一种利用管内切虫来提取单条植物线虫基因组DNA的方法

    公开(公告)号:CN103602668A

    公开(公告)日:2014-02-26

    申请号:CN201310618805.8

    申请日:2013-11-29

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明提供了一种利用管内切虫来提取单条植物线虫基因组DNA的方法,所述方法的关键创新点为使用小型解剖刀在PCR管中将线虫切开,无需转管,有效地避免了管外切割线虫后转管造成的DNA损失,从而极大的提高了DNA提取的效率,而且使用本发明中的方法提取线虫DNA时无需冻融的环节,提取步骤更加简化。利用本发明中的方法提取获得的单条线虫基因组DNA模板满足常规PCR扩增、实时荧光PCR扩增、恒温扩增等分子检测技术的需求。此法高效、稳定、成本低、操作简单、安全无毒,可在基于核酸的分子检测鉴定中推广应用。

    运用实时荧光PCR技术鉴定剪股颖粒线虫的方法

    公开(公告)号:CN101419169B

    公开(公告)日:2010-11-10

    申请号:CN200810025752.8

    申请日:2008-01-11

    IPC分类号: G01N21/64 C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种运用实时荧光PCR技术鉴定剪股颖粒线虫(Anguina agrostis)的方法,利用剪股颖粒线虫特异性DNA序列,用生物信息学方法设计特异性引物和特异性探针,探针的5'端标记报告荧光基团,3'端标记淬灭荧光基团,应用荧光PCR法扩增剪股颖粒线虫靶基因,通过探针在反应过程中荧光信号的变化鉴定样品中是否含有剪股颖粒线虫。本发明不受虫龄和虫体数量的影响,较形态学和形态测量学鉴定方法更为快速、准确;操作简单,可标准化,解决了快速鉴定剪股颖粒线虫的标准方法的问题,大大节约了检测时间,加快了口岸草种的验放速度,促进了进出口贸易,节约了货物因长期在货场存放而产生的费用。