公开(公告)号：CN118421574A

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202410280847.3

申请日：2024-03-12

申请人： 天津大学浙江研究院(绍兴)

发明人： 乔建军 ,  李伟国 ,  秦臻 ,  田道光 ,  赵广荣 ,  田贵峰

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/42 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体及其应用，4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体为下列之一：SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第63位谷氨酸突变为丝氨酸；SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第478位天冬酰胺突变为丝氨酸；本发明的两个基因工程菌发酵生产丹参素的产量与野生型4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶的工程菌比，分别提高了42.46％和71.64％，分别达到715.24mg/L和861.66mg/L。本发明突破了4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶对4‑羟基苯乳酸底物特异性差、催化效率低的限制，显著提高了大肠杆菌生产丹参素的产率。本发明催化效率高，工艺简单，绿色环保。

公开(公告)号：CN118272459A

公开(公告)日：2024-07-02

申请号：CN202410280845.4

申请日：2024-03-12

申请人： 天津大学浙江研究院(绍兴)

发明人： 乔建军 ,  田道光 ,  田贵峰 ,  李伟国 ,  秦臻 ,  赵广荣

IPC分类号： C12P7/42 ,  C12N9/04 ,  C12N15/70

摘要： 本发明公开了一种D‑2‑羟基酸脱氢酶在催化4‑羟基苯丙酮酸生成4‑羟基苯乳酸中的应用，本发明将来自长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)的D‑2‑羟基酸脱氢酶(BlFldH)以pTrc99a质粒为载体在一株生产4‑羟基苯丙酮酸的大肠杆菌中表达，经过摇瓶发酵和产物测定，D‑2‑羟基酸脱氢酶(BlFldH)能够高效催化4‑羟基苯丙酮酸生成4‑羟基苯乳酸。大肠杆菌工程菌株TS5P3积累4‑羟基苯乳酸达1155.05mg/L。

公开(公告)号：CN118638875A

公开(公告)日：2024-09-13

申请号：CN202410827516.7

申请日：2024-06-25

申请人： 天津大学浙江研究院(绍兴)

发明人： 乔建军 ,  郁庄 ,  李伟国 ,  田道光 ,  罗春威 ,  卢立夏 ,  梁冬梅

IPC分类号： C12P7/42 ,  C12N1/20 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种大肠杆菌高产丹参素的发酵方法，包括如下步骤：对大肠杆菌进行种子培养，得到种子液；将所述种子液，接种于发酵培养基中，在35‑40℃，用氨水调pH，同时溶氧与搅拌关联，开始发酵；发酵到6h时，加IPTG为诱导剂；降温到25‑35℃，继续发酵到6.5h时，开始补加补料培养基，继续发酵；发酵到40h，停止；本发明的一种大肠杆菌高产丹参素的发酵方法，采用优化后的发酵培养基进行发酵，培养基成份简单清晰，原料成本低，发酵工艺简便，产量水平高，大大提高了丹参素产量，使大肠杆菌工业化生产丹参素得以实现可，不需要成本高的底物左旋多巴。