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公开(公告)号：CN107475392B
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN201710748543.5
申请日：2017-08-28
申请人： 国家纳米科学中心
IPC分类号： C12Q1/6886 , C12Q1/6858 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及生物技术和医学领域，具体公开了一种检测单细胞EGFR基因突变的引物组合及其应用。本发明采用高特异性扩增引物和多重扩增体系，一次性获取EGFR基因18、19、20和21号外显子上的所有常见突变，并可及时发现新型突变。使用本发明所述引物组合进行单细胞EGFR基因突变的检测，特异性好，灵敏度高，无需提取DNA，可对低至单个细胞中的两个拷贝进行扩增，有助于更系统地研究肿瘤异质性。
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公开(公告)号：CN107497503A
公开(公告)日：2017-12-22
申请号：CN201710597990.5
申请日：2017-07-20
申请人： 国家纳米科学中心
CPC分类号： B01L3/5027 , B01L2200/10 , B01L2300/0887 , C12Q1/6886 , C12Q2600/158 , G01N21/6428
摘要： 本发明提供一种用于研究单肿瘤细胞侵袭和上皮-间质转化过程能力的微流控芯片，所述微流控芯片包括依次叠放在一起并相互密封的四层结构，由上至下分别为顶盖、微流体通道层、带有微孔阵列的基板以及带有腔体组的底板。本发明还提供一种与所述芯片配套的用于单细胞检测的系统。本发明的微流控芯片及其相应的检测系统可以快速、简便和廉价地分选为单个细胞并进行侵袭能力和上皮-间质转化研究，并对目的单细胞进行基因分析。
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公开(公告)号：CN107446949A
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201710614112.X
申请日：2017-07-25
申请人： 国家纳米科学中心
CPC分类号： C07K14/47 , C12N15/66 , C12N15/85 , G01N33/5011 , G01N2500/10
摘要： 本发明提供一种PLS3重组蛋白真核表达质粒及其构建方法和应用。所述PLS3重组蛋白真核表达质粒为携带含His标签的PLS3重组蛋白编码基因的真核表达质粒，所述真核表达质粒还携带有荧光报告基因。采用上述表达质粒转染真核细胞，得到的细胞系可用于细胞内吞、迁移、侵袭以及化疗药物耐药等细胞生命功能的研究。该真核表达质粒还可应用于真核Plastin-3蛋白的提取，用于Plastin-3相互作用的蛋白筛选以及Plastin-3特异性结合的多肽的筛选等。
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公开(公告)号：CN106065391A
公开(公告)日：2016-11-02
申请号：CN201610576644.4
申请日：2016-07-20
申请人： 国家纳米科学中心 , 北京泛嘉远杰生物科技有限公司
CPC分类号： C12M47/04 , B01L3/5027 , B01L2200/10 , C12Q1/6806
摘要： 本发明提供一种用于单细胞分选和单细胞全基因组扩增的微流控芯片，所述微流控芯片包括依次叠放在一起并相互密封的四层结构，由上至下分别为顶盖、微阀控制层、阀片层以及流道层；所述微流控芯片的底部外置磁铁。本发明还提供一种与所述芯片配套的用于细胞筛选、鉴定、单细胞扩增和分析的系统。本发明的微流控芯片及其相应的检测系统可以快速、简便和廉价的从大量细胞中分选出目的细胞，并对其中的单个细胞进行全基因组DNA扩增和分析。
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公开(公告)号：CN107497503B
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN201710597990.5
申请日：2017-07-20
申请人： 国家纳米科学中心
摘要： 本发明提供一种用于研究单肿瘤细胞侵袭和上皮‑间质转化过程能力的微流控芯片，所述微流控芯片包括依次叠放在一起并相互密封的四层结构，由上至下分别为顶盖、微流体通道层、带有微孔阵列的基板以及带有腔体组的底板。本发明还提供一种与所述芯片配套的用于单细胞检测的系统。本发明的微流控芯片及其相应的检测系统可以快速、简便和廉价地分选为单个细胞并进行侵袭能力和上皮‑间质转化研究，并对目的单细胞进行基因分析。
