-
公开(公告)号：CN111909914B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202010695299.2
申请日：2020-07-19
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为一种来源于酿脓链球菌的CRISPR核酸酶SpCas9的高PAM兼容性截短型变异体txCas9及其应用。本发明中的高PAM兼容性截短型变异体txCas9核酸酶属于CRISPR‑Cas9系统。txCas9核酸酶是将高PAM兼容性xCas9核酸酶的第180位到299位的氨基酸截掉后重组所得。该高PAM兼容性截短型变异体txCas9不仅具有与野生型CRISPR‑Cas9核酸酶相当的基因编辑活性，而且能够识别NGN、GAA、GAT PAM，有效扩宽了CRISPR‑Cas9核酸酶的靶向范围。重要的是，该小型化Cas9核酸酶适合使用装载容量有限的腺病毒载体进行体内运输，因而在生物医药的体内精准编辑方面具有更大的应用潜力。
-
公开(公告)号：CN111893104B
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202010666107.5
申请日：2020-07-12
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为一种基于结构的CRISPR蛋白的优化设计方法。本发明基于已解析的CRISPR/Cas9蛋白结构，首先通过分析和比较，找出对Cas9某一功能有重要影响的氨基酸位点；然后结合Rosetta优化Cas9的Protein‑DNA相互作用界面，最后设计并获得新型突变体，成功地获得一个突变体yCas9。该突变体具有xCas9相当的剪切活性：宽泛的PAM识别范围，可识别NGG、NGA、NGT、NGC、GAA和GAT，且在基因编辑时脱靶率低。因此，yCas9在功能上可与xCas9并驾齐驱，是一个有潜在应用价值的基因编辑工具，证明本设计方法的有效性和实用性。
-
公开(公告)号：CN110272881B
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201910581265.8
申请日：2019-06-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为一种来源于酿脓链球菌的CRISPR核酸酶SpCas9的截短型高特异性变异体及其应用。本发明中的CRISPR‑Cas9（TSpCas9‑V1/V2）核酸酶属于CRISPR‑Cas9系统，TSpCas9‑V1核酸酶将截短型CRISPR‑Cas9（TSpCas9）核酸酶的第863位的氨基酸H突变成N，TSpCas9‑V2核酸酶将截短型CRISPR‑Cas9（TSpCas9）核酸酶的第862位的氨基酸H突变成A，将第863位的氨基酸H突变成N；该截短型高特异性变异体具有与野生型CRISPR‑Cas9核酸酶相当的基因编辑活性，能够降低基因编辑中的脱靶，因而能用于对基因组DNA片段特定位置的精准编辑。
-
公开(公告)号：CN110241099B
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201910488075.1
申请日：2019-06-05
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为来源于酿脓链球菌的CRISPR核酸酶SpCas9的截短变异体及其应用。本发明中，CRISPR‑Cas9（TSpCas9）核酸酶属于CRISPR‑Cas9系统，具有野生型CRISPR‑Cas9核酸酶相当的剪切活性，所述CRISPR‑Cas9（TSpCas9）核酸酶是将野生型CRISPR‑Cas9核酸的氨基酸序列截掉120个即第180位到299位的氨基酸后重组所得；所述野生型CRISPR‑Cas9核酸酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；或者所述CRISPR‑Cas9核酸酶含有如SEQ ID NO.7所示90%的氨基酸序列，即SEQ ID NO.15。该截短变异体可用于基因组编辑、基因打靶、基因组工程、表观基因组工程、基因治疗与体外诊断。
-
公开(公告)号：CN111893104A
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN202010666107.5
申请日：2020-07-12
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为一种基于结构的CRISPR蛋白的优化设计方法。本发明基于已解析的CRISPR/Cas9蛋白结构，首先通过分析和比较，找出对Cas9某一功能有重要影响的氨基酸位点；然后结合Rosetta优化Cas9的Protein-DNA相互作用界面，最后设计并获得新型突变体，成功地获得一个突变体yCas9。该突变体具有xCas9相当的剪切活性：宽泛的PAM识别范围，可识别NGG、NGA、NGT、NGC、GAA和GAT，且在基因编辑时脱靶率低。因此，yCas9在功能上可与xCas9并驾齐驱，是一个有潜在应用价值的基因编辑工具，证明本设计方法的有效性和实用性。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110241098B
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201910488074.7
