株的N基因真核表达质粒，研制出禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBN。该禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBN可用于预防禽传染性支气管炎。
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公开(公告)号：CN103820951B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201410076613.3
申请日：2014-03-04
申请人： 王红宁
发明人： 王红宁
摘要： 本发明公开了一种全自动绕底线机，用于向线芯上卷绕底线，它包括底座、容置所述底线的绕线工位、推芯装置、设置在推芯装置上方的线芯滑槽、内腔设有切线轮的固定架、绕线装置，其中推芯装置包括由进线电机驱动且端部在绕线工位和线芯滑槽之间做往复运动的推芯杆，绕线装置包括与固定架平行的支架、与推芯杆垂直的滑动装置、沿滑动装置往复滑动的绕线电机和顶线板，支架和固定架分别位于绕线工位的两侧，且切线轮的径向与推芯杆平行，轴向与绕线电机同轴，当绕线电机转轴端部位于固定架内时，绕线电机启动；绕线工位内设有与绕线电机和进线电机分别电连接的红外感应开关。本发明结构简单，通过往复运动实现连续的卷线切线，使用方便，安全可靠。
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公开(公告)号：CN1644676A
公开(公告)日：2005-07-27
申请号：CN200410081442.X
申请日：2004-12-10
摘要： 本研究属于生物技术领域。采用PCR技术对来源于自主分离隆的黑曲霉(Arpergillusniger)N25的植酸酶phyA基因(GenBank注册号AF218813)的表达片段进行定点突变，构建含突变基因phyAm的酵母表达载体pPIC9k－phyAm，转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，获得重组基因工程酵母菌株PP－NPm－8。该菌种经传代实验证实具有良好的遗传稳定性。本实验室以植酸酶phyAm基因重组酵母菌株PP－NPm－8工程菌为对象。研究了麦芽汁培养基和麦芽高温浸提培养基。培养基成本比BMGY/BMMY降低了218倍。对基因工程菌PP－NPm－8的培养方法进行研究，获得最佳种龄、接种量、诱导时间、培养基pH、甲醇诱导浓度。在此条件下所培养的工程菌酶活可达85067U/ml(在37℃、pH4.6的条件下，1分钟内从0.0051mol/L的植酸钠溶液中释放出1nmol无机磷所需要的植酸酶量为一个酶活性单位)。
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公开(公告)号：CN210104244U
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201920334986.4
申请日：2019-03-14
申请人： 王红宁
发明人： 王红宁
IPC分类号： D05C13/06
摘要： 本实用新型公开了一种全自动绕底线机驱动机构改进，被驱动电机驱动的主轴和分别套设在主轴上的漏料检测凸轮、主轴停止开关凸轮、绕线电机启动开关凸轮、从动轮夹料凸轮、推芯凸轮、剪刀凸轮，以及拨杆轴和一端分别铰接套设在拨杆轴上的从动轮夹料拨杆、推芯拨杆和剪刀拨杆，其中在漏料检测凸轮的侧边沿设有漏料检测开关，在主轴停止开关凸轮的侧边沿设有主轴电机停止开关，在绕线电机启动开关凸轮的侧边设有绕线电机启动开关，从动轮夹料拨杆、推芯拨杆、剪刀拨杆的另一端保持朝向各相应凸轮运动的趋势且其上分别设有突部。本实用新型的驱动结构相应简化，从而提高使用的方便性和安全可靠性，卷线操作的可控性和精确度高。
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