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公开(公告)号：CN106754240B
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201611053450.2
申请日：2016-11-24
申请人： 国家纳米科学中心
IPC分类号： C12M1/00 , C12M1/34 , G01N33/574
摘要： 本发明提供一种用于捕获和鉴定循环肿瘤细胞的微流控芯片，其包括：依次叠放在一起并相互密封的三层结构，由上至下分别为微阀控制层、微阀薄膜层以及带有多个功能区的基板。微阀控制层上设有贯通控制层的孔，用于样品流入和流出，以及气体通道，用于气体通入；微阀薄膜层，在气体通道对应的薄膜层区域，在气压控制下可发生弯曲形变；基板上包含三个功能区，分别为杂质过滤区、细胞分离区和单细胞定位和荧光鉴定区。上述三个功能区由三条流体通道连接，每条流体通道的开启与闭合由单独的气体微阀控制。本发明实现了癌症患者血液中循环肿瘤细胞捕获、鉴定和自动化计数，为循环肿瘤细胞分析领域提供了一种有效手段。
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公开(公告)号：CN107475392A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710748543.5
申请日：2017-08-28
申请人： 国家纳米科学中心
摘要： 本发明涉及生物技术和医学领域，具体公开了一种检测单细胞EGFR基因突变的引物组合及其应用。本发明采用高特异性扩增引物和多重扩增体系，一次性获取EGFR基因18、19、20和21号外显子上的所有常见突变，并可及时发现新型突变。使用本发明所述引物组合进行单细胞EGFR基因突变的检测，特异性好，灵敏度高，无需提取DNA，可对低至单个细胞中的两个拷贝进行扩增，有助于更系统地研究肿瘤异质性。
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公开(公告)号：CN106148187A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201610576642.5
申请日：2016-07-20
申请人： 国家纳米科学中心 , 北京泛嘉远杰生物科技有限公司
CPC分类号： B01L3/502753 , B01L2200/0647 , B01L2200/10 , B01L2300/0681 , B01L2300/0832 , B01L2300/0864 , B01L2300/088 , B01L2300/0887 , B01L2400/0415 , C12N5/0693 , C12Q1/6886 , C12Q2600/156 , G01N33/573 , G01N2333/9121
摘要： 本发明提供一种用于表达EGFR的单细胞分选和多基因位点检测的微流控芯片，所述微流控芯片包括依次叠放在一起并相互密封的四层结构，由上至下分别为顶盖、微流体通道层、带有微孔阵列的基板以及带有腔体组的底板。本发明还提供一种与所述芯片配套的用于EGFR基因多个突变位点单细胞水平检测的系统。本发明的微流控芯片及其相应的检测系统可以快速、简便和廉价的从大量细胞中分选出目的细胞，并对其中的单个细胞进行EGFR多基因位点分析。
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公开(公告)号：CN106754240A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611053450.2
申请日：2016-11-24
申请人： 国家纳米科学中心
IPC分类号： C12M1/00 , C12M1/34 , G01N33/574
CPC分类号： B01L3/50273 , B01L3/502753 , B01L3/502761 , B01L2200/10 , B01L2300/0887 , G01N33/56966 , G01N33/57492
摘要： 本发明提供一种用于捕获和鉴定循环肿瘤细胞的微流控芯片，其包括：依次叠放在一起并相互密封的三层结构，由上至下分别为微阀控制层、微阀薄膜层以及带有多个功能区的基板。微阀控制层上设有贯通控制层的孔，用于样品流入和流出，以及气体通道，用于气体通入；微阀薄膜层，在气体通道对应的薄膜层区域，在气压控制下可发生弯曲形变；基板上包含三个功能区，分别为杂质过滤区、细胞分离区和单细胞定位和荧光鉴定区。上述三个功能区由三条流体通道连接，每条流体通道的开启与闭合由单独的气体微阀控制。本发明实现了癌症患者血液中循环肿瘤细胞捕获、鉴定和自动化计数，为循环肿瘤细胞分析领域提供了一种有效手段。
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