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公开(公告)号：CN104450573A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410742929.1
申请日：2014-12-02
申请人： 大丰市佳丰油脂有限责任公司 , 大丰禾丰粮油工业有限公司 , 江南大学
摘要： 本发明提供的是一种含有微生物多糖和功能微生物的复合生态菌剂，为胶质芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌等菌株的复配制品，主要应用于农作物拌种和生物肥料。本发明产品应用于农作物种植，可有效提高土壤肥力，改善土壤性状，增加农作物产量。
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公开(公告)号：CN118581052A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410635539.8
申请日：2024-05-22
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了酶活与热稳定性提高的谷胱甘肽双功能合成酶突变体及应用，属于基因工程和发酵工程领域。所述谷胱甘肽双功能合成酶突变体选自如下任一种：其氨基酸序列由SEQ ID NO.1所示序列突变获得，所述突变为选自如下一个或多个氨基酸残基位点发生突变：61位、218位、485位和722位。本申请通过对谷胱甘肽双功能合成酶GshFst的氨基酸序列(SEQ ID NO.1)进行定点突变，获得的单突变体，以及两个位点突变获得的双突变体，其酶活和热稳定性相较于野生型均具有显著提升。本申请提供的酶突变体，在生产谷胱甘肽以及构建生产谷胱甘肽的基因工程微生物中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN118291492A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410407809.X
申请日：2024-04-07
申请人： 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 , 江南大学
摘要： 本发明将地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶基因簇pgsBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，将pgsBC替换为其他菌株来源的pgsBC，分别是枯草芽孢杆菌或甲基营养型芽孢杆菌，得到重组菌株B'(BS)C'(BS)A或B'(BM)C'(BM)A，与对照菌株B'(BL)C'(BL)A产生γ‑PGA的最大分子量6693.689kDa相比，异源表达BS和BM来源的PgsBC蛋白能产生更高分子量的γ‑PGA，分别为25657kDa、16741kDa。因此替换PgsBCA多蛋白复合体中PgsBC的来源是改变γ‑PGA分子量的有效方法。
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公开(公告)号：CN117106737A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202311071176.1
申请日：2023-08-23
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种维生素D3的C25位羟化酶突变体及其基因工程菌与应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的维生素D3羟化酶突变体是将巨大芽孢杆菌H‑1中CYP109E1‑H酶基因的293位组氨酸突变成了丙氨酸，得到维生素D3羟化酶突变体CYP109E1‑H1，并以pMA5为表达质粒，实现枯草芽孢杆菌中维生素D3羟化酶突变体的异源表达。本发明还提供了该突变体和工程菌在制备骨化二醇/或骨化三醇中的应用，本发明提供的工程菌能够在骨化二醇/或骨化三醇合成时，提高产物浓度积累量、缩短反应耗时，满足了工业化生产上缩短时间成本的生产需求。
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公开(公告)号：CN111321162B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202010142834.1
申请日：2020-03-04
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种全面表征大肠杆菌终止子强度的质粒系统及方法。根据终止子终止转录和保护上游基因mRNA的功能，设置了特征参数转录终止程度(α)、上游基因mRNA保护能力(β)和表观终止效率(η)。本发明还公开了表征上述终止子特征参数所用的探针质粒的构建方法及其应用。本发明中构建的终止子探针质粒为pTK、pTK‑dR和pTK‑sR，分别对应特征参数为α、β和η，为全面表征大肠杆菌终止子强度提供了有效工具，进而为合成生物学提供了精准的元件模块。
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公开(公告)号：CN114369561A
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202210026910.1
申请日：2022-01-11
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种调控CapBCA单体表达水平的菌株及在聚谷氨酸生产中的应用，本发明将天然生产菌地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶的基因簇capBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，利用不同数量的lacO调控合成酶基因簇各基因的表达水平，获得的重组菌株所生产的γ‑PGA产量为3.63～5.84g/L，产率为0.15～0.27g/L/OD600。还发现单独提高CapB和CapC的表达强度，及适度表达CapA均有利于γ‑PGA的合成，而且CapC对于γ‑PGA的合成发挥着至关重要的作用，其表达水平对γ‑PGA产量的影响贡献度可达68.24％。结果有助于深入了解γ‑PGA合成酶单体的功能，以及对γ‑PGA合成的影响规律。
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公开(公告)号：CN112813041B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202011620794.3
申请日：2020-12-31
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种分枝杆菌的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体和工程菌及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将分枝杆菌(Mcobacterium sp.)LY‑1的17β‑羟基类固醇脱氢酶17β‑HSDy的L173位点突变成了缬氨酸，得到突变体17β‑HSDy2，并将此突变体进行外源表达，重组菌B.Subtilis‑pMA5‑17β‑HSDy2的比酶活达到6882.45U·mg‑1，酶活提高16.4％。本发明还提供了突变体17β‑HSDy2的增强表达菌株，以pMV261为增强表达质粒，实现了突变体17β‑HSDy2在分枝杆菌LY‑1中的增强表达，相较于原始菌株显著的降低了9α‑羟基雄甾烯‑4‑烯‑3，17‑二酮的积累，提高了睾酮积累。该增强表达菌株还可用于雄甾烯‑4‑烯‑3，17‑二酮转化睾酮的生产，具有潜在工业应用。
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公开(公告)号：CN110791468B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201910973777.9
申请日：2019-10-14
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种分枝杆菌基因工程菌的构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明将重组质粒经转化进入分枝杆菌LY‑1细胞后，sgRNA会识别基因组上的特定区域并引导Cas9蛋白结合到目标位点，在该蛋白的作用下，目标位点处形成一个双链断裂的缺口，绝大多数的细胞因此死亡：随重组质粒引入的同源修复序列在重组酶的作用下通过双交换整合至缺口处，基因同源修复成功的细胞就此存活下来，并形成基因失活和外源基因插入等人工设计的基因型。本发明所构建的CRISPR‑Cas9系统针对同一基因的敲除效率为60％，与现有的分枝杆菌基因编辑方式相比更为便捷和高效。
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公开(公告)号：CN112921011A
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN202110376599.9
申请日：2021-04-07
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体和工程菌及应用，属于酶工程技术领域。本发明的分枝杆菌(Mycobacterium)LY‑1的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体是将3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶的320位天冬氨酸突变成了酪氨酸，得到3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体KstD1；以pET32a为表达质粒，以大肠杆菌BL21为表达宿主，实现分枝杆菌LY‑1中3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体的异源表达，重组菌大肠杆菌BL21‑pET32a‑KstD1能够在短时间内转化高浓度的C1,2‑位脱氢甾体化合物，且转化率达到98％，降低了生产成本，具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN112813041A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202011620794.3
申请日：2020-12-31
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种分枝杆菌的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体和工程菌及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将分枝杆菌(Mcobacterium sp.)LY‑1的17β‑羟基类固醇脱氢酶17β‑HSDy的L173位点突变成了缬氨酸，得到突变体17β‑HSDy2，并将此突变体进行外源表达，重组菌B.Subtilis‑pMA5‑17β‑HSDy2的比酶活达到6882.45U·mg‑1，酶活提高16.4％。本发明还提供了突变体17β‑HSDy2的增强表达菌株，以pMV261为增强表达质粒，实现了突变体17β‑HSDy2在分枝杆菌LY‑1中的增强表达，相较于原始菌株显著的降低了9α‑羟基雄甾烯‑4‑烯‑3，17‑二酮的积累，提高了睾酮积累。该增强表达菌株还可用于雄甾烯‑4‑烯‑3，17‑二酮转化睾酮的生产，具有潜在工业应用。
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