公开(公告)号：CN118421574A

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202410280847.3

申请日：2024-03-12

申请人： 天津大学浙江研究院(绍兴)

发明人： 乔建军 ,  李伟国 ,  秦臻 ,  田道光 ,  赵广荣 ,  田贵峰

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/42 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体及其应用，4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体为下列之一：SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第63位谷氨酸突变为丝氨酸；SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第478位天冬酰胺突变为丝氨酸；本发明的两个基因工程菌发酵生产丹参素的产量与野生型4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶的工程菌比，分别提高了42.46％和71.64％，分别达到715.24mg/L和861.66mg/L。本发明突破了4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶对4‑羟基苯乳酸底物特异性差、催化效率低的限制，显著提高了大肠杆菌生产丹参素的产率。本发明催化效率高，工艺简单，绿色环保。

公开(公告)号：CN118272459A

公开(公告)日：2024-07-02

申请号：CN202410280845.4

申请日：2024-03-12

申请人： 天津大学浙江研究院(绍兴)

发明人： 乔建军 ,  田道光 ,  田贵峰 ,  李伟国 ,  秦臻 ,  赵广荣

IPC分类号： C12P7/42 ,  C12N9/04 ,  C12N15/70

摘要： 本发明公开了一种D‑2‑羟基酸脱氢酶在催化4‑羟基苯丙酮酸生成4‑羟基苯乳酸中的应用，本发明将来自长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)的D‑2‑羟基酸脱氢酶(BlFldH)以pTrc99a质粒为载体在一株生产4‑羟基苯丙酮酸的大肠杆菌中表达，经过摇瓶发酵和产物测定，D‑2‑羟基酸脱氢酶(BlFldH)能够高效催化4‑羟基苯丙酮酸生成4‑羟基苯乳酸。大肠杆菌工程菌株TS5P3积累4‑羟基苯乳酸达1155.05mg/L。