一种低氧条件下微囊化成骨细胞支持和调控造血干/祖细胞体外扩增的方法

    公开(公告)号:CN101508975A

    公开(公告)日:2009-08-19

    申请号:CN200910301161.3

    申请日:2009-03-26

    IPC分类号: C12N5/08

    摘要: 本发明公开了一种低氧条件下微囊化成骨细胞支持和调控脐血造血干/祖细胞(He)体外扩增的方法,属于生物技术与组织TSPCS程领域。其特征是将人源成骨细胞使用明胶-海藻酸钠-壳聚糖(GAC)微囊包埋作为基质饲养层细胞,在5%的低氧环境中与脐血HSPCs进行共培养,收获HSPCs。本发明使用GAC微囊将人源成骨细胞与脐血HSPCs隔离开,避免了细胞污染和免疫排斥反应。而微囊的孔道又可使微囊内部成骨细胞分泌的造血生长因子扩散到HSPCs聚集处,起到刺激造血干/祖细胞扩增的作用。而微囊材料本身又对生长因子的扩散起到缓释作用,使得微囊表面生长因子浓度梯度增大,这对于生长因子的长期作用很有帮助。并且,微囊化的成骨细胞形成了3D环境,与贴壁培养的成骨细胞共培养模式相比,一方面可以使培养体系中包含更多的成骨细胞,另一方面也使其具有更大的HSPCs-OBs作用面积。此外,在5%的低氧环境中,共培养体系可以更好的模拟人体骨髓的造血微环境杗iche,成骨细胞对造血干/祖细胞的干细胞特性维持和数量扩增作用都更为显著。