申请日：2019-06-05
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为一种来源于酿脓链球菌的CRISPR核酸酶SpCas9的截短型高特异性变体及其应用。本发明Cas9核酸酶变体（THSpCas9），属于CRISPR‑Cas9系统，具有野生型CRISPR‑Cas9核酸酶基因编辑功能，CRISPR‑Cas9核酸酶是将野生型CRISPR‑Cas9核酸的氨基酸序截掉8个即第494‑501位的氨基酸后重组所得到;野生型CRISPR‑Cas9核酸酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，或者，所述CRISPR‑Cas9核酸酶含有如SEQ ID NO.1所示90%的氨基酸序列，即SEQ ID NO.2。采用所述Cas9核酸酶变体（THSpCas9）能够提高编辑特异性，实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
-
公开(公告)号：CN110272881A
公开(公告)日：2019-09-24
申请号：CN201910581265.8
申请日：2019-06-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为一种来源于酿脓链球菌的CRISPR核酸酶SpCas9的截短型高特异性变异体及其应用。本发明中的CRISPR-Cas9（TSpCas9-V1/V2）核酸酶属于CRISPR-Cas9系统，TSpCas9-V1核酸酶将截短型CRISPR-Cas9（TSpCas9）核酸酶的第863位的氨基酸H突变成N，TSpCas9-V2核酸酶将截短型CRISPR-Cas9（TSpCas9）核酸酶的第862位的氨基酸H突变成A，将第863位的氨基酸H突变成N；该截短型高特异性变异体具有与野生型CRISPR-Cas9核酸酶相当的基因编辑活性，能够降低基因编辑中的脱靶，因而能用于对基因组DNA片段特定位置的精准编辑。
-
公开(公告)号：CN111909914A
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN202010695299.2
申请日：2020-07-19
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为一种来源于酿脓链球菌的CRISPR核酸酶SpCas9的高PAM兼容性截短型变异体txCas9及其应用。本发明中的高PAM兼容性截短型变异体txCas9核酸酶属于CRISPR-Cas9系统。txCas9核酸酶是将高PAM兼容性xCas9核酸酶的第180位到299位的氨基酸截掉后重组所得。该高PAM兼容性截短型变异体txCas9不仅具有与野生型CRISPR-Cas9核酸酶相当的基因编辑活性，而且能够识别NGN、GAA、GAT PAM，有效扩宽了CRISPR-Cas9核酸酶的靶向范围。重要的是，该小型化Cas9核酸酶适合使用装载容量有限的腺病毒载体进行体内运输，因而在生物医药的体内精准编辑方面具有更大的应用潜力。
-
公开(公告)号：CN110241099A
公开(公告)日：2019-09-17
申请号：CN201910488075.1
申请日：2019-06-05
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为来源于酿脓链球菌的CRISPR核酸酶SpCas9的截短变异体及其应用。本发明中，CRISPR-Cas9（TSpCas9）核酸酶属于CRISPR-Cas9系统，具有野生型CRISPR-Cas9核酸酶相当的剪切活性，所述CRISPR-Cas9（TSpCas9）核酸酶是将野生型CRISPR-Cas9核酸的氨基酸序列截掉120个即第180位到299位的氨基酸后重组所得；所述野生型CRISPR-Cas9核酸酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；或者所述CRISPR-Cas9核酸酶含有如SEQ ID NO.7所示90%的氨基酸序列，即SEQ ID NO.15。该截短变异体可用于基因组编辑、基因打靶、基因组工程、表观基因组工程、基因治疗与体外诊断。
-
公开(公告)号：CN110241098A
公开(公告)日：2019-09-17
申请号：CN201910488074.7
申请日：2019-06-05
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为一种来源于酿脓链球菌的CRISPR核酸酶SpCas9的截短型高特异性变体及其应用。本发明Cas9核酸酶变体（THSpCas9），属于CRISPR-Cas9系统，具有野生型CRISPR-Cas9核酸酶基因编辑功能，CRISPR-Cas9核酸酶是将野生型CRISPR-Cas9核酸的氨基酸序截掉8个即第494-501位的氨基酸后重组所得到;野生型CRISPR-Cas9核酸酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，或者，所述CRISPR-Cas9核酸酶含有如SEQ ID NO.1所示90%的氨基酸序列，即SEQ ID NO.2。采用所述Cas9核酸酶变体（THSpCas9）能够提高编辑特异性，实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
10
records
(took 0.028 seconds)
